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目的 探讨淫羊藿苷对创伤后应激障碍（PTSD）大鼠恐惧记忆的影响及作用机制。方法 选取雄性SD大鼠30只，应用单一连续应激（SPS）构建PTSD大鼠模型。将模型大鼠按随机数字表法分成SPS组、淫羊藿苷组及淫羊藿苷+K252a组，Terpenoid biosynthesis其中K252a为酪氨酸激酶受体B (TrkB)抑制剂，每组10只；另取10只正常大鼠作为对照组。淫羊藿苷组及淫羊藿苷+K252a组大鼠均于SPS造模1 d后灌胃给药淫羊藿苷，剂量为20 mg/kg,1次/d，共2周。对照组、SPS组给予等剂量生理盐水。K252a为造模7 d后侧脑室注射单次给药。2周后，旷场试验、高架十字迷宫实验、条件性恐惧测试检测各组大鼠焦虑、抑郁及恐惧记忆障碍状况；分子对接验证淫羊藿苷与脑源性神经营养因子（BDNF）的结合活性。免疫组化检测大鼠杏仁核BDNF和TrkB的表达；Western blotting检测BDNF和TrkIACS-10759细胞培养B蛋白的相对表达。免疫荧光检测大鼠杏仁核突触后密度蛋白95 (PSD95)和突触素（SYN）的表达。结果 淫羊藿苷与BDNF具有较好的结合活性。与对照组相比，SPS组和淫羊藿苷+K252a组大鼠进入中心区域次数和中心区域运动距离百分比明显降低，开臂进入（OE）和开臂时间（OT）明显降低，僵住时间和排便次数明显增加，BDNF、TrkB、PSD95和SYN蛋白表达明显降低（P <0.05）；而与SPS组相比，淫羊藿苷组大鼠进入中心区域次数和中心区域运动距离百分比明显增加，OE和OT明显增加，僵住时间和排便次数明显减少，BDNF、TrkB、PSD95和SYN蛋白表达明显增加（P <0.05）。结论 淫羊藿苷可以有效缓解SPS诱导的大鼠恐惧记忆障碍，这种保护作用可能与激活BDNF/TrkB信号通路及上调突触相关蛋白SYN和PSDMK-2206作用95有关。

目的：探讨艾灸督脉对淀粉样前体蛋白/早老素1(APP/PS1)双转基因小鼠自噬及Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响，为防治阿尔茨海默病提供实验依据。方法：将12只C57BL/6J雄性小鼠设为正常组，另48只同龄同背景APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、艾灸组、雷帕霉素组、艾灸+抑制剂组，每组12只。艾灸组隔附子饼灸百会，温和灸大椎、风府，20 min/d；雷帕霉素组腹腔注射2 mg/kg雷帕霉素；艾灸+抑制剂组在艾灸组基础上，腹腔注射3-甲基腺嘌呤1.5 mg/kg。以上3组均每日干预1次，干预2周，每周停1次。正常组和模型组小鼠仅固定，不采取任何干预措施。各组小鼠在干预前后均行水迷宫实验检测逃避潜伏期，透射电镜观察小鼠海马脑区自噬体和自噬泡的数量及形态，免疫组化检测脑区β-淀粉样蛋白1-42(Aβ_(1-42)Ayurvedic medicine)表达差异，实时荧光定量聚合酶链式法（qRT-PCR点击此处）检测海马脑区Aβ_(1-42)mRNA相对表达量，免疫印迹（WB）法检测小鼠海马组织微管相关蛋白轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）/微管相关蛋白Barasertib研究购买轻链3Ⅰ（LC3Ⅰ）、泛素结合蛋白62(p62)、雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、Wnt家庭成员3a(Wnt3a)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、β-连环蛋白（β-catenin）表达情况。结果：干预后，与模型组比较，艾灸组、雷帕霉素组逃避潜伏期缩短（P<0.05）。模型组和艾灸+抑制剂组海马区自噬泡和自噬体较少，艾灸组和雷帕霉素组自噬泡和自噬体较多。与正常组比较，模型组Aβ_(1-42)阳性表达颗粒数增多（P<0.05）；与模型组比较，艾灸组、雷帕霉素组Aβ_(1-42)阳性表达颗粒减少（P<0.05）。与正常组比较，模型组Aβ_(1-42)mRNA相对表达量增多（P<0.05）；与模型组比较，艾灸组、雷帕霉素组Aβ_(1-42)mRNA相对表达量减少（P<0.05）。与正常组比较，模型组p62、mTOR、GSK-3β蛋白表达均升高（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Wnt3a、β-catenin蛋白表达均降低（P<0.05）；与模型组比较，艾灸组、雷帕霉素组p62、mTOR、GSK-3β蛋白表达均下降（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Wnt3a、β-catenin蛋白表达均升高（P<0.05）；与艾灸+抑制剂组比较，艾灸组、雷帕霉素组p62、mTOR、GSK-3β蛋白表达均降低（P<0.05）,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Wnt3a、β-catenin蛋白表达均升高（P<0.05）。结论：艾灸督脉可加速APP/PS1双转基因小鼠脑内Aβ的清除，其作用机制可能与艾灸督脉激活Wnt信号通路，进而促进细胞自噬有关。

