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为进一步了解抑AG-221溶解度郁障碍神经生物学机制并为未来的相关研究及诊疗提供新思路，对proBDNF与抑郁障碍认知功能损害的研究进行综述。抑郁障碍患者除了情绪障碍外还合并有认知功能损害，包括执行功能、记忆力、注意力和精神、运动技能等明显损害，抑郁障碍的发生不仅与神经递质、神经内分泌等功能障碍相关，并且一些细胞因子可以通过抑制BDNF诱导细胞凋亡而直接损伤神经细胞，相应脑区常出现BDNF表达降低以及功能下调，BDNF是抑郁障碍病理生理学中的关peripheral blood biomarkers键因素，在BDNF中作为“惩罚信号”的proBDNF的积累可能促进抑郁障碍的发生，也会导致抑郁障碍认知功能损害。proBDNF抗体不仅可逆转抑郁样行为，还可改善BIBW2992化学结构认知功能，其有望成为一种可靠的生物学标记物进而提供一种更准确、快捷的诊断方式，基于此研发的新药有望改善双相情感障碍患者的预后，促进社会功能的恢复。

背景和研究目的:帕金森病(PD)是最常见的神经退行性疾病之一,随着社会老龄化加剧,PD患病率在全球呈现显著增高态势。然而,目前仍然没有药物能够有效地阻止和减缓PD的发展,因此拓宽PD药物谱具有重要意义。胰高血糖素样肽-1(GLP-1),作为肠促胰岛素的一种,被普遍认为是治疗神经退行性疾病的一个重要靶点。但由于其进入血液循环后可被广泛存在的二肽基肽酶-IV(DPP-IV)快速降解,半衰期仅为1～2分钟,因此其治疗潜力受限。尽管目前研制出GLP-1类似物以克服这一缺陷,但需要长期注射和高昂的价格使得患者的经济负担和生活质量受到了严重影响。随着基因编辑技术在医药领域的应用,工程细菌被广泛应用于治疗疾病,为解决该问题提供了新的思路。基于此,本研究构建了一株可以持续表达GLP-1的酪酸梭菌(C.butyricum),旨在探究C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的PD模型小鼠的影响及作用机制,为PD提供了一种可替代的治疗方式。方法:1、C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌株的构建:先将GLP-1基因整合到p MTL007质粒,再将重组质粒p MTL007-GLP-1接合转入C.butyricum宿主菌基因组中,构建基因组整合型C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌。2、C.butyricum-p MTL007-GLP-1工程菌株的体外功能验证:通过ELselleck LEE011ISA检测C.butselleck激酶抑制剂yricum-p MTL007-GLP-1的GLP-1分泌量。通过生长曲线、耐酸实验和耐胆盐实验评价工程菌的益生特性。3、PD小鼠模型的建立和治疗:取40只8周龄C57BL/6雄鼠,随机分为对照组(C组)、模型组(M组)、模型组+C.butyricum(CB组)、模型组+利拉鲁肽组(L组)、模型组+C.butyricum-p MTL07-GLP-1组(CBG组),每组8只。C组连续灌胃明胶生理盐水14 d。除C组外,其余小鼠连续7 d腹腔注射20 mg/kg MPTP构建PD小鼠模型。造模成功后,M组每天灌胃明胶生理盐水100μL;L组每天腹腔注射利拉鲁肽0.4 mg/kg;CB组每天灌胃10~8 CFU/m L C.butyricum 100μL;CBG组每天灌胃10~8 CFU/m L C.butyricum-p MTL007-GLP-1 100μL,共七天。4、机制分析:通过行为学方法进行小鼠运动能力评估。通过免疫组织化学和超微结构形态学检测小鼠组织病理改变。通过Western-blot检测小鼠PD相关蛋白、线粒体自噬通路相关蛋白和肠道屏障蛋白(ZO-1、Occludin)表达。通过高通量测序观察工程菌对小鼠肠道菌群的影响。通过试剂盒检测小鼠黑质和血清中氧化应激的水平。结果:1、C.butyricum-p MTL007-GLP-1具有良好的体外益生性质:(1)ELISA结果显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1的GLP-1的表达量为97.97 pg/m L(300 m L体系);(2)生长曲线实验显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1跟C.butyricum的生长特性无明显差异;(3)耐酸、耐胆盐实验显示C.butyricum-p MTL007-GLP-1在p H值为3至7范围内均能保持活菌数高于10~6 CFU/m L;在0.5%胆盐条件下,活菌数仍保持在10~7 CFU/m L以上,这表明C.butyricum-p MTL007-GLP-1具有良好的耐酸、耐胆盐能力。