椎间盘退变是临床常见疾病,髓核与髓核细胞是椎间盘中主要的病变组织与细胞类型。髓核细胞受病理因素影响而加速衰老或出现代谢障碍时,髓核稳态被破坏,这导致了椎间盘退变的发生发展。自Dorsomorphin供应商噬是细胞在病理环境下降解受损细胞器与异常蛋白质以维持正常生理功能的途径之一,能促进细胞自我调节以抵御致病因素影响。椎间盘退变时,髓核细胞处于应力失衡与代谢障碍的异常环境中,促进髓核细胞自噬可清除有害代谢产物累积、延缓细胞老化,这有助于维持髓核与椎间盘的健康生理状态。随着中医药治疗椎间盘退变疾病相关研究的不断深入,大量提取自传统中草药的单体成分被发现可以促进髓核细胞自噬以缓解Thai medicinal plants椎间盘退变。本文根据最新的研究进展,讨论了髓核细胞的自噬与椎间盘退变的关联,共获取了14种在促进髓核细胞自噬以缓解椎间盘退变领域展现出潜力的中药单体,并将其作用机制归纳为以下4种:促自噬抑制髓核细胞凋亡、促自噬拮抗髓核细胞氧化应激、促自噬抑制髓核细胞外基质获悉更多降解和促自噬促进髓核细胞外基质大分子合成,以期为中药单体调节髓核细胞自噬从而缓解椎间盘退变的研究提供新的思路与参考。
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褪黑素对脑缺血再灌注损伤的影响及机制研究
目的本研究通过构建大鼠大脑中动脉栓塞模型(Middle cerebral artery occlusion,MCAO),探讨褪黑素对脑缺血再灌注(Ischemia/reperfusion,I/R)损伤大鼠的影响及其可能存在的相关作用机制。方法将90只体重在250-280 g的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,RNA biology随机分为3组:假手术组(Sham组),脑缺血再灌注损伤组(I/R组),褪黑素给药组(MT组)。Sham组只分离血管,不插栓。I/R组和MT组大鼠均制备为局灶性大脑中动脉栓塞模型。其中MT组在大鼠缺血2 h完成后拔栓以实现再灌同时通过腹腔注射10 mg/kg的褪黑素。再灌注24 h完成后,评估神经功能缺损程度并评分;利用TTC染色测量脑梗死体积;利用苏木精-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察各组大鼠脑组织形态和尼氏小体的变化;检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL细胞凋亡染色观察各组神经元的凋亡情况;免疫荧光染色观察TLR4和MyD88蛋白的表达情况。Western blot测定TLR4、MyD88、Cleaved Caspase-3和Bcl-2的蛋白表达。结果1、神经功能评分结果显示,Sham组大鼠神经功能正常,无神经功能缺损。I/R组与MT组大鼠神经功能均有受损,且MT组与I/R组相比神经功能缺损程度得到了一定的恢复且差异有统计学意义(P<0.01)。2、TTC结果显示,Sham组大鼠脑组织正常,无梗死区;I/R组大鼠可见明显梗死区,MT组与I/R组相比脑梗死区体积显著缩小且差异有统计学意义(P<0.01)。3、I/R组与Sham组相比SOD活性显著降低,MDA含量显著增加,差异有统计学意义(P<0.01);MT组与I/R组相比SOD活性显著增加,MDA含量显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。4、HE染色结果显示,Sham组组织结构完整正常,未见明显水肿,神经元细胞形态完整,核仁清晰;I/R组大鼠间质水肿明显,与Sham组相比神经细胞数目明显减少,可见神经细胞坏死以及坏死后留下的空泡;MT组与I/R组比较神经元数目增多,空泡减少,形态相对规则可见少量的神经元固缩深染。5、Nissl染色结果显示,Sham组神经细胞排列规律整齐,尼氏小体相对表达量多,染色深。与Sham组相比,I/R组大鼠神经元间排列疏松层次减少,出现尼氏小体的减少或消失,染色变浅;MT组与I/R组相比染色较深,神经细胞排列较为整selleck HPLC齐紧密细胞层次增加,尼氏小体数量减少不明显。6、TUNEL染色结果显示,I/R组大鼠脑组织切片细胞凋亡率最高,与I/R组相比MT组细胞凋亡率降低,差异有统计学意义(P<0.01)。7、Western blot结果显示,与Sham组相比,I/R组大鼠TLR4、MyD88以及Cleaved Caspase-3蛋白的表达明显升高,Bcl-2蛋白的表达显著降低差异有统计学意义(P<0.01)。与购买CH-223191I/R组相比MT组TLR4、MyD88以及Cleaved Caspase-3蛋白的表达显著降低且差异有统计学意义(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1、脑缺血再灌注损伤的机制涉及到TLR4/MyD88信号通路;2、褪黑素可能通过调控TLR4/MyD88信号通路,发挥抗氧化应激及抗凋亡的作用,从而对脑缺血再灌注损伤发挥保护作用。
