胃癌不仅是近几年最常见的癌症之一,更是致死率极高的癌症之一。但是由于早期胃癌无明显的症状,筛查率较低,导致患者确诊已是胃癌晚期,胃癌治疗效果差,愈合性低,存活率低。因此,早诊断,早治疗对胃癌患者具有极大的意义。此外,核酸适配体作为化学抗体,因为其具有成本低,易修饰,稳定性好及有较好的组织渗透性且无免疫原性等多个优点,被广泛应用于临床诊断和药物研发。本课题中,采用基于磁珠的Media-SELEX(Med-SELEX)技术,筛选特异性靶向胃癌细胞分泌蛋白的核酸适配体。筛选过程以SGC-7901胃癌细胞培养液和SNU-1胃癌细胞培养液为正筛靶标,以HFE-145正常胃上皮细胞培养液为反筛靶标,通过增加筛选压力及替换筛选靶标提高适配体的特异性,共进行12轮筛选。上海生工高通量测序,通过同源分析、二级和三级结构预测及G四联体分析等方法,选出4条候选适配体进行后续验证Dibutyryl-cAMP半抑制浓度。通过对亲和力和特异性验证,选择APT-1作为最优适配体。q-PCR结果显示FG-4592生产商,适配体APT-1不仅对胃癌细胞培养液有较高亲和力,Kd值约5 n M,对胃癌血清也有较好亲和力。利用磁珠偶联法验证适配体APT-1特异性,适配体APT-1对胃癌细胞培养液RFU值显著高于其它细胞培养液RFU值,表明适配体APT-1有较好特异性。q-PCR法和量子点法进一步验证表明适配体对胃癌血清具有很好特异性。APT-1血清中稳定性实验及对细胞毒性和迁移性影响表明,适配体APT-1在血清中24 h后逐water disinfection渐被降解,对细胞无明显毒性且不影响细胞迁移。本研究通过Med-SELEX技术最终获得对胃癌血清亲和力较好,特异性较高的适配体APT-1,且该适配体不易被降解,且对细胞无毒性,对于胃癌的早期诊断,具有一定的应用价值。