恶性肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病,顺铂类药物作为治疗恶性肿瘤的重要药物之一,已经被广泛应用于临床治疗。顺铂类药物的作用机制主要是通过与肿瘤细胞中的DNA结合,从而抑制肿瘤细胞的增殖和扩散。但临床中顺铂类药物的毒副作用较大,且肿瘤细胞易产生耐药性,亟需开发新型铂类药物克服这些不足。铂基药物的抗肿瘤活性与其配体的结构密切相关,其中包括配位点的位置、取代基的种类、氮原子的电荷状态等。此外,药物的毒副作用也受到配合物空间异构的影响,LY294002体内实验剂量因此需要进行结构优化来提高其选择性和生物活性。喹啉类化合物在药物领域中应用广泛,是一类重要的活性配体,基于此,本论文合成、表征了一系列以4-氨基喹啉衍生物为结构单元的Pt(II)基抗肿瘤化合物,并应用紫外可见光谱、荧光光谱分别对所合成的化合物水解过程和荧光性质进行了研究,对化合物的体外细胞的增殖抑制活性、以及与潜在生物靶标的相互作用进行了初步研究。主要研究结果如下:(1)以4-氨基喹啉衍生物和四氯铂酸钾为结构单元,设计、合成并表征了五种[Pt~(II)(N_1)(Cl)_3]类金属抗肿瘤化合物(C1-C5,N_1为4-氨基喹啉衍生物)。以喹啉环上7号位(C1-C3)和2号位(C4、C5)两条衍生路线为主,分别进行了给电子基(C3、C5)和吸电子基(C1、C2、C4)的官能团修饰。其中,配合物C5具有优异的荧光特性和更小的水解速率常数。结合A549和He La肿瘤细胞增殖抑制实验发现,配合物C1表现出了比顺铂更优异的抑制活性。(2)为了进一步讨论顺反式异构对铂化物生物活性的影响,引入二甲亚砜(DMSO)作为另一重要结构单元,设计、合成并表征了八种基于4-氨基喹啉衍生物的具有transcutaneous immunization顺反异构体的[Pt~(IIwww.selleck.cn/products/iacs-010759-iacs-10759)(N_1)(Cl)_2(DMSO)]类金属抗肿瘤化合物(C12a、C12b、C15a、C15b,a为反式构型,b为顺式构型,N_1为4-氨基喹啉衍生物)。结果表明,顺式结构具有更好的肿瘤细胞增殖抑制活性,其中配合物C12b和C14b表现出了明显优于顺铂的细胞抗增殖活性。(3)为了改善铂化物的水溶性,进一步对所合成的铂化合物进行结构改造,选用水溶性较好的草酸(ox)作为螯合配体取代氯,设计合成[Pt~(II)(N_1)(S_1)(ox)]类金属抗肿瘤化合物(N_1为4-氨基喹啉衍生物,S_1为二甲亚砜)。设计了四个合成方案来进行草酸根的引入,并成功在方案一(以[Pt Cl_2(DMSO)_2]为起始铂先接草酸根再接配体)中检测到目标产物的生成,但相关后续纯化、表征、性质和活性研究正在进行中。

