柴胡蚤休汤治疗肝细胞癌关键靶点的网络药理学研究及预后模型的建立

目的 采用网络药理学研究柴胡蚤休汤治疗肝细胞癌的关键靶点,并构建风险评分模型用于解决肝allergy and immunology癌的预后问题。方法 通过网络药理学、LASSO COX建模和体外Galunisertib细胞培养细胞实验方法,探讨柴胡蚤休汤治疗肝细胞癌的主要药用活性成分、作用分子靶点及相关基因预后能力。结果 柴胡蚤休汤可能通过作用于ESR1、G6PD、AKR1C3、NQO1、CDK1等关键靶点和p53信号通路发挥治疗肝细胞癌的作用。这些关键靶点与活性成分分子对接的结合性良好。构建治疗靶点风险评分模型表明:其具有良好的预后效果和独立预后能力。柴胡蚤休汤对体外人肝癌细胞HepG2的细胞毒性具有浓度和时间依赖,且能够显著抑制G6PD、CDK1核心靶点的表达。结论 柴胡蚤休汤可通过调控G6PD、CDK1关键靶点和p53信号通路治疗确认细节肝细胞癌,基于G6PD、CDK1关键靶点建立的新型风险评分模型对肝细胞癌具有良好的独立预后功能。可为后续研究提供新思路。

miR-155在高糖诱导足细胞损伤的表达及其与足细胞损伤相关蛋白表达的相关性

目的 探讨高糖(HG)诱导足细胞损伤中miR-155的表达变化及miR-155与足细胞损伤相关蛋白表达的关系。方法 体外培养人肾小球足细胞(ABgenetic exchange8/13),用30 mmol/L的D-葡萄糖溶液刺激AB8/13 48 h作为HG组,同时以终浓度为5 mmol/L的D-葡萄糖溶液处理细胞48 h作为正常对照(NC)组。用CCK8法检测细胞增殖活性。实时EPZ-6438价格荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA和miR-155的表达。Western blot法检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin蛋白的表达。鬼笔环肽染色观察细胞骨架变化。细胞免疫荧光检测蛋白nephrin、selleckchemsynaptopodin。结果 HG可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01)。HG作用的Ab8/13中的miR-155表达水平升高,nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05)。HG会导致足细胞骨架紊乱。结论 HG作用的人足细胞中miR-155表达升高,miR-155表达与HG诱导的足细胞损伤有关,可作为足细胞损伤诊断和治疗的靶点。

基于生物信息学的铁死亡机制相关胆管癌潜在治疗靶点和小分子药物筛选

目的 通过生物信息学方法研究与铁死亡相关的治疗胆管癌潜在作用机制,高通量筛选通过铁死亡途径治疗胆管癌疾病的潜在小分子药物。方法 在GEO(Gene Expression Omnibus)在线数据库中检索与胆管癌相关的数据集,使用TCGA(The Cancer Genome Atlas)数据库获得胆管癌相关样本及正常样本的数据,将上述筛选得到的数据集矩阵进行规范化数据整理,通过Sanger平台对数据集中的靶点基因进行limma差异分析,通过FerrDb铁死亡相关分析数据库收集与铁死亡相关的靶Baricitinib点,将收集得到的铁死亡相关靶点与差异分析得到的胆管癌相关疾病靶点取交集后,得到共同靶点,将上述共同靶点导入STRING数据库,得NN2211分子式到与铁死亡相关的胆管癌疾病靶点间的蛋白质相互作用(PPI)网络分析,筛选核心靶点,分别使用DAVID v6.8与Funrich富集分析软件对上述潜在作用靶点进行生物学功能与信号通路的富集分析,并利用cMAP(Connectivity Map)数据库高通量筛选通过铁死亡途径治疗胆管癌疾病的潜在小分子药物,将小分子化合物与靶蛋白进行分子对接分析,通过TIMER(Tumor Immune Estimation Resource)数据库分析铁死亡与胆管癌疾病共同靶点各自间表达水平与免疫细胞浸润水平或免疫检查点表达水平的相关性。结果 筛选得到3 133个胆管癌相关靶点,铁死亡相关靶点487个,取交集处理共得到93个铁死亡与胆管癌疾病相关的共同靶点,共同靶点的基因本体(GO)功能富集分析结果提示铁死亡途径对胆管癌治疗方面可能与转录调控相关过程、凋亡与细胞增殖等密切相关,京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号Phage Therapy and Biotechnology通路富集分析结果表明铁死亡途径对胆管癌治疗方面可能与TRAJL分子信号通路、表皮生长因子受体(EGFR/ErbB)相关信号通路、鞘氨醇-1-磷酸受体-1(S1P1)分子信号通路、胰岛素相关信号通路等过程密切相关,通过筛选得到3个小分子化合物(海恩酮、氯可托龙戊酸酯、利扎曲普坦),分子对接结果表明氯可托龙戊酸酯与其他2种成分相比,对上述3个潜在核心共同作用靶点(TP53、PTEN、SRC)的结合普遍较其余小分子成分强,从而提示其有望通过铁死亡途径治疗胆管癌相关疾病。结论 以铁死亡途径作为切入点,通过生物信息学方法探寻治疗胆管癌的分子作用机制及蛋白靶点,从而筛选得到潜在的治疗药物,具有重要意义。