基于文献研究对中药治疗早期2型糖尿病肾病用药规律的探讨
目的:本研究基于文献检索从中国生物医学文献系统(CBM)、中国知网(CNKI)、万方医学网和维普等中文数据库中搜集了近10年以中药治疗早期2型糖尿病肾病相关文献并进行汇总,分析了治疗早期2型糖尿病肾病的常用中药规律。材料与方法:检索中国生物医学文献系统(CBM)、中国知网(CNKI)、万方医学网和维普等中文数据库中从2011年-2020年公开发表相关医学文献涉及学术期刊的临床研究。关键词选“中医药治疗早期糖尿病肾病”进行检索、使用Microsoft Office Excel 2019软件对文献信息进行汇总与基础分析、经过基础数据整理后使用SPSS25.0软件对药物的频次、药物性味归经,等多个维度进行统计分析。结果:1.在检索文献过程中,根据检索关键词共获取723篇,然后根据纳入和排除标准,共计获取符合标准文献170篇。通过数据整理得出涉及药物共计187味、其中药物出现频次排在第一位是黄芪、出现150次、使用频率为88.23%、频次出现≥30次的药物合计有21味依次为丹参出现107次、山药出现105次、生地黄出现87次、山茱萸出现85次、茯苓出现83次、川芎出现59次、泽泻出现57次、大黄出现54次、白术出现49次、熟地黄出现46次、当归出现43次、党参出现40次、麦冬出现39次、红花出现39次、水蛭出现33次、葛根出现30次、地龙出现30次、桃仁出现30次、丹皮出现30次、枸杞子出现30次、共使用了1076次。这些药物的使用频率分别为62.9%、61.77%、51%、18%、50%、4selleckchem Ipatasertib2.82%、34.71%、33.53%、31.77%、28.82%、27.06%、25.29%、23.53%mycobacteria pathology、22.94%、22.94%、19.41%、17.65%、17.65%、17.65%、17.65%、17.65%。2.针对每一种药物的药味,药性,归经进行研究。2.1药味统计中发现甘味药、苦味药、辛Z-IETD-FMK体内味药的频率相对比较高;而咸味药的使用次数较低、应用较少。2.2从药性统计频率由高到低排序为:寒性药物出现频率最高,使用极为广泛。温性药、平性药使用频次中等,热性药、凉性药应用较少。2.3按归经统计、从高到低的统计频率分别为厥阴肝经、少阴肾经、太阴脾经、太阴肺经、少阴心经、阳明胃经。3.治疗分类最高频次为补虚药、频次757次。补虚药中主要为补气药物、补阴药物次之。结论:1.根据药物频次研究结果可以得出,中药治疗早期2型糖尿病肾病常用的药物依次为黄芪,丹参,山药,生地黄,山茱萸,茯苓,川芎,泽泻。2.由四性研究结果可以得出,治疗本病药性最常见的是寒性。3.由五味研究结果可以得出最常见的是甘味,苦味,辛味。4.归经结果表明,药物归经最常见的是归肝经,肾经。5.治疗药物分类结果得出最用的是补虚类药,补虚类药物最常用的是补气药,补阴药。
TLR4/NF-κB信号通路在肾缺血再灌注损伤中的作用机制
目的 探讨Toll样受体4/核因子-κB(Toll-like receptor 4/nuclear factor-κB,TLR4/NF-κB)信号通路在肾缺血再灌注(renal ischemia-reperfusion, RIR)损伤中的作用机制。方法 96只健康SD大鼠随机分为4组,即假手术(Sham)组、模型(Model)组、Model+TAK242(TLR4抑制剂,10mg/kg)组和Model+LPS(TLR4激活Cognitive remediation剂,5mg/kg)组,每组24只。除Sham组外,其他组采用夹闭双侧肾动脉45min的方法复制RIR大鼠模型;造模前7天开始,各组分别1次/天腹腔注射给药。再EPZ-6438灌注6h后,检测血清肾功能指标,HE染色法行肾组织病理学检查;透射电子显微镜观察肾小管上皮细胞超微结构改变;RT-PCR法检测肾组织TLR4、NF-κB p65mRNA表达;Western blot法检测肾组织TNF-α、IL-1β、TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达。结果 与Sham组比较,Model组血清BUN、SCr水平升高(P<0.05);肾组织可见肾小球体积增大、肾小管管腔扩张、炎性细胞浸润等病理学改变,病理评分升高(P<0.05);肾小管上皮细胞可见线粒体肿胀、膜破裂、嵴断裂,内质网扩张,核糖体减少等超微结构病变;肾组织TNF-α、IL-1β蛋白表达量升高,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量均升高(P<0.05)。