目的 探究雷帕霉素靶蛋白(mTOR)在肝癌发生、进展及治疗中的作用机制以及应用局限与优势。方法 应用Pubmed数据库，以“mtor、liver cancer、inhibitor”为英文关键词，检索2001-2023年相关文献。纳入标准selleck化学：(1)mTORintrahepatic antibody repertoire的定义、分型及作用；(2)mTOR与肝癌相关的动物及临床实验研究；(3)mTOR抑制剂研究进展。排除标准：(1)会议摘要；(2)低质量文献。最终纳入70篇相关文献。结果 mTOR影响肝癌发生进展作用机制主要包括促进肝癌细胞增殖与GW4869分子式转移、抑制肝癌细胞凋亡与自噬、破坏肿瘤微环境及产生药物耐药性。mTOR抑制剂治疗肝癌是一把双刃剑，在延长患者生存期、减少肝癌复发、抗耐药性的同时，也会损害肝功能，甚至无益。结论 mTOR信号通路对肝癌的发生、进展及治疗具有重要临床意义，mTOR抑制剂虽然在肝癌的治疗中具有显著的优势，但也存在不足之处。

目的 建立抑郁障碍患者队列，探索其心血管疾病相关危险因素，构建抑郁障碍患者心血管疾病预测模型。方法 依托“山东多中心健康医疗大数据平台(SMCHBDP)”,以2012年1月至2020年12月期间接受过2次及以上医疗服务的抑郁障碍患者为研究对象，建立抑郁障碍患者队列，借助Cox比例风险回归模型构建抑郁障碍患者心血管疾病风险预测模型。采用一致性指数(C-index)和受试者工作曲线(ROC曲线)评价模型的预测能力，采用Mirdametinib临床试验十折交叉验证检验数据稳健性，采用校准图检验模型的校准能力，并通过列线图对模型结果进行可视化。结果 研究共纳入抑郁障碍患者3 396例，中位随访时间为4.37(3.68, 5.45),发病密度23/1 000人年。通过Cox比例风险回归分析建立预测模型，预测因子有年龄、性别、城乡Smoothened Agonist细胞培养分布、体质指数(Body Mass Index, BMI)、糖尿病、血脂异常和抗精神疾病药物使用。预测模型的C-index为0.72(95%CI:0.70～0.75),曲线下面积(Amediolateral episiotomyUC)表明预测模型具有良好的预测能力。校准图证实了预测模型具有良好的校准能力。结论 本研究筛选了抑郁障碍患者的心血管疾病的危险因素，构建了具有良好预测效果的预测模型，为抑郁障碍患者心血管疾病风险评估提供了方法工具。

目的 基于网络药理学技术对真武汤治疗扩张型心肌病(Dilated cardiomyopathy, DCM)药理机制及相关作用靶点进行分析。方法 在现有中药系统药理数据库与分析平台(TCMSP)的基础上，筛选既往研究中真武汤的有效成分及相关靶向基因，后根据拓扑分析构建真武汤的H-C网络。采用Drugbank和Genecards药物及基因相关数据库构建DCM疾病相关靶点，并与构建的真武汤有效成分网络进行匹配进而明确真武汤治疗DCM的潜在治疗靶点。并应用Metascape及DAVID数据库对真武汤潜在治疗靶点进行GO生物过程及KEGG信号通路GSK126使用方法分析，构建PPI网emerging pathology络，对PPI网络进行拓扑分析以明确DCM及真武汤治疗的核心靶点。结果 真武汤中有效化学成分包括白术15种，茯苓6种，白芍11种，附子7种，生姜33种，有效成分作用靶点106个。在药物-有效成分-靶点网络内重要性前10的有效成分中，包含山奈酚、β-谷甾醇、豆甾醇，有106个可以作为真武汤治疗DCM的潜在治疗靶点。在得出的全部20调信号通路中，其中PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路等10个通路排名靠前。通过GO富集功能共筛选涉及炎性反应、细胞凋亡及细胞增殖等方面排Aurora Kinase抑制剂名靠前的富集网络30条，BP、CC及MF每个层面各10条。PPI网络筛选的核心靶点为RBM20、IL1B、TP53、IL6、MMP9、ESR1、TNF、AKT1、FHOD1、SPEG基因。结论 山奈酚、β-谷甾醇及豆甾醇等是真武汤治疗DCM的潜在有效成分，通过调控AMPK-mTOR通路发挥作用，RBM20、IL1B、TP53等基因为真武汤治疗的核心作用靶点。