WNK2抑制ERK1/2/ROS/SHP2信号通路延缓肝细胞癌的增殖通过和侵袭

目的 探讨WNK2对肝细胞癌(HCC)中ERK1/2/ROS/SHP2信号通路的影响,并探讨其在HCC中细胞增殖和迁移中的作用。方法 将WNK2-mimic和sh-RNAWNK2以及相应https://www.selleck.cn/products/valemetostat-ds-3201.html的阴性对照转染HepG2细胞,采用BALB/c裸鼠皮下成瘤实验检测WNK2对肝细胞癌增殖能力的影响;采用WesternBlot检测瘤组织中WNK2、p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达;使用SHP2抑制剂PHPS1进行处理之后,采用WesternBlot检测HepG2细胞中WNK2、p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达;使用细胞划痕实验和Transwell检测HepG2细胞的迁移能力和侵袭能力;采用单克隆增殖实验和CCK-8检测HepG2细胞的增殖能力。结果 与sh-NC组相比,sh-RNAWNK2组裸鼠的瘤体体积显著增大(P<0.01);而与NC-mimic组相比,WNK2-mimic组裸鼠的瘤体体积显著减小(P<0.01);WesternBlot结果显示,与sh-NC组相比,sh-RNAWNK2组WNK2的表达显著降低(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著升高(P<0.01);而与Nnon-invasive biomarkersC-mimic组相比,WNK2-mimic组WNK2的表达显著升高(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著降低(P<0.01);在体外实验当中,相对于sh-NC组,sh-RNAWNK2组中WNK2的表达显著降低(P<0.01),p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达显著升高(P<0.01);相对于sh-NC+PHPS1组,sh-RNAWNK2+PHPS1组中WNK2的Alpelisib核磁表达显著降低(P<0.01),而p40、gp90、p-SHP2、p-AKT和p-ERK1/2的表达则被逆转并且与sh-NC+PHPS1组不具有显著性差异(P>0.05);细胞划痕实验和Transwell结果显示,相对于sh-NC组,sh-RNAWNK2组HepG2细胞的迁移和侵袭能力显著升高(P<0.01);sh-NC+PHPS1组和sh-RNAWNK2+PHPS1组HepG2细胞的迁移和侵袭能力显著降低并且不具有显著性差异(P>0.05);单克隆增殖实验结果显示,相对于sh-NC组,sh-RNAWNK2组HepG2细胞的增殖能力显著升高(P<0.01),而sh-NC+PHPS1组和sh-RNAWNK2+PHPS1组HepG2细胞的增殖能力显著降低并且不具有显著性差异(P>0.05)。结论 WNK2可以抑制ERK1/2/ROS/SHP2信号通路,从而抑制ERK1/2/AKT信号通路,延缓HCC的增殖和迁移。

阿莫西林克拉维酸钾联合甲硝唑治疗牙周炎伴牙龈炎的效果观察

目的 探究阿莫西林克拉维酸钾联合甲硝唑治疗牙周炎伴牙龈炎的效果观察。方法 选取2021年6月~2022年6月收治的80例牙周炎伴牙龈炎患者,按照抽签法分为对照组(n=40)和观察CB-839组(BYL719配制n=40),其中对照组采用甲硝唑治疗,观察组采用阿莫西林克拉维酸钾联合甲硝唑治疗。评估两组患者的临床疗效、牙周指标、炎症因子、氧化应激指标。结果 观察组总有效率及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);治疗后观察组牙周袋深度、菌斑指数、牙周附着水平及龈沟出血指数均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);治疗后观察组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、一氧化氮(eNO)、丙二醛(MDA)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论牙周炎伴牙龈炎Glutamate biosensor患者采用阿莫西林克拉维酸钾联合甲硝唑治疗效果显著,显著改善牙周指标和氧化应激反应,降低炎症因子。