与Model组比较,Model+TAK242组BUN、SCr水平降低(P<0.05),肾组织病变和肾小管上皮细胞超微结构改变均明显改善,TNF-α、IL-1β蛋白表达量降低,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05);Model+LPS组BUN、SCr水平升高(P<0.05),肾组织病变和肾小管上皮细胞超微结构改变均明显加重,TNF-α、IL-1β蛋白更多表达量升高,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量升高(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路可能通过调节炎性反应参与RIR损伤过程。
壮药双路通脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡的影响
目的基于氧化应激和炎症反应探讨壮药双路通脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元凋亡的影响。方法将大鼠随机分为假手术组,模型组,壮药双路通脑方低、中、高剂量组(9.0、18.0、36.0g/kg),依达拉奉组(3.0mg/kg),每组18只,采用线栓法构建大脑中动脉闭塞/再灌注模型以模拟脑缺血再灌注损伤,给予相应药物干预6d,采用ZealLonga评分法对大鼠进行神经功能缺损评分,TTC染色检测脑梗死面积,HE染色和TUNEL染色检测脑组织缺血半暗带海马CA1区神经元病理损伤和细胞凋亡情况,试剂盒检测脑组织SOD活性和GSH、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α水平,Westernblot法检测大鼠脑组织Bax、www.selleck.cn/products/torin-1Bcl-2、caspase-3、cleaved-caspase-3、TLR4、NF-κBp65、Nrf2、HO-1蛋白表达。结果与模型组比较,壮药双路通脑方中、高剂量组和依达拉奉组大鼠神经功能缺损评分,脑梗死率,神经元凋亡率,脑组织缺血半暗带IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA水平,Bax、TLR4蛋白表达,cleaved-caspase-3/caspase-3、p-NF-κBp65/NF-κBp65比值降低(P<0.05),GSH水平、SOD活性和Bcl-2、Nrf2、HO-1蛋白表达升高(P<0.05)。结论壮药双路通脑方可抑central nervous system fungal infections制氧化应激和炎症PF-03084014研究购买反应,抑制神经元凋亡,改善神经功能,减轻脑缺血再灌注损伤大鼠的脑损伤,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路和激活Nrf2/HO-1信号通路有关。
基于网络药理学研究丹栀逍遥散治疗便秘的作用机制
目的 基于网络selleckchem CX-5461药理学研究丹栀逍遥散治疗便秘的作用机制。方法 利用TCMSP、BATMAN-TCM、Uniprot、GeneCards等数据库检索筛选丹栀逍遥散关键成分及相关靶点、疾病靶点和相关通路。通过STRING数据库和Cytoscape软件绘制PPI网络图,寻找核心基因。利Surgical intensive care medicine用MeAZD6738临床试验tascape和BioGPS数据库通过微生信平台进行基因富集分析。利用SwissDock平台进行分子对接分析。结果 丹栀逍遥散药物靶点746个,便秘靶点1 620个。关键靶点为VEGFA、CASP3、TNF、JUN,关键成分为槲皮素、β-谷甾醇、山奈酚、豆甾醇。关键靶点主要作用于淋巴细胞、平滑肌、结肠、结直肠腺癌、小肠,主要富集于炎性肠病、NF-κB信号通路等。分子对接结果显示活性成分与靶点蛋白结合稳定。结论 丹栀逍遥散治疗便秘的作用机制,可能是通过其4个关键成分作用于4个关键靶点,调节多通路,起到抑制炎症、保护肠黏膜屏障、调节肠道菌群等作用。
女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用
