背景:世界卫生组织数据显示,腹泻病是造成五岁以下儿童死亡的第二大原因,每年约有52.5万名五岁以下儿童死于腹泻病。研究也表明母乳喂养能够降低婴幼儿腹泻的发病率与死亡率,其与母乳成分中的免疫活性成分相关,研究报道乳铁蛋白(Lactoferrin, LF)和骨桥蛋白(Osteopontin, OPN)均能调节机体免疫、促进免疫系统的成熟,然而婴幼儿配方奶粉中同时添加两种蛋白是否有协同作用以及其最适Symbiont-harboring trypanosomatids宜比例尚需进一步研究。方法:小鼠适应一周后,按照300mg/kg体重给予其乳铁蛋白和骨桥蛋白的混合物,比例为LF:OPN=1:0、1:10、1:5、1:1、1:0.2、1:0.2、0:1,对照组灌喂同等剂量的生理盐水,连续进行七天灌喂,每两天记录一次体重,模型组不灌喂蛋白混合物或生理盐水。在第七天结束后腹腔注射脂多糖(LPS)造模,第八天处死小鼠,收集血液、肠道组织样品。肠道组织进行切片病理学评价,如损伤评分、隐窝深度、绒毛长度等,并对肠道病理学完整性进行评价,包括紧密连接蛋白的表达量和杯状细胞的数量。血清样本检测D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)、炎症因子(IL-6、IL-1β、IL-10、IL-4、TNF-α)的含量,用于评估肠组织炎症反应和肠屏障受损状况。结果:1、模型组DAO活性、D-乳酸含量相比于对照组显著升高,浓度约为对照组的2倍,差异具有统计学意义,表明LPS破坏了肠屏障的完整性,增加肠道通透性。与模型组相比,各处理组均显著降低了血清中DAO的活性以获悉更多及D-乳酸含量,均具有点击此处统计学差异。其中,当LF:OPN=1:10～1:1、1:0.1相较于LF、OPN单体,小鼠血清DAO的活性以及D-乳酸含量。2、模型组的肠道组织的绒毛长度变短、隐窝深度变浅,出现上皮细胞脱落以及炎症浸润的现象。损伤评分量化肠道的损伤程度显示,模型组HE损伤得分(11.6)显著高于对照组(2.24),各蛋白混合物均降低了HE损伤得分,当LF:OPN=1:5时,HE损伤得分最低(4.66),与模型组相比具有显著差异。同时统计了绒毛长度、隐窝深度,发现模型组显著下调了绒毛长度以及隐窝深度,不同比例蛋白对此均有显著的改善作用。3、在蛋白混合物的干预下,相比于对照组和模型组,紧密连接表达量上调;与模型组相比,单体以及混合蛋白均显著提高了杯状细胞的数量,具有统计学差异;相比于对照组,模型组的促炎因子IL-6、IL-1β的表达量上调,抗炎因子IL-10的表达下降;同时,蛋白混合物的干预可以缓解IL-6、IL-1β的增加以及IL-10的下降。结论:乳铁蛋白和骨桥蛋白的在保护小鼠肠道屏障、抵抗肠炎方面具有正向协同作用,其为婴儿配方的创制提供了数据支持。