2、C.butyricum-p MTL007-GLP-1对PD的影响:(1)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以改善PD小鼠的运动协调和探索能力(P<0.01);(2)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以上调PD特征蛋白TH和DAT的表达,下调α-syn的表达(P<0.01);(3)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以促进线粒体自噬信号通路蛋白Beclin-1、PINK1、Parkin、Atg7、LC3B II和LAMP-1的表达(P<0.01)和抑制p62表达(P<0.05),来消除异常的线粒体;(4)C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以恢复PD小鼠血清和脑组织中GSH-Px和SOD的活性(P<0.01),抑制MDA的活性(P<0.01);(5)C.butyricum-p MTL007-GLP-1使PD小鼠的肠道菌群多样性和丰度增加,并降低了PD相关的双歧杆菌(Bifidobacterium)相对丰度(P<0.05);此外,C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以增加肠道屏障蛋白(ZO-1,Occludin)的表达(P<0.01)。结论:在本研究中,我们成功地构建了可以持续表达GLP-1的C.butyricum,即C.butyricuBiogenic mackinawitem-p MTL007-GLP-1,体外实验表明工程菌具备良好的耐酸耐胆盐能力,这保证了它们在宿主胃肠内的存活。在动物实验中,C.butyricum-p MTL007-GLP-1可以改善PD的运动功能障碍和神经病理学变化,这一神经保护作用可能是通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬和减弱氧化应激所介导。此外,C.butyricum-p MTL007-GLP-1给药可以增加PD小鼠肠道菌群多样性以维持肠道屏障功能。

目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0)，脂多糖刺激M0复制M1极化模型，将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、抑制剂组(M1+NF-κB抑制剂+空白血清)、壮骨健膝方组(M1+含药血清)。干预24 h后，检测各组M1标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)，M2标志分子分化E-616452说明书簇206、163、209(CD206、163、209)mRNA表达，促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)Terrestrial ecotoxicology，抗炎因子IL-4、IL-10水平及mRNA表达，核因子κB(NF-κB)信号通路中节点蛋白核内NF-κBp65、NF-κBp50及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达。NSC 127716纯度结果:模型组M1标志分子、促炎因子及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均高于空白组(P<0.05)，CD206、IL-4 mRNA及IκBα蛋白，IL-4水平均低于空白组(P<0.05);抑制剂及壮骨健膝方组M1标志分子、促炎因子及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均低于模型组(P<0.05)，M2标志分子、抗炎因子及IκBα蛋白均高于模型组(P<0.05);壮骨健膝方组MHC-Ⅱ、MCP-1 mRNA及促炎因子均低于抑制剂组(P<0.05)，CD206、CD209、IL-10 mRNA及IL-4、IL-10水平均高于抑制剂组(P<0.05)。结论:壮骨健膝方可抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1极化，促进M2极化，其机制可能与降低细胞中NF-κB信号通路活性有关。

