【目的】探究α-酮戊二酸二甲酯(dimethyl alpha-ketoglutarate, DMKG)预处理对犬脂肪Stemmed acetabular cup源间充质干细胞(canine adipose-derived mesenchymal stem celMLN4924ls, cAD-MSCs)免疫调节的影响。【方法】利用不同浓度的DMKG培养基，探索DMKG对cAD-MSCs增殖的影响。用1 mmol/L DMKG预处理cAD-MSCs后，采用ELISA方法检测培养上清液中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10及转化生长因子-β(TGF-β)的水平。以含100、250、500、1 000、2 000 ng/mL的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)培养基培养RAW264.7细胞，24 h后采用CCK-8法检测细胞存活率，筛选最适LPS浓度以建立RAW264.7细胞炎症模型。把RAW264.7细胞分为空白对照组、LPS组、MSCs组及DMKG-MSCs组，将DMKG预处理后的cAD-MSCs与250 ng/mL LPS处理的RAW264.7细胞共培养24 h后，采用CCK-8法检测细胞增殖活性，Transwell法检测细胞迁移能力，Griess法检测培养上清液中一氧化氮(NO)含量，实时荧光定量PCR检测一氧化氮合成酶(iNOs)、IL-1β、IL-6、IL-10和精氨酸酶-1(Arg-1)的mRNA表达水平，流式细胞仪检测M1巨噬细胞表面标记物CD80~+、CD86~+。【结果】与MSCs组相比，DMKG预处理cAD-MSCs后培养上清液中TGF-β、IL-10的分泌显著升高(P<0.05),而IL-1β、IL-6的分泌受到显著抑制(P<0.05),TNF-α分泌无显著差异(P>0.05)。LPS浓度为250 ng/mL时，RAW264.7细胞增殖活性达到最高。与LPS组相比，MSCs组和DMKG预处理后的cAD-MSCs均能极显著抑制RAW264.7细胞的增殖活性和迁移能力(P<0.01),抑制细胞NO的释放量并下调iNOs的mRNA表达水平(P<0.01);此外，下调RAW264.7细胞IL-1更多β(P<0.01)、IL-6 mRNA表达水平，上调IL-10 mRNA表达水平(P<0.05;P<0.01),M2巨噬细胞表面标记物Arg-1的mRNA表达水平极显著上调(P<0.01),M1巨噬细胞表面标记物CD80~+、CD86~+的表达极显著降低(P<0.01);与MSCs组相比，DMKG预处理的cAD-MSCs抑制巨噬细胞激活效果更好。【结论】DMKG能有效增强cAD-MSCs的免疫调节作用，表现营养因子TGF-β和抑炎细胞因子IL-10表达增多，促炎细胞因子IL-1β和IL-6表达减少，抑制LPS刺激条件下RAW264.7细胞的激活，减轻细胞炎症反应。