目的:结核病耐药问题日益严重,我国乃至全球结核病控制和治疗仍然面临着严峻的挑战。因而,寻找新的安全有效的抗结核药物具有重要意义。本研究通过牛型结核分枝杆菌减毒nonsense-mediated mRNA decay株(Mycobacterium bovis,M-bovis)感染巨噬细胞建立体外感染模型,基于Nrf2通路探讨姜黄素(Curcumin,Cur)对结核分枝杆菌感染巨噬细胞氧化应激的抑制作用,以期为探讨结核病发病机制、开展宿主导向治疗方法提供一定的实验依据。方法:以THP-1源性巨噬细胞建立感染模型,实验分4组:(1)对照组(Control);(2)牛型结核分枝杆菌组(M-bovis);(3)牛型结核分枝杆菌+姜黄素组(M-bovis+Cur);(4)牛型结核分枝杆菌+姜黄素+ML385组(M-bovis+Cur+ML385),按上述分组方法培养细胞48 h后收集。采用活性氧(ROS)检测试剂盒,荧光显微镜下观察各组细胞ROS荧光强度;采用比色法检测细胞还原型谷胱甘肽(GSH)含量;Western Blotting检测Nrf2及其下游靶基因NQO1、HO-1的蛋白表达;MTT法检测各组细胞增殖率;平板计数法检测各组巨噬细胞荷菌量。结果:1.姜黄素的毒性低剂量姜黄素对巨噬细胞无毒性作用,浓度在30μM以上的姜黄素对巨噬细胞有一定的毒性,且呈现剂量依赖性抑制巨噬细胞增殖(P<0.01)。2.各组巨噬细胞ROS荧光强度与Control组比较,M-bovis组、M-bovis+Cur组及M-bovis+Cur+ML385组巨噬细胞ROS荧光强度均明显增强;与M-bovis组比较,M-bovis+Cur组ROS荧光强度显著减弱;给予Nrf2抑制剂ML385干预后,细胞内ROS荧光强度再次增强。3.各组巨噬细胞GS3-MA体内H含量各组细胞间GSH含量差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较,M-bovis组GSH含量显著降低(2.93±1.20 vs 7.34±2.21,P<0.01);与M-bovis组比较,加入姜黄素处理后,GSH含量明显升高(5.87±1.29 vs 2.93±1.20,P<0.05);而Nrf2抑制剂ML385则逆转了姜黄素的上述作用(2.65±0.92 vs 5.87±1.29,P<0.05)。4.各组巨噬细胞Nrf2蛋白表达各组细胞间Nrf2蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,M-bovis组细胞核Nrf2蛋白表达均明显下降(P<0.05);而M-bovis+Cur组Nrf2蛋白表达较M-bovis组明显升高(P<0.01);在M-bovis+Cur处理细胞的基础上加入Nrf2抑制剂ML385,Nrf2蛋白表达显著下降(P<0.01)。5.各组巨噬细胞NQO1、HO-1蛋白表达各组细胞间NQO1、HO-1蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,M-bovis组Nrf2下游基因NQO1、HO-1蛋白表达均明显下降(P<0.05);而M-bovis+Cur组NQO1、HO-1蛋白表达较M-bovis组明显升高(P<0.05);Nrf2抑制剂ML385则逆转了姜黄素的上述作用(P<0.05)。6.各组巨噬细胞增殖率各组巨噬细胞增殖率差异均有统计学意义(P<0.05)。与Control组相比,M-bovis组巨噬细胞增殖率明显下降(P<0.01);与M-bovis组相比,M-bovis+Cur组巨噬细胞增殖率明显升高(P<0.01);但M-bovis+Cur+ML385组细胞增殖率再次下降(P<0.01);7.各组巨噬细胞的荷菌量各组巨噬细胞细菌负荷量差异均具有统计学意义(P<0.01)。与M-bovis组相比,细胞由姜黄素干预后,Erdafitinib半抑制浓度细菌负荷量明显降低(P<0.01);而给予Nrf2抑制剂ML385,M-bovis+Cur+ML385组细胞细菌负荷量显著升高(P<0.01)。结论:姜黄素可以通过增加Nrf2的表达,诱导下游抗氧化分子的转录从而抑制牛型结核分枝杆菌诱导的巨噬细胞氧化应激,促进巨噬细胞增殖率进而增强了巨噬细胞对M-bovis的清除和杀伤。