研究背景胃癌作为全球发病率高、死亡率高并且极具破坏性的恶性肿瘤之一,是影响人民健康的重大疾病。幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染诱发胃部恶性转化涉及宿主细胞蛋白质和非编码RNA(Noncoding RNAs,ncRNAs)等生物活性分子组成的复杂调控网络,环状RNA(Circular RNAs,circRNAs)作为一类新型单链RNA在其中的作用及调控机制受到关注。多项研究发现,circRNA与肿瘤发生发展密切相关。目前仍需明确并深入研究特异circRNA与H.pylori感染相关胃癌发生发展之间的关系。研究目的本课题从不同层次深入分析并阐明H pylori调控hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB轴参与胃癌发生发展的作用机理,探索相关关键分子作为胃癌早期诊断、治疗和预后标志物的潜力。研究方法与结果1.H.pylori关键毒力因子CagA可调控特定circRNA-miRNA-mRNA通路分别对H.pylori关键毒力因子 CagA(Cytotoxin-associated gene A)高表达的胃癌细胞AGS及其对照进行高通量测序,使用miRNet等在线数据库及Starbase等分析工具进行生物信息学分析,获得CagA调控的关键circRNAs,并筛选出相关关键miRNAs及中心靶分子,结合胃癌患者生存率及预后分析,提示hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB 通路在H.pylori感染相关胃癌发生发展中作用显著。2.分子和细胞水平实验证实H.pylori通过hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB通路调控胃癌细胞增殖和侵袭转移(1)分别使用CagA重组蛋白及H.pylori SS1菌株以特定时间和浓度刺激胃癌细胞,RT-qPCR及Western Blot检测结果显示,关键分子hsa_circ_0026228表达下降,miR-323a-3p表达随之上调,PPP1CB mRNA及蛋白水平的表达降低。(2)分别向胃癌细胞中转染hsa_circ_0026228过表达质粒及特异小干扰RNA、miR-323a-3p mimics 及 inhibitors 和 PPP1CB 小干扰 RNA 及过表达质粒,RT-qPCR及Western Blot检测结果显示,与对照组相比,转染均达到实验目的;hsa_circ_0026228可有效降低miR-323a-3p表达,使PPP1CB的表达上升,从而促进P21和E-Cadherin表达。荧光原位杂交(FISH)实验证实miR-323a-3p与hsa_circ_0026228在细胞质中存在共定位;双荧光素酶活性实验表明hsa_circ_0026228 海绵吸收 miR-323a-3p,miR-323a-3p 则直接结合 PPP1CB 的3′-UTR 区。结合回复实验,通过 RT-qPCR、Western Blot、CCK-8、EdU、克隆形成、Transwell和划痕实验证实hsa_circ_0026228通过海绵吸收miR-323a-3p调控PPP1CB表达,参与胃癌细胞增殖与迁移。3.在裸鼠模型和人体病理组织标本水平验证hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB通路调控胃癌细胞增殖和侵袭转移裸鼠皮下成瘤实验显示,较对照组,干扰hsa_circ_0026228组的裸鼠体内成瘤能力明显升高;RT-qPCR、Western Blot和免疫组化结果说明hsa_circ_0026228海绵吸收miR-323KPT-330 IC50a-3p调控PPP1CB抑制胃癌细胞增殖。将hsa_circ_0026228高表达及对照质粒转染进胃癌细胞后进行裸鼠尾静脉注射,发现高表达组肝和肺中炎症程度和肿瘤转移灶数量显著减少,说明hsa_circ_0026228抑制胃癌细胞侵袭转移。在人体病理组织样本中通过RT-qPCR和免疫组化实验发现,与癌旁正常样本相比,hsa_circ_0026228及PPP1CB在胃癌组织样本中显著低表达,miR-323a-3p则表达水平较高。实验结论本项研究从中国人病理组织样本、细胞分子及动物模型等多个层次研究H.pylori调控hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB轴对胃癌细胞增殖和侵袭转移的影响,以及hsa_circ_0026228与miR-323a-3p及其靶分子Pqatar biobankPP1CB之间的相互调控机制。研究表明,hsa_circ_0026228在胃癌中低表达,可通过吸附miR-323a-3p上调靶PPP1CB进而影响GSK1349572说明书胃癌发生发展进程。本研究可从靶向hsa_circ_0026228/miR-323a-3p/PPP1CB通路出发,为关键分子的H.pylori相关胃粘膜恶性转化防控提供一定的理论基础。

