目的:构建小鼠急性呼吸窘迫综合征(ARDS)模型lichen symbiosis,将远端气道干细胞(DASCs)移植到ARDS小鼠体内,分别采用Wnt/β-catenin通路激动剂和抑制剂干预,通过β-catenin表达量的变化,探讨DASCs对ARDS的修复作用,并进一步明确其作用机制。方法:将60只小鼠随机平均分成5组,每组12只,分别为:对照组、ARDS组、DASCs组、氯化锂(LiCL)组、Dkk-1组。每组分别于24 h、72 h两个时间点处死小鼠取材,每个时间点均为6只小鼠。模型制备:对照组气管插管后立即气管给予2.5 ml/kg生理盐水,其余4组气管插管后立即气管给予5 mg/Dolutegravir核磁kg LPS,溶于2.5 ml/kg生理盐水(浓度2 mg/ml)构建ARDS小鼠模型。6小时后对各组的干预分别为:对照组和ARDS组气管给予50μl基础培养基+10μl生理盐水。DASCs组和LiCL组气管给予50μl基础培养基(含1×10~6个DASCs细胞)+10μl生理盐水。Dkk-1组气管给予50μl基础培养基(含1×10~6个DASCs细胞)+1μg Dkk-1蛋白,溶于10μLorlatinib分子量l生理盐水。第二次气管插管后,LiCL组立即腹腔注射40 mg/kg LiCL,溶于4 ml/kg生理盐水(浓度10 mg/ml),每24小时腹腔重复注射等量的LiCL 1次,直至小鼠处死。其余4组立即腹腔注射4 ml/kg生理盐水,每24小时腹腔重复注射等量生理盐水1次,直至小鼠处死。各组分别取肺组织标本比较肺湿干重比评估肺水肿程度;行支气管肺泡灌洗留取肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)测总蛋白的浓度评估肺泡通透性;进行肺组织HE染色观察病理变化情况。酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF中抗炎因子IL-10和促炎因子TNF-α、IL-1β水平,评估肺部炎症情况。q PCR检测肺组织Occludin RNA表达量评估肺上皮屏障功能。q PCR检测肺组织β-catenin RNA表达量评估Wnt通路激动剂LiCl及抑制剂Dkk-1在ARDS小鼠中对DASCs修复作用的影响。结果:1.与对照组相比,ARDS组小鼠2个时间点的肺湿干重比、总蛋白浓度显著升高(P<0.001)。与ARDS组相比,DASCs组2个时间点肺湿干重比(24小时P<0.01,72小时P<0.001)、BALF中总蛋白浓度(P<0.001)降低。LiCL组比DASCs组肺湿干重比(24小时P<0.05,72小时P<0.01)、总蛋白浓度(P<0.05)降低。Dkk-1组较DASCs组肺湿干重比、总蛋白浓度升高(24小时P<0.05,72小时P<0.01)。2.对照组小鼠肺组织切片肺泡形态和结构完整,无炎症细胞浸润,肺间质无充血、水肿,未发现明显病理性损伤。ARDS组肺组织切片观察到肺间质水肿明显,肺泡内可见明显的红细胞和炎症细胞浸润,病理损伤明显,且72小时比24小时损伤更严重。DASCs组肺间质充血、渗出减少,肺泡结构相对完整,炎症细胞浸润减少,较ARDS组肺损伤程度减轻。LiCL组肺间质充血、渗出明显减少,肺泡结构更为完整,几乎未见炎症细胞浸润。LiCL组较DASCs组的损伤程度明显减轻。Dkk-1组可见肺间质水肿、出血,肺泡壁增厚,可见炎症细胞浸润,说明Dkk-1组肺损伤程度高于DASCs组。3.ARDS组2个时间点BALF中TNF-α、IL-1β以及IL-10的浓度明显高于对照组(P<0.001)。与ARDS组相比,DASCs组的TNF-α、IL-1β的浓度降低(P<0.001),IL-10的浓度升高(P<0.001)。与DASCs组相比,LiCL组的TNF-α、IL-1β的浓度降低(P<0.01),而IL-10的浓度升高((24小时P<0.001,72小时P<0.01)。与DASCs组相比,Dkk-1组的TNF-α、IL-1β的浓度升高(24小时P<0.05,72小时P<0.001)、IL-10的浓度降低(24小时P<0.001,72小时P<0.05)。4.ARDS组2个时间点β-catenin RNA表达量比对照组减少(24小时P<0.01,72小时P<0.001)。DASCs组β-catenin RNA表达量较ARDS组增加(P<0.001)。LiCL组β-catenin RNA表达量较DASCs显著增加(24小时P<0.001,72小时P<0.01)。与DASCs组相比,Dkk-1组的β-catenin RNA表达量显著减少(P<0.001)。5.ARDS组2个时间点Occludin RNA表达量比对照组明显减少(P<0.001)。DASCs组2个时间点的Occludin RNA表达量比ARDS组增加,72小时(P<0.001)比24小时(P<0.01)增加显著。与DASCs组比,LiCL组2个时间点的Occludin RNA表达量增加,72小时(P<0.001)比24小时(P<0.05)增加明显。而Dkk-1组2个时间点的Occludin RNA表达量较DASCs组减少,72小时(P<0.001)比24小时(P<0.05)减少显著。结论:1.DASCs可以降低ARDS小鼠肺湿干重比、BALF中总蛋白浓度,减轻炎症反应,改善肺泡通透性,改善肺上皮屏障功能,减轻肺损伤程度。2.LiCl激活Wnt/β-catenin信号传导,促进DASCs对肺损伤的修复作用。3.Dkk-1抑制Wnt/β-catenin信号传导,减弱了DASCs对肺损伤的修复作用。