深共熔溶剂提取黄酮类化合物的方法研究

现代科技的快速发展为天然产物有效成分的提取和功能研究提供了新途径,有关的研究和实graft infection践不断深入。近年来,低毒性、环境友好、价廉、操作简便的提取溶剂成为天然产物化学领域的热点之一。离子液体、超临界流体、深共熔溶剂等提取溶剂引起研究工作者的广泛关注。由氢键受体和氢键供体制备而成的二组分或三组分深共熔溶剂,其熔点显著低于各个组分纯物质的熔点,在天然产物化学、电化学、有机合成、药物缓释等领域应用潜力巨大。本文选择了11种不同Regorafenib配制摩尔比的深共熔溶剂,对其制备工艺进行了研究,分析其密度和黏度;采用深共熔溶剂分别提取杨梅叶、瓜蒌皮中的黄酮类化合物,并采用大孔树脂对提取物进行分离纯化,并对杨梅素和芦丁含量测定,优化了提取工艺;最后对提取分离的芦丁、杨梅素进行了抗氧化活性的研究。主要进行了以下研究工作:(1)研究了深共熔溶剂制备及其物理性质。结果发现,制备的11种深共熔溶剂在氢键受体与氢键供体相同的条件下,随着氢键供体摩尔比的增大,制备深共熔溶剂消耗时间更少。随着温度的上升,深共熔溶剂的黏度在逐渐降低,深共熔溶剂的黏度与氢键供体的黏度有关。氢键供体为多元醇类制备的深共熔溶剂密度值更小,深共熔溶剂的密度由氢键供体决定。(2)研究了杨梅叶中黄酮类化合物提取、分离及抗氧化性。研究发现,使用11种含水率为30%的深共熔溶剂提取杨梅叶中杨梅素,与使用体积分数80%的乙醇比较,选择DES-5(氯化胆碱-草酸)的组合可获得较好的提取效果。响应面试验结果表明,获得最佳的提取条件为:含水率19%,液料比37:1 m L/g,提取温度72℃,提取时间45 min,在此条件下,杨梅素提取量为21.58 mg/g。最优组合的提取液经AB-8大孔吸附树脂吸附解吸,得到的最佳结果为吸附速率为1 BV/hr,使用无水乙醇解吸速率为1BV/hr,解吸体积为2 BV。DPPH法与·OH自由基法对杨梅素的抗氧化活性的研究中,在2μg/m L~16μg/m L的浓度下杨梅素的清除率要比Vc的更好。(3)研究了瓜蒌皮中黄酮类化合物提取、分离及抗氧化性。研究发现,使用体积分数为80%甲醇与制备的11中含水率为30%CP-690550细胞培养的深共熔溶剂提取瓜蒌皮中的芦丁,采用DES-3(氯化胆碱-乙二醇)可获得较好的提取效果。采用响应面法优化得到的最佳提取工艺条件为:含水率36%,液料比25:1 m L/g,提取温度57℃,提取时间34 min,在此条件下,芦丁提取量为28.77μg/g。使用AB-8型大孔树脂分离纯化瓜蒌皮中的芦丁,甲醇解吸,旋蒸。在瓜蒌皮中的芦丁浓度为20μg/m L~180μg/m L的范围内对DPPH具有良好的抗氧化作用;在Vc与瓜蒌皮中的芦丁浓度为20μg/m L~160μg/m L的范围内对·OH自由基的清除率逐渐增大,瓜蒌皮中的芦丁的抗氧化效果比Vc略差。