基于HuProtTM芯片筛选非小细胞肺癌膜受体相关自身抗体

研究目的:肺癌（Lung Cancer,LC）作为我国发病率和死亡率均居首位的恶性肿瘤,其主要的病理亚型为非小细胞肺癌（Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC）。自身抗体（Autoantibodies,AAbs）作为一类潜在的肿瘤标志物,能够在肿瘤发生前数月乃至数年被检测到,具有重要的早期诊断价值。细胞膜受体蛋白在配体激活下可能引发细胞信号传导的异常,进而促进肿瘤的生长与转移。膜受体相关AAbs可作为肿瘤诊断和预后标志物,并可能通过模拟配体功能与相应受体结合激活下游信号,发挥促进肿瘤发生发展的作用。然而,其在NSCLC中的诊断和预后评估尚待深入研究。本研究旨在利用HuProtTM芯片,结合生物信息学分析,筛选并验证可用于肺癌诊断和预后的新型膜受体AAbs。材料方法:HuProtTM芯片对10例LC和10例健康对照（Normal controls,NC）血浆进行检测,旨在筛选在肺癌中显著升高的AAbs,进一步结合AmiGO 2和HPperoxisome biogenesis disordersA进行生物信息学分析筛选膜受体相关AAbs。为验证和评价筛选出的AAbs的诊断价值,本研究纳入290例NSCLC患者和290例NC。此外,还收集380例LC血浆样本（NSCLC占80%）用于预后分析。采用间接ELISA检测血浆中AAbs的表达水平,并以特异性结合指数（Specific Binding Index,SBI）代替OD值以减少板间变异性。以SBI的上四分位数作为截断值,高于该值为高表达,低于该值为低表达。实验数据使用SPSS 21.0和Graphpad Prism10.1.2进行分析和可视化展示。结果:HuProt TM芯片初步筛选出176种在NSCLC高表达的AAbs。结合AmiEnasidenibGO 2中的膜受体蛋白基因集（共7498个蛋白）,筛选出95种膜蛋白。进一步基于芯片结果（Fold change≥1.5、Positive LC-Positive NC≥50%和HPA中分子功能为受体）,最终确定7种膜受体蛋白（LILRB2、IL13RA2、DGCR2、GYPA、FCRL2、FCRL4、HAVCR1）。ELISA结果显示,除anti-HAVCR1 AAb外,其余六种AAbs在NSCLC中的表达均显著高于NC（P<0.05）。ROC分析表明,anti-LILRB2 AAb的AUC最AM-2282配制大（AUC=0.662）,因此被选为后续研究的重点。进一步联…