本研究旨在利amphiphilic biomaterials用原核表达系统表达弓形虫GRA1蛋白并制备单克隆抗体，用于弓形虫病的诊断及GRA1蛋白功能研究。以弓形虫cDNA为模板，设计引物扩增GRA1基因片段，构建原核表达质粒，转化至BL21(DE3)感受态细胞，利用IPTG诱导表达蛋白并纯化。用纯化后的重组蛋白作为免疫原免疫小鼠制备单克隆抗体并鉴定。以制备的弓形虫GRA1单克隆抗体为一抗，FITC标记的羊抗鼠PLX3397溶解度IgG为二抗，优化反应条件建立弓形虫间接免疫荧光检测方法。结果表明：成功构建了原核表达质粒pET-30a(+)-TG-GRA1；SDS-PAGE结果显示，重组蛋白GRA1为可溶性表达，分子质量约为27 kDa；Western blot结果显示重组蛋白GRA1可被犬弓形虫阳性血清识别，表明GRA1有良好的反应原性。成功筛选出5株单克隆细胞株，分别命名为1-B10LY-188011抑制剂、2-C3、2-C9、3-C11以及6-E6，并对它们进行亚型鉴定，其中2-C3、2-C9、3-C11为IgG1，1-B10、6-E6为IgM；IFA 结果显示单克隆抗体具有良好的反应原性；建立了McAb 2-C9最佳稀释浓度为0.875μg/mL、最佳孵育时间为1.5 h，FITC标记的羊抗鼠IgG最佳稀释倍数为1:400、最佳孵育时间为1.5 h的间接免疫荧光检测方法，并对15只小鼠的肝脏组织切片进行检测，结果表明该方法可用弓形虫动物组织切片的检测，有助于弓形虫感染的实验室诊断及弓形虫的动态分布研究。