目的:膜性肾病(Membranous nephropathy,MN)是最常见的成人肾病综合征病理类型,机制复杂尚不明确,大约三分之一的MN患者发展为终末期肾病(end stage renal disease,ESRD),并伴随严重并发症。目前,MN的诊断金标准仍是肾脏穿刺活检术,操作有创不利于重复检测。探索兼具敏感性、特异性、无创性的MN潜在靶抗原已成为一个重要的研究领域。磷脂酶A2受体(anti-phospholipase A2 receptor,PLA2R)和1型血小板反应蛋白7A域(thrombospondin type 1 domain containing 7A,THSD7A)被证明是MN的生物标志物,分别占原发性MN的70-80%和1-5%,然而研究数据多基于欧洲、北美地区人群,我国对其血清学表达及临床特征的研究报道较少。近年来,外泌素1/外泌素2(exostosin 1/exostosin 2,EXT1/EXT2)、信号素3B(semaphorin 3B,Sema-3B)、神经表皮生长因子1(neural epidermal growth factor-like 1 protein,NERepSox说明书LL-1)等被提出是MN的潜在标志物,这些标志物肾组织阳性率很低,国内鲜有相关报道,血清学抗体表达情况更不明确。本课题通过对MN患者进行血清抗PLA2R、THSD7A抗体检测,并在PLA2R/THSD7A双阴性的MN患者中检测EXT1/EXT2、Sema-3B、NELL-1等表达浓度,为我国相关MN的疾病特征提供临床数据。方法:1.纳入病理诊断为膜性肾病的372名患者,采集血样本,收集基线信息、合并症、肾穿刺病理结果、用药情况、实验室化验结果、血清PLA2R抗体浓度、THSD7A抗体浓度等信息,采用R语言(4.2.0)进行统计分析,检验水准为α=0.05。2.在第一部分基础上,研究纳入30名PLA2R及THSD7A表达均阴性30名膜性肾病患者,用定量试剂盒(双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验)检测血清EXT1、EXT2、Sema-3B、NELL-1抗体的浓度,进行相关性分析,统计学部分同1。结果:1.纳入的372名膜性肾病患者中,男性243人(65.32%)、女性129人(34.68%);患者发病平均年龄为31.68±12.27岁(16岁～77岁);Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期膜性肾病人数分别为45(12.1%)、262(70.43%)、39(10.49%);PLA2R病理阳性率为88.62%,血清PLA2R阳性率为68.3%;35.75%患者合并有高血压病,其次为糖尿病(11.56%);膜性肾病患者血白蛋白、免疫球蛋白Igk、k/λ偏低,总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、24h尿蛋白偏高;相关性分析中,血清PLA2R浓度与24h尿蛋白、补体C4、低密度脂蛋白、甘油三酯、胱抑素C、血肌酐、红细胞沉降率正相关;血清PLA2R浓度与MPO、Igk、Igλ、Ig G、肾小球滤过率、总蛋白、白蛋白、红细胞计数负相关,差异有统计学意义(P<0.05);纳入膜性肾病患者血清THSD7A阳性率为0.27%。2.血清PLA2R/THSD7A双阴性的膜性肾病患者中女性占60%,双阴患者平均发病年龄为41.43±11.97岁,双阴膜性肾病患者人数随病理分期逐渐升高而降低,10%的双阴患者合并有高血压病,合并有糖尿病、乙肝病毒感染或风湿系统疾病的患病率均为6.67%。双阴膜性肾病患者血白蛋白指标较低,总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、24h尿蛋白较高,抗MPO,PR3,GBM抗体阳性率分别为20%,10%,10%。其余化验指标大致在正常参考区间。相关性分析显示,血清SEMA-3B浓度与乙肝病毒感染情况正相关;血清NELL-1浓度与甘油三酯、乙肝病毒感染、白细胞计数、中性粒细selleck合成胞数正相关;血清EXT1浓度与Ig M正相关,与年龄负相关;血清EXT2浓度与白细胞计数、中性粒细胞数、淋巴细胞数、甘油三酯正相关,与Ig G水平负相关,差异有统计学意义(intravenous immunoglobulinP<0.05)。结论:1.MN患者PLA2R肾组织阳性率高于血清学阳性率,病理/血清学PLA2R表达双阳性患者可能有更差的血脂、24h尿蛋白等异常化验指标。2.血清抗PLA2R抗体浓度在MN病理分期上存在明显差异,与肾功能、血脂等临床指标具有重要相关性,可以通过监测PLA2R抗体浓度,来预测MN患者的临床结果,也可以进行早期诊断。3.本研究中372名MN患者进行了血清THSD7A抗体检测,据我们了解,这是国内目前人数最多的血清THSD7A抗体研究,而阳性率只有0.27%,并不符合国外1-5%的发病率,这可能和地区差异有关。4.PLA2R/THSD7A双阴性MN患者血清NELL-1、EXT1、EXT2、Sema-3B表达与MN病理分期、血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白等与肾脏病发展密切相关的指标没有显著相关性。但由于样本量少,对于这些指标能否反映MN活动性、预后情况等,还需要扩大样本量进一步研究。