谷氨酸通过T1R1/T1R3-ERK1/2通路调节香猪睾丸间质细胞自噬相关基因表达

【目的】为探究谷氨酸对香猪睾丸间质细胞自噬的影响。【方法】选取3头健康从江香猪(Sus scrofa)分离培养睾丸间质细胞,采用不同浓度的谷氨酸刺激睾丸间质细胞T1R1/T1R3,探究激活T1R1/T1R3对细胞自噬的影响。【结果】 CCK-8结果显示睾丸间质细胞在72-96 h增殖最快,在96 h达到对数生长期。通过不同浓度的谷氨酸溶液刺激间质细胞发现10 mmol/L L-谷氨酸相对于对照组可激活T1R1/T1R3,此外,处理组与对照组相比,10 mmol/L L-谷氨酸处理睾丸间质细胞8 h,自噬相关基因Beclin 1转录水平和Beclin 1蛋白表达量均极显著降低(P<0.01),自噬基因MAPPLX3397 IC501LC3B的mRNA表达量显著降低(P<0.05)。抑制自噬的通路基因TAS1R3、TAS1R1、mTOR、ERK1、ERK2转录水平和T1RBYL719抑制剂3、T1R1、ERgenetic discriminationK1/2、p-S6K1的蛋白表达量极显著均升高(P<0.01),p-mTOR蛋白表达显著增加(P<0.05),但mTOR蛋白表达量无明显变化(P>0.05)。此外,单丹磺尸酰胺(MDC)染色显示,相较于对照组,10 mmol/L L-谷氨酸处理组间质细胞胞内酸性自噬泡荧光强度减弱,自噬受到抑制。【结论】10 mmol/L L-谷氨酸激活的T1R1/ T1R3鲜味受体可能抑制香猪睾丸间质细胞的自噬过程。