木瓜总三萜（total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa， TCS）是防治胃黏膜损伤的活性组分，具有潜在的抗衰老作用。然而，TCS是否改善胃衰老，尤其是对于其抗胃衰老的分子机制，目前仍不清楚。基于此，本研究旨在探讨PLX4032TCS对D-半乳糖（D-galactose， D-gal）诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1衰老的影响及作用机制，为TCS在临床上用于预防胃衰老提供科学数据。将体外培养的GES-1细胞和转染谷氨酰胺酶1（glutaminase 1， GLS1）过表达（overexpression GLS1， GLS1-OE）质粒的GES-1细胞用D-gal诱导衰老后，给予TCS和谷氨酰胺酶1（glutaminase 1， GLevulinic acid biological productionLS1）抑制剂bis-2-(5-phenylacetamido-1，2，4-thiadiazol-2-yl) ethyl sulfide（BPTES），考察各组细胞存活率、衰老标志物β-半乳糖苷酶（β-galactosidase， SA-β-gal）染色阳性细胞比例、线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential， MMP）和细胞凋亡的变化；采用酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immuno sorbent assay， ELISA）法和比色法检测各组细胞上清液和细胞内GLS1活性、谷氨酰胺（glutamine， Gln）、谷氨酸（glutamate， Glu）、α-酮戊二酸（α-ketoglutarate， α-KG）、尿素和氨水平；采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中GLS1、线粒体凋亡信号通路相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示，与D-gal模型组和GLS1-OE D-gal模型组相比，TCS可显著降低D-gal诱导衰老GES-1细胞和GLS1-OE衰老GES-1细胞SA-β-gal染色阳性细胞率和MMP，抑制衰老细胞存活，促进其细胞凋亡（P＜0.01），降低上清液和细胞内GLS1活性和Gln、Glu、α-KG、尿素、氨含量（P＜0.01），降低线粒体中细胞色素C（cytochrome C， Cyto C）浓度以及细胞中GLS1、增殖细胞核抗原mRNA和蛋白表达（P＜0.01），降低细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达和半胱氨酸蛋白酶-9前体（pro-caspase-9）、pro-caspase-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值（P＜0.01），升高胞质中Cyto C浓度和细胞中Bax、Bad、凋亡蛋白酶激活因子1（apoptosis protease activating factor 1， Apaf-1）mRNA表达及剪切型半胱氨酸蛋白酶-9（cleaved-caspase-9）、cleaved-caspase-3、剪切型聚ADP核糖聚合酶-1（cleaved-poly ADP ribose polymerase-1， cleaved-PARP-1）蛋白表达（P＜0.01）。以上结果表明，TCS可对抗D-gal诱导GES-1细胞衰老，其作用机制与抑制Gln/GLVX-661体外S1/α-KG代谢轴、激活线粒体凋亡通路，进而促进衰老细胞凋亡、清除衰老细胞密切相关。