目的 探究阿魏酸是否可通过调控PTEN/PI3K/AKT信号通路在体内外抑制急性T淋巴细胞白血病进展。方法将急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞分为对照组、阿魏酸处理组和Lmutagenetic toxicityY294002处理组进行体外实验，对照组正常培养；阿魏酸处理组分别给予不同浓度（1.25、2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L）阿魏酸，采用CCK-8法检测细胞增殖能力，筛选实验浓度；LY294002处理组给予50μmol/L PI3K/AKT抑制剂LY294002，采用克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验检测细胞增殖、凋亡、侵袭情况，采用Western blot检测selleck NMR核蛋白Ki67、增殖细胞核抗原（PCNA）、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、PTEN、p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT蛋白相对表达量。使用30只雄性BALB/c裸鼠建立移植瘤裸鼠模型，平均分为正常组和阿魏酸处理组进行体内实验，正常组接种Jurkat细胞后以生理盐水灌胃，阿魏酸处理组接种Jurkat细胞后以75 mg/kg阿魏酸灌胃，比较移植瘤质量和体积变化，并检测肿瘤组织中Ki67、cleaved caspase-3/caspase-3、E-cadherin、N-cadherin、PTEN、p-PI3K、PI3K、p-AKT和AKT水平。结果 体外实验中，与对照组比较，5、10、20μmol/L阿魏酸处理组和LY294002处理组细胞更多克隆形成率、细胞侵袭数、Ki67、PCNA、N-cadherin、Vimentin、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显降低/减少（P<0.05），细胞凋亡率、cleaved caspase-3/caspase-3、cleaved caspase-9/caspase-9、E-cadherin、PTEN明显升高（P<0.05）。体内实验中，与正常组比较，阿魏酸处理组裸鼠肿瘤质量减轻，肿瘤体积减小，肿瘤组织中Ki67、N-cadherin、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT明显降低，cleaved caspase-3/caspase-3、E-cadherin、PTEN明显升高，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 阿魏酸在体内外均可抑制急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的增殖及侵袭，并诱导细胞凋亡，其作用机制可能与调控PTEN/PI3K/AKT信号通路有关。

目的 探讨苯磺酸氨氯地平治疗对轻中度血压患者血压水平、肾功能及不良反应的影响，为临床治疗提供参考依据。方法 回顾性分析广东省清远监狱医院2021年2月至2022年12月纳入的100例高血压患者，按照不同的治疗方法分为硝苯地平Healthcare acquired infection组（硝苯地平治疗，50例）和氨氯地平组（苯磺酸氨氯地平治疗，50例）。比较两组患者临床疗效，治疗前和治疗8周后心率、血压，治疗前和治IACS-10759疗4、8周后肌酐水平变化情况，以及不良反应发生情况。结果 两组Fulvestrant生产商患者临床总有效率比较，氨氯地平组较硝苯地平组更高（P <0.05）；与治疗前比，治疗8周后两组患者舒张压、收缩压均降低，且氨氯地平组低于硝苯地平组（均P<0.05），而两组患者心率组内和组间比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）；与治疗前比，治疗4、8周后两组患者血清肌酐含量均降低，且氨氯地平组低于硝苯地平组（均P<0.05）；两组患者不良反应总发生率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 相比于硝苯地平，对轻中度高血压患者采用苯磺酸氨氯地平治疗能够更有效降低患者血压水平，保护患者肾功能，且安全性良好。