清热解毒祛湿方经MyD88/NF-κB通路对幽门螺杆菌感染大鼠的抗炎作用实验研究

目的:探讨清热解毒祛湿方经MyD88/NF-κB通路对幽门螺杆菌感染大鼠的抗炎作用。方法:选取100只成年Wistar大鼠分为正常对照组、模型对照组、氧氟沙星组(200mg/ml)、清热解毒祛湿方低、高剂量组(1000、2000mg/ml)。除正常对照组外,其余各组以幽门螺杆菌感染诱导胃损伤模型。建模成功后氧氟沙星组、清热解毒祛湿方低、高剂量组分别给予相应药物灌胃,正常对照组、模型对照组给与等体积的生理盐水。试验结束后,测定大鼠(13)C-尿素呼气试验超基准值(DOB)、胃湿重/干重比值、胃病理评分,RT-PCR法及蛋白印迹法测定胃组织MyD88、NF-κB mRNA与蛋白水平。结果:模型对照组DOB值、胃湿重/干重比值、胃病理评分、血清IL-4、TNF-α、IL-8水平、胃MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);氧氟沙星组、清热解毒祛湿方组DOB值、胃湿重/干重比值、胃病理评分、血清IL-4、TNF-α、IL-8水平、胃MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达水平低于模型对照组(P<0.05);且随着清热解毒祛湿方剂量的增加,清热解毒祛湿方各剂量组DOB值、胃湿重/干重比值Microsphere‐based immunoassay、胃病理评分、血清IL-4、TNF-α、IL-8水平、胃MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。清Enasidenib热解毒祛湿方低剂量组DOB值、胃湿重/干重比值、胃病理评分、血清IL-4、TNF-α、IL-8水平、胃MyD88、NF-κB mRNA与蛋白表达水平高于氧氟MK-2206价格沙星组(P<0.05);清热解毒祛湿方高剂量组与氧氟沙星组各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清热解毒祛湿方对幽门螺杆菌感染大鼠具有明显抗炎作用,其机制与清热解毒祛湿方对幽门螺杆菌感染诱导的MyD88/NF-κB信号通路的激活具有抑制作用相关。

