目的 探索过氧化氢（hydrogen peroxide, H_2O_2）诱导慢性氧化应激在小胶质细胞衰老中的作用。方法 选择购自ATCC的10代以内BV2小胶质细胞，采用0、50、100、200μmol/L不同浓度的H_2O_2处理BV2小胶质细胞。根据H_2O_2使用浓度将其分为对照组、H_2O_2-5MLN4924细胞培养0μmol/L组、H_2O_2-100μmol/L组、H_2O_2-200μmol/L组。应用CCK8细胞增殖实验测定细胞增殖，通过衰老相关β半乳糖苷酶（senescence associated β galactosidase, SA-β-gal）染色实验和实时荧光定量聚合酶链反应检测衰老相关周期蛋白分子p16、p21、p53及衰老相关分泌表型基因[白细胞介素-1β(interleukin-1 beta, IL-1β)、转化生长因子β(transforming growth factor-β, TGF-β)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein 9, MMP9)]的表达变化来测定细胞衰老。结果 在诱导过程中，H_2O_2-200μmol/L对BV2小胶质细胞损伤较大，因此未进行后续检测。最终收集对照组、H_2O_2-50μmol/L组和H_2O_2-100μmol/L组细胞。对照组、H_2O_2-50μmol/L组、H_2O_2-100μmol/L组的细胞存活率（F=46.176,P<0.001）、SA-β-gal染色阳性率（F=553.1,P<0.001）比较，差异均有统计学意义。H_2O_2-50μmol/L组细胞存活率无明显改变（P>0.05）,H_2O_2-100μmol/L组细胞存活率明显下降（P<0.001）。H_2O_2-50μmol/L组、H_2O_2-100μmol/L组细胞SA-β-gal染色阳性率均升高（P<0.001），且H_2O_2-100μmol/L组SA-β-gal染色阳性率高于H_2O_2-50μmol/L组（P<0.001）。在50、100μmol/L H_genetic introgression2O_2诱导下，p16、p21、p53的mRNA水平均升高（P<0.05）,IL-1B、TGF-β、MMP9 mRNA均上调（P <0.05），且H_2O_2-100μmol/L组更明显（P <0.05）。结论 使用100μmol/L H_2O_2诱导8 d可成功建立BV2小胶质细胞衰老模型，其机制可能与促进p16、p2Galunisertib使用方法1、p53、IL-1β、TGF-β、MMP9分泌有关。