背景与目的:糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病主要的微血管并发症之一,是造成终末期肾病的主要原因之一。尽管现有的治疗方法有效,但糖尿病肾脏病发病和进展的残余风险仍很大。自噬(autophage)是一种清除细胞异常和功能失调的分子和细胞器的过程,而足细胞是分布于肾小球毛细血管表面的高度特化的上皮细胞,存在较高水平的基础自噬,是DKD进展中主要的受损细胞。E74样ETS转录因子3(E74 Like ETS Transcription Factor 3,ELF3)是上皮特异性ETS转录因子的一个亚群,多在含有分泌上皮细胞的器官中表达。研究表明ELF3的表达可由足细胞中的高糖(High glucose,HG)和/或AGEs直接应激诱导,致糖尿病肾小球硬化。丝裂原活化蛋白激酶14(Mitogen-activated protein kinase 14,MAPK14)参与了广泛的细胞过程,如分化、增殖、生存及凋亡、转录调控和发育,且在基础条件下可抑制自噬。因此,我们推测在高糖诱导的DKD中,ELF3/MAPK14信号通路可调控足细胞自噬,导致足细胞损伤。在本研究中构建了高糖诱导足细胞损伤的模型,观察高糖是否能够调控足细胞自噬的水平,进而探讨ELF3/MAPK14信号通路在足细胞损伤中的作用和机制。方法:建立以高糖诱导的足细胞损伤模型。1)观察不同浓度的高糖(5.5 mM/L、30 mM/L、40 mM/L、50 mM/L)对足细胞(MPC5)自ICI 46474使用方法噬的影响;2)通过RNA-seq技术筛选出高糖干预足细胞后的mRNA表达谱,发现ELF3的表达明显上调;通过检索自噬数据库、Cistrome数据库与高糖处理足细胞的mRNA表达谱取交集后分析发现,MAPK14在高糖处理的足细胞中表达明显上调,进一步采用生物信息学技术对于MAPK14启动子区域进行转录因子结合预测,我们发现在MAPK14启动子区域存在着ELF3的转录结合位点;检测ELF3在DKD肾脏组织和高糖诱导的足细胞中的表达水平以及MAPK14在高糖诱导的足细胞中的表达;并通过细胞免疫荧光观察ELF3和MAPK14在细胞中的空间定位;3)观察ELF3/MAPK14诱导足细胞损伤和在自噬中的作用:通过RNA干扰技术(siRNA)敲减ELF3、基因转染技术过表达ELF3以及回复实验共转染过表达ELF3和敲减MAPK14检测足细胞损伤标志物(podocin、desmin)和自噬相关标志物(LC3、Beclin1、P62)的表达。通过免疫组织化学技术检测DKD肾脏组织中ELFHIV (human immunodeficiency virus)3的表达水平,利用蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR法(RT-PCR)来检测自噬相关标志物(Beclin1、LC3、P62)和足细胞损伤标志物(podocin、desmin)的表达。结果:1)在细胞模型中发现高糖能够抑制足细胞自噬的水平,增强足细胞损伤,LC3、Beclin1、podocin的表达呈浓度梯度式递减,P62、desmin的表达以浓度梯度式递增(P<0.01);2)在高糖的刺激下足细胞中ELF3和MAPK1Talazoparib试剂4表达增加,DKD肾组织中ELF3的阳性面积显著增加(P<0.01);细胞免疫荧光共定位显示ELF3和MAPK14均在细胞核上表达;3)ELF3基因沉默后LC3、Beclin1显著增加,P62表达下降,自噬水平升高,desmin表达下降,podocin表达升高,足细胞损伤降低,MAPK14表达降低(P<0.01);而转染过表达ELF3质粒后,LC3、Beclin1显著降低,P62表达升高,自噬水平降低,podocin表达降低,desmin表达增强,足细胞损伤增强,MAPK14表达增强(P<0.01)。回复实验中,过表达ELF3使得自噬水平降低,足细胞损伤增强,MAPK14基因沉默后足细胞损伤降低,自噬水平升高,而将它们共转染后自噬水平和足细胞损伤水平趋近正常(P<0.01)。结论:本研究的结果表明,高糖能够通过抑制足细胞自噬的水平从而导致足细胞损伤,其机制可能是ELF3/MAPK14信号通路抑制足细胞自噬相关水平表达,导致肾脏损伤,这为足细胞自噬在DKD进展中的机制研究提供了新思路。

该研究观察了一株分离于自然发酵牦牛酸乳的植物乳杆菌HFY09(Lactobacillus plantarum HFY09,LP-HFY09),通过降植烷建立狼疮性肾炎动物模型验证了LP-HFY09的作用，并通过试剂盒法、苏木精-伊红染色法、qPCR和Western blot检测小鼠血清和肾组织的相关指标。实验结果显示，LP-HFY09能够降低狼疮性肾炎造成的尿蛋白升高和血清、肾组织白介素6(interleukin-6,IL-6)、IL-12、TNF-α和IFN-γ细胞因子水平升高。LP-HFY09还可以降低肾炎小鼠血清肌酐、尿素氮、总胆固醇、甘油三酯水平和提高总蛋白、白蛋白水平。另外LP-HFY09具有抑制肾炎小鼠抗双链DNA抗体阳性率的作用。切片观察发现LP-HFMG132Y09能够减轻肾炎造成的肾小球形态不完整和炎性浸润等组织损伤。LP-HFY09还能polymers and biocompatibility够下调CB-839生产商狼疮性肾炎小鼠肾脏组织中的转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子mRNA和蛋白表达和上调铜锌超氧化物歧化酶和锰超氧化物歧化酶表达。结果表明，LP-HFY09能够对狼疮性肾炎起到明显的干预作用，且LP-HFY09的作用与其浓度呈正相关，在10~9 CFU/kg作用下效果接近药物泼尼松。