现代医疗设备和器械的出现与广泛使用,极大地Compound 3细胞培养提高了疾病的治愈率,同时也使得院内感染和血栓形成等问题较为突出,目前急需一种多功能涂层技术有效降低生物膜和血栓形成的几率。壳聚糖作为一种天然阳离子多糖,因具有多种生物学功能,被广泛用于抗菌涂层和药物载体等。前期研究工作中将具有多重生物功能的铜离子通过螯合反应接枝到壳聚糖上,获得了具有优异抗菌、抗凝及抗感染功能的载铜壳聚糖涂层。但该涂层质地较脆,柔韧性差,涂层表面较容易出现大量裂纹,甚至脱落,使得涂层原有的抗菌Immune landscape、抗感染效果大幅度降低。本课题以载铜壳聚糖功能涂层塑性、韧性较差为主要切入点,通过添加多元醇类增塑剂聚乙烯醇和甘油对载铜涂层进行协同增塑,探究了两类增塑剂的添加对载铜壳RAD001研究购买聚糖涂层结构与性能的影响,研究了不同添加比例下的增塑剂对涂层的增塑效果,并对增塑前后载铜涂层的微观结构、表面性能及热稳定性能进行分析表征,同时,利用体外抗菌实验和动物实验对涂层抗菌、抗感染功能,以及生物安全性作进一步的评价。本文主要研究内容及实验结论如下:(1)与聚乙烯醇相比,甘油对载铜涂层的增塑效果更加显著,并通过对比不同增塑剂、不同添加比例对涂层力学性能的影响,认为当涂层各组分的添加比例为PVA:G:CS=2:5:10时,增塑后的载铜涂层的力学性能最佳。甘油分子上的羟基与壳聚糖链上的羟基发生较强的氢键缔合作用,降低了壳聚糖分子内的氢键作用,有效改善了涂层本身的力学性能,达到较好的增塑效果。将增塑后的涂层材料制备到医用导管表面,对其进行90°弯折处理,涂层未见裂纹产生,实现了对CS/Cu涂层材料的增塑。(2)增塑剂的添加同时改变了载铜涂层的表面性能,增加了涂层的亲水性。同时,增塑后涂层的热稳定性得到了进一步提高,铜离子的释放速率相较于原涂层更缓慢、且更均匀,有利于实现涂层抗菌、抗炎的持久作用。(3)增塑后载铜涂层的体外抗菌实验结果表明,增塑后的涂层仍具有显著的抗菌性,与原涂层相比,未出现明显降低;细胞毒性实验结果表明,增塑剂的添加并未增加载铜涂层的细胞毒性,显示出良好的细胞相容性,对L929成纤维细胞增殖表现出一定的促进作用。将植入动物体内1个月和2个月后取出的各组导管样品进行体外菌培养,结果表明CS/Cu/PVA/G涂层抗菌率在90%以上,抗菌效果优于CS/Cu涂层,植入两个月后CS/Cu/PVA/G涂层样品的抗菌率仍可以维持在70%左右。大鼠尿道组织切片染色结果也表明,CS/Cu/PVA/G涂层样品植入后,周围组织的炎性细胞浸润无明显差别。其中涂层抗菌持久性与有机框架内各分子链之间的交联程度增加,壳聚糖与Cu~(2+)的螯合作用增强有着密切关系,从而有效地减缓Cu~(2+)的释放速率,使增塑后的载铜涂层表现出优异的抗菌、抗炎持久作用的效果。

研究目的:心血管疾病(cardiovascular diseases,CVDs)是我国城乡居民死亡的首要原因,其中,年龄是诱导CVDs的独立危险因素。在我国社会人口老龄化现象日趋严重的背景下,揭示衰老过程中,心功能和结selleckchem INCB28060构变化的相关分子调控机制,寻找衰老早期有效预防CVDs风险增高的方式方法至关重要。近年来相关研究报道发现,氧化应激是心脏衰老调控机制的核心环节之一,在心脏衰老中具有重要意义。随着个体年龄增长,心肌组织中氧化应激水平呈现逐步升高的趋势,导致内质网应激(Endoplasmic reticulum stress, ERS)、线粒体功能障碍和细胞凋亡等现象发生,是导致CVDs发生的关键原因。内质网是真核细胞内主要的蛋白质合成细胞器,当细胞内错误折叠蛋白质积累过多时,即可诱导未折叠蛋白反应(Unfolded Protein Response, UPR)的发生,持续的UPR和错误折叠蛋白积累过多,最终将导致ERS发生。在病理状态下,ERS可诱导细胞内相关稳态失衡,最终将导致细胞凋亡现象的发生。运动可有效改善心脏抗氧化能力,降低CVDs发生风险,但运动是否可改善衰老进程中心肌细胞损伤现象仍需进行确证。组蛋白赖氨酸甲基转移酶1(Smyd1)可参与表观遗传修饰,在调控心脏和骨骼肌生长发育、心脏和骨骼肌生理和病理状态以及成体心脏功能维持中发挥重要作用,并参与心肌细胞线粒体能量代谢和内质网稳态调控,但其在心脏中表达的年龄变化特征以及在衰老心脏的运动保护中的相关作用和可能机制尚不清楚,有待进一步深入研究。在衰老早期进行运动干预是否可通过调节衰老早期心肌组织Smyd1表达,改善心肌氧化应激、ERS和细胞凋亡水平,降低衰老诱导的CVDs发生风险概率,其可能机制如何,尚无相关报道,仍需进一步研究探索。本研究通过建立衰老早期小鼠抗阻训练模型,构建Smyd1-shRNA和Smyd1过表达慢病毒干预的衰老心肌细胞模型,检测衰老早期进行抗阻训练对小鼠心肌Smyd1蛋白表达、氧化应激、ERS和细胞凋亡的影响,探讨Smyd1在其中的可能作用及相关调控机制,为今后衰老心脏损伤的运动预防和干预靶点筛选提供实验依据。研究方法:选择健康状态的3月龄和15月龄雌性昆明小鼠,随机分为年轻安静组(Young-Sed)、年轻运动组(Young-RT)、衰老早期安静组(Old-Sed)和衰老早期运动组(Old-RT),共4组,每组8只。