缺血再灌注导致急性肾损伤中的细胞死亡形式初探

目的 探究在肾缺血再灌注损伤(IRI)模型中存在的细胞死亡形式。方法 将24只Wistar大鼠随机分为4组:正常组(NC组)、假手术组(Sham组)、肾缺血组(RI组)、肾缺血再灌注组(RIR组)。RI组及RIR组通过钳夹双肾动脉行30min双肾动脉阻断,诱导肾缺血,RIR组阻断30min后松开钳夹恢复血流180min制成肾缺血再灌注模型。NC组不处理,MLN8237配制Sham组开腹但不阻断双侧肾动脉。再灌注180min结束后收集血清和肾组织。免疫组化、免疫印点击此处迹法对肾组织中混合系列蛋白激酶样结构域蛋白(MLKL)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)进行定位及表达水平检测,TUNEL法分析肾小管细胞凋亡情况。定量分析超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化。结果 TUNEL法显示肾脏细胞凋亡明显增加。Westem blot检测显示RIR组与NC组相比,MLKL表达上升,GPX4表达降低(P <0.05),免疫组化病理切片结果与其一致。SOD活力显著下降(P <0.05),MDA水平明显上升(P <0.05)。结论 RIR模型中肾小管细胞死亡数增加,抗氧化能力下降,RIR中有坏死性凋亡(necroptosishand infections)和铁坏死(ferroptosis)两种细胞死亡形式的参与。