目的:通过网络药理学分析,预测雷公菌活性成分对羟基苯甲醛(P-hydroxybenzaldehyde此网站,HD)治疗非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver diseaseCB-839化学结构,NAFLD)的作用靶点及关键通路;通过验证性实验,探究HD对高脂饮食诱导的NAFLD大鼠模型是否有保肝疗效及其对AMPK/ACC信号通路的影响,为NAFLD临床诊疗提供新思路。方法:利用Swiss Target Prediction等数据库查询HD有效活性成分并筛选疾病潜在的作用靶点,Venn图构建HD与NALFD疾病靶点交叉图,利用PPI网络分析对关键蛋白相互作用进行构图并可视化,GO富集分析,探寻HD干预NAFLD的关键通路。验证性实验:将48只SD大鼠随机分为正常组、模型组、HD高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg)组和阳性药水飞蓟素(120 mg/kg)组。除正常组大鼠每天饲喂标准饲料外,其余各组大鼠连续喂养高脂饲料8周以建立模型。记录大鼠体重,肝脏系数,检测肝功能(ALT、AST)、血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝脏抗氧化因子(GSH-Px、SOD、MDA)、肝脏炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)等指标的变化。采用H&E染色观察大鼠肝脏组织的病理变化,Western blot检测AMPK/ACC信号通路相关蛋白表达。结果:Venn图结果表明,HD中存在与NAFLD疾病相关的潜在靶点共26个;PPI蛋白互作网络图及GO富集分析可视化分析结果显示,HD干预NAFLD疾病的关键通路有亚油酸代谢过程、胰岛素分泌调节、脂质氧化及炎症反应调节等关键通路。验证性实验结果:与模型组相比,HD各剂量组和水飞蓟素组大鼠体质量、肝脏系数显著降低(P<0.01);生化指标检测结果显示中、高剂量组HD可显著降低NAFLD大鼠血清TC、TG、AST、ALT、LDL-C和MDA水平,升高HDL-C含量(P<0.05或P<0.01);ELISA结果表明中、高剂量HD能明显升高NAFLD大鼠肝组织GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量,显著降低肝脏炎性细胞因子Tgut infectionNF-α、IL-6和IL-1β的水平(P<0.05或P<0.01);H&E结果显示HD可明显减轻肝组织脂肪变性和炎症细胞浸润;Western blot结果表明,HD激活AMPK/ACC信号通路,显著增加模型大鼠肝脏p-AMPK和p-ACC蛋白表达(P<0.05或P<0.01)。结论:HD可能通过干预AMPK/ACC信号通路来减少脂质合成、参与肝脏合成代谢,并对抗肝脏氧化应激、炎性反应,从而达到改善NAFLD的目的。