运动组小鼠进行8w负重爬梯(爬梯总长1m、每梯间隔1cm、倾斜角度为70°)抗阻运动。第1w为适应性训练,以无负重起始,按照15%体重(Body weight,BW)/d的负荷递增,分别增至35%BW(衰老早期运动组)和70%BW(年轻运动组)。第2-8周以此负荷进行训练,3次为1组,共进行8组,组间间歇2min,5d/w×7w。采用DHE染色检测小鼠心肌氧化应激水平,采用Western Blotting检测Smyd1、抗氧化酶(SOD1、SOD2)、ERS(GRP78、CHOP和ATF4)和细胞凋亡(Bcl-2和Bax)相关蛋白表达。体外培养H9C2大鼠心肌细胞,给予10g/LD-gal干预48h,制备细胞衰老模型;给予Smyd1-shRNA和Smyd1过表达慢病毒载体干预,取感染复数为10,制备细胞Smyd1敲低和过表达模型;给予50 nM Nrf2-siRNA干预48h,制备细胞Nrf2表达敲低模型;给予1 mM AICAR干预24h,制备细胞模拟运动模型。采用Western Blotting检测细胞Smyd1、抗氧化酶(SOD1、SOD2)、ERS(GRP78、CHOP和ATF4)和细胞凋亡(Bcl-2和Bax)相关蛋白表达;采用DHE染色检测心肌此网站细胞氧化应激水平,采用TUNEL染色检测心肌细胞细胞凋亡水平。研究结果:动物实验结果发现,抗阻训练可上调小鼠心肌Smyd1蛋白表达,降低衰老导致小鼠心肌组织氧化应激和ERS相关因子表达水平升高。与Young-Sed组相比,Young-RT组小鼠心肌组织Smyd1蛋白表达显著升高(P<0.01);与Old-Sed组相比,Old-RT组小鼠心肌组织Smyd1蛋白表达显著升高(P<0.01);与Young-Sed组相比,YEdiacara Biotaoung-RT组小鼠心肌组织SOD1蛋白表达显著升高(P<0.01),Old-Sed组小鼠心肌组织Trb3蛋白表达显著升高(P<0.05);与Young-Sed组相比,Young-RT组小鼠心肌组织GRP78蛋白表达升高(P<0.01),Bcl-2/Bax表达降低(P<0.05),Old-RT组小鼠心肌组织Bcl-2/Bax表达降低(P<0.01),ATF4(P<0.01)、CHOP(P<0.01)、c-Caspase12(P<0.05)蛋白表达升高;与Old-Sed组相比,Old-RT组小鼠心肌组织ATF4(P<0.05)和CHOP(P<0.01)蛋白表达降低。细胞实验结果发现,Smyd1介导衰老心肌细胞ERS和细胞凋亡。与control组相比,D-gal干预下调H9C2细胞Smyd1蛋白表达(P<0.01),升高H9C2细胞ROS水平(P<0.01);与D-gal干预组相比,Smyd1过表达慢病毒显著上调H9C2细胞Smyd1蛋白表达,降低H9C2细胞氧化应激水平(P<0.01);与载体对照组相比,D-gal显著增加H9C2细胞CHOP蛋白表达(P<0.05),降低H9C2细胞Bcl-2/Bax水平(P<0.01),增加H9C2细胞TUNEL阳性细胞数目(P<0.05);与载体对照+D-gal组相比,Smyd1过表达显著降低了H9C2细胞GRP78(P<0.01)、ATF4(P<0.01)和CHOP(P<0.05)蛋白表达,上调H9C2细胞Bcl-2/Bax水平(P<0.01);与正常对照组相比,Nrf2-siRNA干预组H9C2细胞ATF4(P<0.01)蛋白表达显著升高,Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01);Nrf2-siRNA干预显著上调H9C2细胞ATF4蛋白表达(P<0.01);同时,Nrf2-siRNA干预显著降低Smyd1过表达慢病毒+D-gal组H9C2细胞Bcl-2/Bax水平(P<0.01);与vector组相比,Smyd1-shRNA组H9C2细胞Smyd1蛋白表达明显降低(P<0.01),ATF4(P<0.01)和CHOP蛋白表达(P<0.01)显著升高,vector+D-gal组、Smyd1-shRNA组H9C2细胞细胞凋亡水平显著升高(P<0.01);与vector+AICAR组相比,Smyd1-shRNA+AICAR组H9C2细胞细胞凋亡水平升高(P<0.01)。研究结论:Smyd1参与调控衰老心肌细胞ERS和细胞凋亡,抗阻训练可上调衰老早期小鼠心肌Smyd1表达,改善心肌细胞氧化应激和ERS现象,降低心肌细胞凋亡水平,发挥运动保护效应。

