猪链球菌(Streptococcus suis)是一种危害严重的人畜共患病原菌，猪链球菌溶血素(suilysin, Sly)在猪链球菌的侵袭和致病中起关键作用，对多种类CP-456773核磁型的细胞具有毒性作用，但目前关于Sly的细胞毒性机制研究较少。为了探讨低浓度(0.3～0.6μg/mL) Sly诱导猪肾细胞PK-15(porcine kidney-15)的死亡方式，本研究首先采用原核表达并纯化获得重组猪链球菌溶血素(recombinant suilysin, rSly)，通过乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放检测rSly对PK-15细胞的毒性作用，并针对4种常见程序性细胞死亡方式，利用qPCR、间接免疫荧光、Werstern blot和流式细胞术对rSly作用于PK-15细胞12及24 h诱导的细胞死亡方式进行验证。结果显示，成功表达具有较高溶血活性(溶血单位为214)的rSly毒Fc-mediated protective effects素蛋白，确定其对PK-15细胞的毒性作用呈浓度依赖性，并且发现rSly作用PK-15细胞12和24 h均引起PK-15细胞凋亡相关基因—半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteine aspartic acid specific protease 3, Caspase 3)、Caspase 9的转录水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率与r Sly浓度呈正相关，0.6μg/mL rSly作用PK-15细胞24 h，细胞凋亡率从9.35%增至49.9%；自噬关键基因—微管相关蛋白轻链3B(microtubule associated protein 1 light chain 3β, LC3β)基因转录水平无明显变化且无自噬小体形成；焦亡关键基因—胃泌素D(gasdermin D,GSDMD)的转录水平无明显变化且GSDMD蛋白未发生明显切割AM-2282生产商；坏死性凋亡相关基因下调，且磷酸化混合系列蛋白激酶样结构域蛋白(phosphorylated mixed lineage kinase domain-like protein, p-MLKL)表达水平受到抑制。上述结果提示低浓度rSly诱导PK-15细胞死亡的方式主要是凋亡。本研究丰富了Sly毒性作用的细胞模型，有助于揭示参加猪链球菌感染发展的分子机制。