软骨细胞是关节软骨中的独特驻留细胞类型，当其发生一系列病理改变时能够导致骨关节炎（osteoarthritis，OA）的发生。藁本内酯衍生物（ligusticum cycloprolactam，LIGc）是中药当归药效标志物藁本内酯（Z-ligustilide，LIG）的衍生物，具有抗炎、抑制细胞凋亡等多种生物学功能。然而，其对OA软骨细胞的保护作用以及潜在的作用机制尚不清楚。该研究拟进行体外实验探索LIGc抗OA保护软骨细胞作用的分子机制。采用白细胞介素-1β（IL-1β）诱导建立大鼠OA软骨细胞模型炎症模型，并单独使用LIGc和联合高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子-κB（HMGB1/TLR4/NF-κB）信号通路阻断剂甘草酸（glycyrrhizic acid，GA）进行干预，以系统评估其治疗效果。通过cell counting kit-8（CCK-8）试剂盒检测不同浓度下LIGc对软骨细胞活力的影响，并筛选出最佳作用浓度；Annexin V-FITC/PI凋亡染色检测各组软骨细胞凋亡情况；酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组软骨细胞上清中环氧合酶-2（COX-2）、前列腺素-2（PGE2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达；蛋白质印迹法（Western blot）检测各组软骨细胞B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、HMGB1、TLR4、NF-κB p65的蛋白表达水平；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测各组软骨细胞HMGB1、TLR4、NF-κB p65、髓样分化因子88（MyD88）的基因表达变化。通过CCK-8确定了LIGc对软骨细胞的大致安全浓度范围，并进一步明确了LIGc作用的最佳浓度。在IL-1β的干预下，成功构建大鼠OA软骨细胞模型，且在该细胞模型中，软骨细胞凋亡率明显增加。与此同时，ELISA检测该组软骨细胞上清中COX-2、PGE2、TNF-α的表达均显著上升；Weswww.selleck.cn/products/pf-07321332tern blot检medication history测发现模型组软骨细胞Bax、caspase-3、HMGB1、TLR4、NF-κB p65的蛋白表达显著上调，Bcl-2的蛋白表达受到明显抑制；RT-qPCR测定显示软骨细胞内HMGB1、TLR4、NF-κB p65、MyD88的基因表达经IL-PS-341采购1β干预后均有所提高。然而，随着LIGc的加入逆转了IL-1β诱导下上述一系列因子的表达变化。此外，LIGc联合GA共同作用下较单独添加LIGc对实验结果的逆转趋势更为明显。这些研究结果表明，从中药当归中提取并衍生的LIGc能够起到抑制软骨细胞炎症反应及减少软骨细胞凋亡的作用，且该作用的发挥可能与HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路具有较强的相关性。LIGc保护软骨细胞的药理作用，对于延缓OA病情及改善患者临床症状具有潜在价值，值得进一步深入研究。