目的:阿片戒断后持续存在的睡眠障碍和负性情绪是引发复吸的重要原因,二者互相影响,且存在内在联系,但其具体机制不清。本研究采用小鼠吗啡慢性给药模型,探讨阿片戒断诱发睡眠障selleck合成碍和负性情绪的共同神经机制,以进一步理解和治疗阿片使用障碍。方法:(1)小鼠进行6天吗啡递增剂量慢性给药,其中后3天进行纳洛酮催促戒断Q-VD-Oph分子式诱导的条件性位置厌恶(CPA)训练,经历6天戒断及脑电睡眠监测后进行CPA测试Biotin-streptavidin system及高架十字等焦虑抑郁样行为学检测。(2)小鼠进行6天慢性给药及低剂量纳洛酮诱导CPA训练后,在戒断期每天进行3小时睡眠剥夺,观察对上述行为学的影响。(3)小鼠慢性给药第6天进行纳洛酮催促戒断,灌流后通过免疫荧光c-Fos标记筛选出戒断激活的脑区。结果:(1)小鼠经过6天戒断后存在稳定的CPA反应及焦虑抑郁样症状。(2)戒断期睡眠剥夺可加重负性情绪的表现。(3)c-Fos染色结果显示戒断可引起前额叶皮层、中央杏仁核、丘脑室旁核、外侧缰核等脑区显著激活。结论:本研究发现中央杏仁核等脑区可能介导了阿片戒断诱发的睡眠障碍及负性情绪,对其具体神经机制进行进一步探索将有利于理解和治疗阿片使用障碍。

目的 研究西红花酸(CRO)介导焦亡途径对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法 将HK-2细胞分为对照组(5.6 mmol·L~(-1)葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖)、西红花酸低剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄Captisol化学结构糖+5.0μmGSK2118436ol·L~(-1 )CRO)、西红花酸中剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+10.0μmol·L~(-1 )CRO)、西红花酸高剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+30.0μmol·L~(-1) CRO)。药物处理48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，用试剂盒法检测各组细胞氧化应激指标，用蛋白质印迹检测各组细胞相关蛋白表达，以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达量。结果 对照组、高糖组、西红花酸低剂量组、西红花酸中剂量组和西红花酸高剂量组的细胞活性氧(ROS)水平分别为(100.00±3.64)%、(201.41±15.47)%、(172.31±12.16)%、(146.22±10.85)%、(121.37±9.68)%,胱天蛋白酶-1(caspase-1)蛋白水平分别为0.22±0.02、1.13±0.11、0.87±0.06、0.58±0.04、0.33±0.02,N端Gasdermin D蛋白(GSDMD-N)蛋白水平分别为0.40±0.05、1.09±0.08、0.76±0.05、0.58±0.04、0.42±0.03,IL-18蛋白水平分别为0.33±0.02、0.95±0.07、0.75±0.05、0.60±0.04、0.45±0.03,核因子κB(NF-κB) p65蛋白水平分别为0.34±0.05、0.97±0.10、0.75±0.05、0.54±0.04、0.37±0.05,胞质NF-κB p65蛋白水平分别为0.88±0.05、0.41±0.03、0.52±0.04、0.63±0.05、0.79±0nature as medicine.06。上述指标，高糖组与对照组比较，西红花酸低、中、高剂量组与高糖组比较，不同剂量组之间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 西红花酸可介导NF-κB通路抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡信号，调控细胞焦亡和氧化应激，缓解高糖诱导的HK-2细胞损伤。

目的 研究西红花酸(CRO)介导焦亡途径对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法 将HK-2细胞分为对照组(5.6 mmol·L~(-1)葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖)、西红花酸低剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄Captisol化学结构糖+5.0μmGSK2118436ol·L~(-1 )CRO)、西红花酸中剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+10.0μmol·L~(-1 )CRO)、西红花酸高剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+30.0μmol·L~(-1) CRO)。