目的研究TPHP对HEK293细胞的毒性作用,探讨TPHP潜在肾毒性的机制,为TPHP的毒作用机理提供理论依据。方法 1)TPHP以0.0001～1000μmol·L~(-1)TPHP染毒HEK293细胞12 h、24 h、48 h、72 h后,用CCK-8方法检测细胞活力。2)以0、1、10、100μmol·L~(-1)TPHP染毒HEK293细胞24 h后,用流式细胞仪检测凋亡水平。3)以0、1、10、100μmol·L~(-1)TPHP染毒HEK293细胞24 h后,Western Blot检测细胞铁死亡、自噬、凋亡相关关键蛋白。4)以0、1、10、100μmol·L~(-1)TPHP染毒HEK293细胞24 h后,检测丙二醛(MDA)水平,研究TPHP对HEK293细胞氧化应激的影响。5)TPHP染毒HEK293细胞后进行mRNA poly转录组测序。结果 1)CCK-8结果显示,与PS-341对照组相比,各组的细胞活力呈剂量依赖性受到抑制(P<0.05)。2)流式细胞术检测细胞凋亡结果显示,与对照组相比,1、10、100μmol·L~(-1)TPHP处理组总凋亡率和晚期凋亡率无显著性差异(P>0.05);与对照组相selleckchem比,10μmol·L~(-1)TPHP处理组的早期凋亡率显著受到抑制(P<0.05)。3)Western Blot检测分析结果表明,与对照组相比,100μmol·L~(-1)TPHP处理组GPX4、Bax蛋白水平显著下降(P<0.05);LC3Ⅱ/Ⅰ、p62蛋白水平显著增加(P<0.05)。提示TPHP可能促进HEK293细胞发生自噬、铁死亡,可能抑制凋亡的发生。4)氧化应激实验结果表明,与对照组相比,100μmol·L~(-1)TPHP处理组MDA水平显著升高(P<0.05)。5)转录组测序结果显示,与对照组相比,100μmol·L~(-1)TPHP处理组的差异表达基因共1304个,其中上调基因707个,下调基因597个,KEGG通路富集分析主要涉及的关键通路包括MAPK信号通路,PI3K-Akt信号通路等。结论 TSulfonamide antibioticPHP暴露会产生肾毒性,并且可能通过MAPK、PI3K-Akt通路促进人胚肾细胞HEK293发生自噬。