目的 探究女贞子-淫羊藿药对对顺铂所致大鼠肾毒性的保护作用。方法 将Wistar雄性大鼠应用随机数字表法分为对照组、模型组、女贞子-淫羊藿药对组,每组10只。除对照组外,其他两组均于第4 d腹腔注射顺铂3 mg/kg;女贞子-淫羊藿药对组在给予顺铂前3 d灌胃350 mg/kg提取物,连续7 d。取材结束后,计算大鼠体重变化率和脏器指数,考察肾功指标和组织病理学变化,采用免疫组化法观察大鼠肾脏肾损伤分子1(Kidney injury molecule-1,KIM-1)和NADPH氧化酶4(Anti-NADPH oxidase 4,NOX4)阳性信号的表达和分布;Western Blot法检测KIM-1和NOX4蛋白表达的影响;试剂盒微量法检测大鼠肾组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)和烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸/还原型辅酶II(NADP+/NADPH)水平的变GNE-140说明书化;ELISA法检测女贞子-淫羊藿药对对大鼠肾组织中白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平的影响。结果 相较于对照组,顺铂导致大鼠体重和肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著性降低(P <0.05),肾脏器指数、血清血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(creatinine,CREA)、尿酸(uric acid,UA)、肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-1β、IL-6水平显著性升高(P <0.05),HE染色显微镜下显示肾小管上皮细胞坏死脱落,管腔变形空泡化,KIM-combined immunodeficiency1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显增加(P <0.05);相比于模型组,女贞子-淫羊藿药对干预使肾组织SOD、CAT、GSH和TNF-α水平显著升高(P <0.05),肾脏器指数、血清BUN、UA和肾组织MDA、NADP+/NADPH、IL-6水平显著下降(P <0.05),肾Crizotinib配制组织HE染色显示损伤减轻且KIM-1和NOX4阳性信号和蛋白表达均明显降低(P <0.05)。结论 女贞子-淫羊藿药对通过抑制肾组织中KIM-1的表达,激活抗氧化酶的活性和抑制炎症因子的释放,发挥了对顺铂肾毒性的保护作用。
幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞m~6A甲基化水平及相关酶表达的影响
目的 研究幽门螺杆菌(Hp)感染胃上皮细胞中N6-甲基腺苷(m~6A)修饰水平及相关酶FTO、METTL3和YTHDF2的表达变化,并使用在线网站分析其在胃癌中的表达和临床意义。方法 Hp GZ7菌株感染正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞AGS,感染复数为30∶1,24 h后收集细胞总RNA和总蛋白,斑点杂交实验检测细胞总RNA的m~6A修饰水平,q-PCR和Western blot检测FGenetic-algorithm (GA)TO、METTL3和YTHDF2的mRNA和蛋白表达。GEPIA网站分析FTO、METTL3和YTHDF2在胃癌组织和正常组织中的表达差异及其在Stage分期中表达,Kaplan-Meier Plotter分析FTO、METTL3和YTHDF2表达与预后的关系。结果 与未感染组比较,Hp感染GES-MK-4827说明书1和AGS细胞中总RNA m~6A修饰水平均明显降低,FTO的mRNA和蛋白表达水平增加,METTL3和YTHDF2的mRNA和蛋白水平降低,差异有统计学意GDC-0973研究购买义(P<0.05)。胃癌组织中FTO表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05),YTHDF2表达水平高于正常组织,METTL3表达水平低于正常组织,差异无统计学意义。FTO和METTL3表达较高的胃癌患者有较低的生存率,而YTHDF2高表达患者有较高的生存率。FTO表达与患者的Stage分期显著相关(P<0.05),而METTL3与YTHDF2表达与Stage分期无显著相关性。结论 Hp感染可引起细胞m~6A水平及相关酶FTO、METTL3和YTHDF2表达改变,提示m~6A甲基化可能在Hp诱导胃癌发生发展中发挥作用。
1-硝基芘通过线粒体损伤致卵巢颗粒细胞功能障碍