KPC1与CREST在海马神经元分化发育中的相互作用和机制研究

背景:学习和记忆功能障碍是许多神经系统疾病的共性,海马是其最重要的脑区之一,其中海马体神经环路中的蛋白结构和功能紊乱在学习和记忆功能障碍发生发展中发挥重要作用。泛素蛋白酶体途径(UPS)是真核生物体内最重要的蛋白质降解途径之一,其中泛素蛋白连接酶E3在UPS时识别目标蛋白过程中起关键作用。Kip1泛素-促进复合体(KPC)是一种E3复合体,由KPC1和KPC2组成。KPC1的C端含有一个环指结构域作为催化亚基,以此识别并降解底物蛋白,是Peri-prosthetic infectionE3不可缺少的组成部分。在神经元,钙反应性反式激活子(CREST)介导钙内流诱导的基因转录,并以此参与神经干细胞分化。我们前期发现,KPC1基因敲除鼠学习、记忆等认知功能较同年龄小鼠明显增强,且海马组织CREST蛋白水平显著增多,但机制至今不明。目的:揭示KPC1通过UPS调节CREST蛋白稳定性而影响海马神经元介导学习和记忆等认知功能的selleckchem MK-2206作用与机制。方法:以WT小鼠、KPC1基因敲除小鼠为动物实验材料,在不同年龄段以Morris水迷宫实验和新事物认知实验评价小鼠学习、记忆、认知等行为学功能,应用Western blot检测上述小鼠海马组织蛋白中CREST的蛋白水平。以小鼠海马神经元细胞系(HT22)为细胞实验材料,在转染过表达/敲低KPC1腺病毒后,应用Real-Time PCR和Western blot检测转染效率以及转染后CREST的表达变化;在HT22细胞中转染KPC1敲低腺病毒后,采用细胞免疫荧光法染色观察HT22细胞突起长度及数目变化,同时Western blot检测神经元突起标志物MAP2蛋白水平变化;利用免疫共沉淀Co-IP技术检测HT22细胞中内源性KPC1和CREST的相互作用;在HT22细胞中分别转染表达融合3×Flag的KPC1和表达融合3×HA的CREST质粒,用抗HA磁珠免疫沉淀IP反应后,利用Western blot检测CREST的泛素化水平;利用Aβ1-42干预的阿尔兹海默症细胞模型,转染KPC1敲低腺病毒后评价其特征变化。结果:(1)Morris水迷宫和新事物认知实验结果显示:KPC1基因敲除小鼠学习、记忆、认知等行为学能力较WT小鼠显著提升,尤其在6、18月龄的中老年小鼠差异更为显著;(2)Western blot检测显示:各年龄段KPC1基因敲除小鼠海马组织中CREST的蛋白水平较WT小鼠均有不同程度升高,尤其在海马发育阶段的1月龄、3月龄升高趋势更为显著;(3)RT-PCR和Western blot显示:在HT22细胞,转染敲低KPC1腺病毒后,CREST蛋白水平显著增高,而KPC1过表达则降低其蛋白水平;(4)细胞免疫荧光法染色结果显MLN4924供应商示:在HT22细胞,转染敲低KPC1腺病毒后,HT22细胞突起长度及数目均增加;Western blot检测发现CREST和神经细胞突起标志物MAP2蛋白水平明显增加;(5)免疫共沉淀Co-IP实验结果显示:在HT22细胞,KPC1和CREST具有内源性相互作用;(6)免疫共沉淀实验及Western blot结果显示:在共转染KPC1与CREST的HT22细胞,显著提高CREST蛋白泛素化水平的同时明显降低CREST蛋白水平;(7)KPC1敲低部分改善AD细胞模型的典型变化:将KPC1敲低腺病毒转染于以Aβ1-42干预的经典AD细胞模型,Western blot结果显示:在AD细胞模型,敲低KPC1显著降低Aβ1-42和p-Tau蛋白水平。结论:KPC1通过泛素化CREST蛋白促进其降解,减少海马神经元突起数目和长度,以此调节学习和记忆等认知功能。

杞菊地黄丸配合针刺治疗闭角型青光眼继发视神经萎缩临床观察

目的 探究杞菊地黄丸配合针刺治疗闭角型青光眼继发视神经萎缩的临床疗效及对患者视网膜中央动脉血流动力学指标的影响。方法 选择闭角型青光眼继发视神经萎缩患者120例,采用随机数字表法分为2组各60例。对照组采用Medical pluralism单纯的针刺治疗,观察组在此基础上增加杞菊地黄丸口服治疗。连续治疗12周后对2组患者的临床疗效、中医证候评分、视力恢复情况、视网膜中央动脉血流动力学指标、不良反应发生率等进行评价统计,并进行组间比较。结果 观NSC 119875化学结构察组治疗有效率高于对照组(P<0.05);治疗后观察组患者的中医证候评分、视力https://www.selleck.cn/products/r-gne-140.html恢复情况和视网膜中央动脉血流动力学指标均显著优于对照组(P<0.05);观察组与对照组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 杞菊地黄丸配合针刺治疗闭角型青光眼继发视神经萎缩临床疗效显著,有较高的临床应用价值。

