笔者对AmCI,AsATI和AsC/E-1的编码序列进行密码子优化和基因合成，并利用点突变技术对其关键位点Cys~(2nd)和Cys~(6th)进行替换，结合原核表达和胶内活性染色分析，探讨Cys~(2nd)-CyLateral medullary syndromesNSC 125973体内~(6th)对典型TIL类蛋白酶抑制剂抑制活性和抑制特异性的影响.SDS-PAGE结果显示，AmCI,AsATI和AsC/E-1及其突变体在上清中皆有表达.胶内活性染色结果显示PLX5622使用方法，AmCI和AsC/E-1不仅能抑制胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶活性，还能强烈抑制枯草杆菌蛋白酶活性，但对胰蛋白酶没有抑制作用.AsATI能抑制胰蛋白酶活性，却不能抑制胰凝乳蛋白酶、弹性蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶活性.将Cys~(2nd)和Cys~(6th)分别替换为Asp和Leu后，AmCI,AsATI和AsC/E-1原有的抑制活性皆大大降低.值得注意的是，AsATI的突变体产生了微弱的枯草杆菌蛋白酶抑制活性.上述研究结果表明，Cys~(2nd)-Cys~(6th)对典型TIL类蛋白酶抑制剂的抑制活性和抑制特异性至关重要.笔者希望该研究不仅可为AmCI,AsATI和AsC/E-1的生理功能研究奠定基础，还能为TIL类蛋白酶抑制剂活性和特异性的定向改造提供一定的依据.