目的 探讨1-硝基芘(1-nitropyrene, 1-NP)通过诱导线粒体损伤对人卵巢颗GDC-0068作用粒细胞KGN的增殖、周期进展及性激素合成的影响。方法 采用不同浓度(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)1-NP染毒KGN细胞48 h, EdU掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,ELISA检测细胞培养上清中雌二醇及孕烯醇酮浓度,DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平,Mihttps://www.selleck.cn/products/blebbistatin.htmltoSOX探针检测线粒体超氧化物(mitochondrial superoxides, MitoSOX)水平,JC-1探针检测线粒体膜电位,ATP试剂盒检测细胞内ATP含量,Westernbiological half-life blot检测细胞增殖、周期进展、DNA损伤反应以及性激素合成相关蛋白的表达。采用线粒体抗氧化剂IDE、1-NP单独和联合处理细胞,再次检测上述指标。结果 不同浓度1-NP染毒后KGN细胞增殖显著降低(P<0.05)。2.5、5、10μmol/L的1-NP处理细胞后,细胞增殖标志物PCNA蛋白表达显著降低,5、10μmol/L的1-NP处理后G_2/M期细胞比例显著升高(P<0.05)。1-NP(10μmol/L)处理3 h即可诱导γ-H2AX表达增加(P<0.01);不同浓度1-NP处理后,DNA损伤反应通路蛋白p-ATM、p53和p21~(cip1)表达明显升高(P<0.05),G_2/M期阻滞相关蛋白CDK-1和CyclinB1表达明显降低(P<0.05)。此外,1-NP处理后KGN细胞的雌二醇、孕烯醇酮浓度显著下降(P<0.05),性激素合成相关蛋白CYP19、CYP11A1的表达也受到抑制(P<0.05)。线粒体及氧化应激相关指标检测结果显示,1-NP导致KGN细胞中ROS、MitoSOX水平显著升高,线粒体膜电位和ATP水平呈剂量依赖性下降。与10μmol/L 1-NP单独染毒组相比,IDE与1-NP联合处理组G_2/M期细胞比例显著下降,雌二醇、孕烯醇酮水平出现一定程度升高,DNA损伤反应、细胞周期进展以及性激素合成相关蛋白的表达也出现明显恢复。同时,IDE与1-NP联合处理显著改善1-NP诱导的线粒体损伤,包括降低细胞ROS和MitoSOX水平,提高线粒体膜电位和ATP水平。结论 1-NP可诱导线粒体损伤,造成卵巢颗粒细胞KGN的增殖抑制、周期阻滞、性激素合成障碍,而提高线粒体功能则能部分缓解1-NP诱导的KGN细胞功能障碍。
血清沉默信息调节因子2相关酶1、血管紧张素转换酶2水平与脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征的相关性
目的 探讨血清沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、血管紧张素转换酶2(ACE2)水平与脓毒症相关急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的相关性。方法 选取2020年1月至2023年1月西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院收治的1购买Dinaciclib48例脓毒症患者为观察组,根据是否合并ARDS将观察组患者分为ARDS组(合并ARDS,98例)和非ARDS组(未合并ARDS,50例),另选取西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院同期进行体检的50例健康志Obesity surgical site infections愿者为对照组。比较分析对照组与观察组患者的血清SIRT1、ACE2水平。采用单因素分析和多因素logistic回归分析探讨脓毒症相关ARDS发生的影响因素。结果 观察组患者的血清SIRT1、ACE2水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素分析结果显示,ARDS组患者的年龄大于非ARDS组,脓毒症休克比例、机械通气比例、序贯器官衰竭评估评分、血乳酸水平高于非ARDS组,入住重症监护室时间长于非ARDS组,SIRT1、ACE2水平低于非ARDS组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,脓毒症休克、入住重症监护室时间延长、序贯器官衰竭评估评分和血乳酸升高为脓毒症相关ARDS发生的独立危险因素,SIRT1、ACE2升高为脓毒症相关ARDS发生的独立保护IACS-10759因素(P<0.05)。结论 脓毒症患者的血清SIRT1、ACE2水平降低与脓毒症相关ARDS的发生显著相关。