黄嘌呤氧化还原酶(xanthine oxidoreductase,XOR)是催化嘌呤生成尿酸(UA)的关键酶,在体内以两种Mirdametinib配制可以相互转化的亚型黄嘌呤脱氢酶(XDH)和黄嘌呤氧化酶(XO)存在,XDH在催化反应中同时生成NADH,而XO则同时生成活性氧物质(ROS)。本研究旨在分别建立XOR及其亚型XDH、XO的活性测定方法,探明具有XOR抑制活性的化合物CC15009对XOR及其亚型XO、XDH的作用特征、以及基于靶点XORProliferation and Cytotoxicity改善小鼠高尿酸血症(HUA)的作用特点。Tofacitinib首先,根据XO、XDH两亚型酶在催化过程中使用电子受体不同的原理,分别建立了牛奶来源(纯酶体系)和小鼠肝脏XOR及其亚型XO、XDH活性的酶动力学测定方法,确定了测定体系中底物浓度、电子受体浓度、pH值、反应时间等最适反应条件以及酶活性测定范围,并应用经典XOR抑制剂别嘌呤醇作为阳性对照药分别验证了上述试验方法。随后,应用分子对接技术、表面等离子体共振(SPR)技术、建立的XOR及其亚型活性测定方法等,探明化合物CC15009对XOR及其亚型XO、XDH是可逆的、竞争性抑制、抑制活性强度相近等作用特征。最后,应用3种HUA小鼠模型明确了化合物CC15009基于靶点XOR改善HUA的作用特点,即对由XOR底物黄嘌呤或酵母诱导的急性或慢性高尿酸血症具有明显治疗作用,而对尿酸诱导的高尿酸血症疗效不明显。综上所述,本研究成功建立了 XOR及其亚型XO、XDH的活性测定方法,并探究了化合物CC15009抑制XOR及其亚型XO、XDH的分子作用特征,及其基于靶点XOR治疗HUA的作用特点,为研发抗高尿酸血症的新型XOR抑制剂提供了新的思路和实验基础。