目的:探索Friend病毒诱导白血病整合位点1(FLI1)介导组氨酸脱羧酶(HDC)及其下游信号通路在红白血病中的作用,并基于该途径研究粉防己碱的抗红白血病作用机制,为白血病的治疗提供新的理论依据。方法:(1)采用RNAseq和Real time-PCR分析敲低红白血病细胞HEL中FLI1基因(sh FLI1)对HDC的影响;(2)采用启动子分析方法和染色质免疫共沉淀(Ch Ip)实验验证白血病细胞中FLI1与HDC启动子的结合;(3)采用Western blottiCardiac biopsyng和Real time-PCR方法测定慢病毒介导HDC(sh HDC)基因的表达水平;MTT法分析组胺对HEL细胞株和sh HDC细胞的增殖影响;(4)采用RNAseq和Real time-PCR方法分析sh FLI1细胞中相关炎症基因的表达;(5)采用MTT方法检测化合物Tetrandrine对HEL细胞增殖的影响;(6)采用流式细胞技术,检测Tetrandrine作用于HEL细胞后,周期和凋亡的变化;(7)采用Western blotting和Real time-PCR方法分析化合物Tetrandrine对HEL细胞中FLI1和HDC基因的表达水平;利用分子对接方法验证Tetrandrine对FLI1蛋白的影响;(8)采用F-Mu LV病毒建立小鼠模型,评估化合物Tetrandrine在白血病小鼠的体内作用。结果:(1)RNAseq和Real time-PCR结果可知获悉更多,FLI1和HDC表达呈正相关。(2)启动子和染色质免疫共沉淀(Ch Ip)结果证实FLI1直接结合到HDC启动子来转录调控。(3)Western blotting和Real time-PCR法数据表明,在sh HDC细胞中的HDC蛋白水平和m RNA水平表达下调;MTT法结果表明,在HEL细胞和sh HDC细胞中,组胺不影响细胞的增殖。(4)RNAseq分析和Real time-PCR结果可知,炎症基因CXCR2、IL1B在sh HDC细胞中表达下调。(5)MTT结果表明,与对照组对比,Tetrandrine(1μM、3μM、5μM)对HEL细胞的抑制率BMS-354825体内分别为(15.54±2.58)%、(21.08±3.54)%、(72.44±8.44)%,IC_(50)为5μM,且Tetrandrine(1μM、3μM、5μM)以时间-剂量依赖性抑制HEL细胞增殖;(6)细胞流式结果显示,随着Tetrandrine浓度的增加,细胞凋亡呈剂量式增加,且Tetrandrine阻滞HEL细胞的周期为S期。(7)Western blotting和Real time-PCR数据表明,Tetrandrine在蛋白水平和m RNA水平下调FLI1和HDC表达。分子对接结果表明,Tetrandrine和FLI1蛋白相结合。(8)动物实验数据表明:Tetrandrine明显延长了白血病小鼠的生存时间。结论:1、红白血病细胞中FLI1与HDC启动子结合,参与组胺生物合成的HDC是FLI1的直接靶点,且FLI1诱导的HDC独立于组胺合成途径参与白血病进展。2、HDC通过肿瘤微环境影响白血病的发生,而在体内抑制HDC可减缓白血病的进展。FLI1通过HDC调节相关炎症基因CXCR2、IL1B参与红白血病的发病进程。3、化合物Tetrandrine抑制红白血病HEL细胞增殖、诱导细胞的凋亡、阻滞细胞周期为S期,并下调FLI1和HDC表达,延长白血病小鼠存活时间,从而抑制白血病进展。