研究背景与目的:食管癌是最常见的消化系统恶性肿瘤之一,在我国属高发癌种。根据世界卫生组织数据显示,2020年我国食管癌新发病例为32.4万例,死亡病例为30.1万例,约占全球食管癌发病与死亡病例的一半。目前食管癌治疗主要是以手术为基础,放化疗以及最近比较热门的免疫治疗相结合的综合治疗,但患者5年生存率仍不甚满意。此外,手术的创伤、放化疗的不良反应、放化疗抵抗及缺乏有效靶向治疗等都成为食管癌治疗中亟待解决的难题。因此,寻找一种有效的食管癌治疗药物是医生和患者共同的期待。铁死亡是近年新发现的一种铁离子依赖的氧化损伤所导致的新的细胞死亡模式,铁死亡在形态学、生物化学、遗传学及诱导剂等方面与经典的细胞死亡方式有明显差别。已有研究表明,铁购买KPT-330死亡参与多种肿瘤疾病的发生发展,因此探索临床药物的诱导铁死亡特性,可以发掘成熟药物潜在的抗肿瘤适应症。青蒿琥酯(ART)是青蒿素的半合成衍生物,临床上具有良好的抗疟疾效果。相关研究发现青蒿琥酯也具有广泛的抗肿瘤活性,对多种癌细胞有细胞毒作用,并且表明青蒿琥酯是一种有效的铁死hepatic macrophages亡诱导剂,其可以诱导头颈部鳞状细胞癌、肝癌、宫颈癌发生铁死亡,但目前尚未有使用青蒿琥酯诱导食管鳞癌细胞发生铁死亡的相关报道。本研究旨在研究诱导青蒿琥酯诱导食管鳞癌细胞发生铁死亡的作用,为提高食管鳞癌治疗效果提供一定的基础理论依据。材料与方法:1.通过CCK-8法测定不同浓度ART对细胞活力的影响,并选取40、80μM的ART完成其他实验,PI染色评估ART诱导细胞发生的死亡;2.通过不同浓度ART单独或联合铁死亡抑制剂去铁胺(DFO)处理KYSE-150细胞48h,然后通过CCK-8法及细胞形态学测定DFO对于ART抗癌活性的抑制作用;3.平板克隆形成实验评估ART对单个细胞在体外增殖能力及成瘤性的影响;4.划痕实验用来测定ART对食管癌细胞迁移的抑制作用;5.通过丙二醛(MDA)检测试剂盒与亚铁离子检测试剂盒检测经ART处理过后的KYSE 150细胞中铁死亡关键产物脂质过氧化产物MDA与细胞内亚铁离子含量的变化;6.通过活性氧荧光探针DCFH-DA及C11 BODIPY 581/591荧光探针分别测定经青蒿琥酯处理的细胞中的总活性氧(ROS)水平及脂质过氧化水平;7.利用WB实验检测青蒿琥酯对细胞内铁蛋白水平的影响。结果:1.ART对食管鳞癌KYSE-150细胞的增殖能力有显著的抑制作用,可促进KYSE-150细胞死亡,并呈现出一定的时间、剂量依赖性,而且DFO可以减弱青蒿琥酯对KYSE-150细胞Lapatinib说明书的毒性作用;2.ART可抑制KYSE-150细胞的迁移能力;3.ART使KYSE-150细胞的亚铁离子及MDA的水平明显升高;4.ART处理KYSE-150细胞后,可导致细胞内ROS积累及发生显著的脂质过氧化;5.ART可使食管癌KYSE-150细胞内的铁蛋白(FTL、FTH)表达量降低。结论:1.青蒿琥酯可通过诱导食管鳞癌KYSE-150细胞发生铁死亡,从而抑制KYSE-150细胞的增殖、迁移能力。2.青蒿琥酯可能是通过促进KYSE-150细胞内铁蛋白降解导致细胞内游离铁的水平升高,铁稳态失调,从而诱发铁死亡。