抗菌灭病毒涂料新技术与市场化研究

有害微生物与人类相伴相随,其传播导致了许多疾病的蔓延,并危害人们的身体健康。高频次密切接触是微生物传播的主要途径,其传播速度最快、危害也最大且范围最广。人类为了应对病原微生物侵害及切断其主要传播途径,除了使用天然动植物提取的防疫制剂外,还大量使用了人工合成制备的无机、有机和高分子等防疫制剂。但是,一般状态下的这类防疫制剂,存在着耐药性、毒性、稳定性较差等缺陷,以及制备、使用成本高的问题,当今市场化程度不高。现代纳米技术与无机制剂技术结合形成的纳米无机制剂,具有安全性、广谱性、高效性等鲜明的比较优势,同时用量少、相对成本较低,因此市场开发潜力巨大。建筑物的内饰涂料是与使用者接触的最直接、最表层的部分,开发出一种能够灭杀粘附在内墙表面的有害微生物,阻断室内的细菌和病毒的传播途径,安全性好的无机纳米抗微生物涂料技术,并进行市场化推广具有十分重要的意义。本课题针对有害微生物通过室内高频次密切接触传播而导致疾病传播、危害健康的问题,运用现代无机纳米材料制备技术,提出了一种抗菌灭病毒涂料的新技术,以“启利漆”为依托,分析了该技术的产品化、市场化的优势和亮点,探究了产品的经济效益和社会效益。本课题运用文献查阅、类比分析、调查研究、数学计算及归纳总结等研究方法,主要研究了国内外产品技术方法的研究现状,抗微生物涂料技术及抗微生物涂料产品的技术路线,抗微生物涂料产业的技术价值和经济价值。同时,以“启利漆”为例,探讨了进入抗微生物涂料市场的路径此网站选择,提出了产品的核心技术、核心成分、产品设计,分析了产品核心竞争力,预测了产品的市场规模与企业目标。本课题研究结果表明:“启利漆”选用纳米钼酸盐(Ag_2MoO_4、ZnMoO_4)为核心成分制备的新型抗病毒涂料产品,具有安全、高效、广谱等技术优势。纳米钼酸盐的金属离子、酸性自由基及正Zeta电位具有高效协同灭杀微生物的作用,能够在2h内快速根除表面99%以上的微生物,对超过680种微生物有效,人体安全性、生物组织相容性高,且不含活性洗脱物,不会诱导微生物产生耐药性。新型抗病毒涂料的应用场所涵盖居民商品房以及学校、医院、商场、机场、车站等的公共场所。“启利漆”的目标行业市场均价57.66元/m~2,根据“源推算”模型,截至2021年新型抗病毒涂料的市场规模分别价值76.63亿元,市场规模SCH772984体内在2022-2027年保持可观增长,预计每年保Optical biosensor持2.0%-4.5%的增长速度,2027年达到92.35亿元。但考虑到“启利漆”属于中型企业,存在资金、技术、人才、设施和同类产品竞争等因素,具体的市场目标可以定为2023年新型抗病毒涂料收入达到1.5亿元,企业收入贡献率达15%,到2027年达到12亿元,总市场收入贡献率达40%,经济效益显著。同时还可以为“启利漆”带来促进科技进步、推进国民健康事业、保护生态环境与维护国家安全与经济安全等社会、生态效益。综合以上研究,“启利漆”研发的纳米钼酸盐新型抗病毒涂料有着更高安全性、广谱性、强效性的比较优势,能够应对新冠、流感、手足口病等多个热点问题,应用场景种类多、体量大,受众程度好,市场应用前景好,企业的经济价值和社会价值显著。

肝细胞核因子-1b在糜烂性毒剂2-氯乙基乙基硫醚诱导急性肺支气管上皮细胞损伤中的作用及其机制

目的:探讨肝细胞核因子-1b(HNF-1b)在糜烂性更多毒剂2-氯乙基乙基硫醚(CEES)诱导人源性肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)损伤中的作用及其机制。方法:用不同浓度(0、0.4、0寻找更多.6、0.8、1.0和1.2 mmol/L)的CEES染毒BEAS-2B细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力,光镜下观察细胞形态,分别采用DCFH-DA和MitoSOX荧光探针检测细胞总活性氧(ROS)和线粒体ROS水平。Western blot检测BEAS-2B细胞中HNF-1b蛋白的表达。再利用慢病毒感染技术构建过表达HNF-1b的BEAS-2B细胞系,用1 mmol/L CESS处理24 h后,分别采用CCK-8法测定细胞活力,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,MitoSOX和DHE荧光探针检测线粒体ROS和细胞总ROS水平,JC-1染色法检测线粒体膜电位。结果:与对照组比较,0.6~1.2 mmol/L CEES染毒后细胞活力均降低(P<0.01);细胞形态发生损伤性改变;0.8~FNB fine-needle biopsy1.2 mmol/L CEES染毒后细胞总ROS和线粒体ROS水平均增加(P<0.01);CEES染毒组细胞HNF-1b蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。慢病毒转染后,与对照组正常细胞相比,CEES染毒组HNF-1b过表达细胞的细胞活力显著增加(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),线粒体膜电位的损伤缓解,且线粒体ROS和细胞内总ROS水平显著降低(P<0.01)。结论:糜烂性毒剂CEES能够导致肺支气管上皮细胞中HNF-1b表达降低,过表达HNF-1b能够减轻CEES诱导的细胞损伤和凋亡,抑制线粒体功能障碍,其机制可能与抗氧化有关。上述结果提示HNF-1b可能是糜烂性毒剂导致肺损伤的新靶点,激活HNF-1b可能是糜烂性毒剂毒性靶点治疗的新策略。