目的 探讨冷冻消融联合养肺方治疗对Lewis肺癌CPF-6463922分子量D4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞影响及机制。方法 构建C57BL/6小鼠肺癌皮下移植瘤模型，随机分为模型组、冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组，每组5只。模型组行假手术，在小鼠移植瘤部位切开缝合，其余各组均行双循环冷冻消融术。术后冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组分别给予1.64、3.28、6.56 g/kg养肺方灌胃，模型组、冷冻消融组分别给予等体积的生理盐水灌胃，均1次/d，连续给药14 d。给药期间观察并记录各组小鼠肿瘤体积，末次给药后剥离脾脏和移植瘤，称取瘤体质量并计算抑瘤率；流式细胞术检测脾脏CD4~+T、CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞比例；qRT-PCR和Western blot法检测瘤组织中Foxp3表达。结果 各组小鼠肿瘤体积均逐渐增长，增长速度为模型组>冷冻消融组>冷冻消融联合养肺方低剂量组>冷冻消融联合养肺方中剂量组>冷冻消融联合养肺方高剂量组。手术联合药物干预14 d后，与模型组比较，各治疗组肿瘤体积小（P<0.05）；与冷冻消融组比较，冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤体积小（P<0.01）；冷冻消融联合养肺方高剂量组肿瘤体积小于低剂量组（P<0.01）。与模型组比较，冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小（P<0.05）；与冷冻消融组比较，冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组瘤体质量小（P<0.05）。冷冻消融组、冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组抑瘤率逐渐升高。与模型组比较，各治疗组CD4~+T细胞比例低（P<0.05），冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组的CD4~+CD25~+Foxp3~+T%细胞比例低（P<0.05）；与冷冻消融组比较，冷冻消融联合养肺方高剂量组CD4~+T、CD4~+CD25Roxadustat~+Foxp3~+T细胞比例低（P<0.05）；冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量genetic heterogeneity组CD4~+T、CD4~+CD25~+Foxp3~+T细胞比例逐渐降低。与模型组比较，冷冻消融联合养肺方低、中、高剂量组肿瘤组织中Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均降低（P<0.01）；冷冻消融联合养肺方中、高剂量组Foxp3 mRNA相对表达量和Foxp3蛋白表达均低于冷冻消融组（P<0.01）和冷冻消融联合养肺方低剂量组（P<0.05）。结论冷冻消融联合养肺方通过减少Lewis肺癌小鼠脾脏CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例，下调肿瘤组织中Foxp3表达，发挥抑制Lewis肺癌增殖作用，其机制可能与增强机体抗肿瘤免疫应答，改善肿瘤免疫抑制有关。