药物处理48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，用试剂盒法检测各组细胞氧化应激指标，用蛋白质印迹检测各组细胞相关蛋白表达，以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达量。结果 对照组、高糖组、西红花酸低剂量组、西红花酸中剂量组和西红花酸高剂量组的细胞活性氧(ROS)水平分别为(100.00±3.64)%、(201.41±15.47)%、(172.31±12.16)%、(146.22±10.85)%、(121.37±9.68)%,胱天蛋白酶-1(caspase-1)蛋白水平分别为0.22±0.02、1.13±0.11、0.87±0.06、0.58±0.04、0.33±0.02,N端Gasdermin D蛋白(GSDMD-N)蛋白水平分别为0.40±0.05、1.09±0.08、0.76±0.05、0.58±0.04、0.42±0.03,IL-18蛋白水平分别为0.33±0.02、0.95±0.07、0.75±0.05、0.60±0.04、0.45±0.03,核因子κB(NF-κB) p65蛋白水平分别为0.34±0.05、0.97±0.10、0.75±0.05、0.54±0.04、0.37±0.05,胞质NF-κB p65蛋白水平分别为0.88±0.05、0.41±0.03、0.52±0.04、0.63±0.05、0.79±0nature as medicine.06。上述指标，高糖组与对照组比较，西红花酸低、中、高剂量组与高糖组比较，不同剂量组之间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 西红花酸可介导NF-κB通路抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡信号，调控细胞焦亡和氧化应激，缓解高糖诱导的HK-2细胞损伤。

目的 研究西红花酸(CRO)介导焦亡途径对高糖诱导的HK-2细胞损伤的影响。方法 将HK-2细胞分为对照组(5.6 mmol·L~(-1)葡萄糖)、高糖组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖)、西红花酸低剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄Captisol化学结构糖+5.0μmGSK2118436ol·L~(-1 )CRO)、西红花酸中剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+10.0μmol·L~(-1 )CRO)、西红花酸高剂量组(30.0 mmol·L~(-1)葡萄糖+30.0μmol·L~(-1) CRO)。药物处理48 h后用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率，用试剂盒法检测各组细胞氧化应激指标，用蛋白质印迹检测各组细胞相关蛋白表达，以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测细胞白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)mRNA相对表达量。结果 对照组、高糖组、西红花酸低剂量组、西红花酸中剂量组和西红花酸高剂量组的细胞活性氧(ROS)水平分别为(100.00±3.64)%、(201.41±15.47)%、(172.31±12.16)%、(146.22±10.85)%、(121.37±9.68)%,胱天蛋白酶-1(caspase-1)蛋白水平分别为0.22±0.02、1.13±0.11、0.87±0.06、0.58±0.04、0.33±0.02,N端Gasdermin D蛋白(GSDMD-N)蛋白水平分别为0.40±0.05、1.09±0.08、0.76±0.05、0.58±0.04、0.42±0.03,IL-18蛋白水平分别为0.33±0.02、0.95±0.07、0.75±0.05、0.60±0.04、0.45±0.03,核因子κB(NF-κB) p65蛋白水平分别为0.34±0.05、0.97±0.10、0.75±0.05、0.54±0.04、0.37±0.05,胞质NF-κB p65蛋白水平分别为0.88±0.05、0.41±0.03、0.52±0.04、0.63±0.05、0.79±0nature as medicine.06。上述指标，高糖组与对照组比较，西红花酸低、中、高剂量组与高糖组比较，不同剂量组之间比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 西红花酸可介导NF-κB通路抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD焦亡信号，调控细胞焦亡和氧化应激，缓解高糖诱导的HK-2细胞损伤。