目的 观察野黄芩苷(Scu)对人结肠癌细胞迁移和侵袭的影响及相关作用机制。方法 采用CCK8法检测40、80、120、160、200、240、280μmol·L~(-1) Scu对人结肠癌SW480和HCT116细胞以及人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞活力的影响,计算IC_(50)值。采用细胞划痕实验、Transwell细胞迁移和ABT-263 IC50小室侵袭实验检测Scu对SW480和HCT116细胞迁移和侵袭的影响,Westernblot法检测50、100、150μmol·L~(-1)Scu对SW480细胞迁移、侵袭、上皮-间质转化(EMT)和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达的影响。结果 120、160、200、240、280μmol·L~(-1)Scu显著抑制SW480和HCT116细胞的活力,作用24h后的IC_(50)值分别为157.7和179.2μmol·L~(-1)。与空白组比较,50、100、150μmol·L~(-1)Scu组SW480和HCT116细胞划痕宽度均增大,迁移细胞数和侵袭细胞数减少(P<0.05),基质金属蛋白酶(MMP)-9、MMP-2、N-钙黏合素(cadherin)、波形蛋白(vimentin)和snail蛋白表达显著降低(Neurally mediated hypotensionP<0.05),E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.01),β-catenin、c-myc、周期蛋白(cyclin)D1和存活蛋白(survivin)表达显GDC-0973细胞培养著降低(P<0.05)。结论 Scu可抑制结肠癌细胞活力、迁移、侵袭和EMT进程,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
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gga-miR-155对MDCC-MSB1细胞转录组的影响
旨在探讨gga-miR-155对马立克病病毒转化的肿瘤细胞系MDSymbiont interactionCC-MSB1细胞转录组水平变化的影响。本研究以MDCC-MSB1细胞为研究对象,首先将gga-miR-155模拟物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞,在转染后48 h提取总RNA,用安捷伦2100核酸检测仪分析各组细胞总RNA的完整性,采用RT-qPCR分析gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞中的过表达情况;然后利用高通量测序技术,分析gga-miR-155过表达后MDCC-MSB1细胞转录水平的变化,筛选差异表达基因,结合生物信息学分析预测差异表达基因中gga-miR-155靶mRNA。结果显示:制备了gga-miR-155在MDCC-MSB1细胞过表达样本并构建了高通量测序文库;与对照组相比,gga-miR-15确认细节5过表达组的差异表达基因有87个,其中上调表达的基AM-2282因有47个,下调表达的基因有40个;GO与KEGG分析显示,这些差异表达基因显著富集于代谢和蛋白结合过程/信号通路;通过Targetscan和miRada软件预测下调表达基因中鸡BACH1为gga-miR-155的靶mRNA(P <0.05)。结论:过表达gga-miR-155可调控MDCC-MSB1细胞的转录组水平,差异表达基因中BACH1基因可能在gga-miR-155的作用下参与了MDCC-MSB1细胞的代谢过程。
原发性高血压患者血清Lp-PLA2、STIM1水平与左心室肥厚的关系
目的 分析原发性高血压(EH)患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、基质相互作用分子1(STIM1)水平与左心室肥厚(LVH)的关系。方法 选取2021年1月—2022年1月甘肃省庆阳市人民医院心内科收治的EH患者205例为研究对象,根据是否合并LVH分为LVH组68例和非LVH组137例。比较2组患者血清Lp-PLA2、STIM1水平、左心室肥厚指标,分析血清Lp-PMC3抑制剂LA2、STIM1水平与左心室肥厚的相关性,多因素Logistic回归分析EH患者发生LVH的影响因素,ROC分析血清Lp-PLA2、STIM1水平对EH患者发生LVH的预测价值。结果 LVH组血清Lp-Biopurification systemPLA2、STIM1水平和左心室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室质量指数(LVMI)高于非LVH组[t(Z)/P=5.405/<0.001、7.182/<0.001、4.727/<0.001、2.774/0.006、2.905/0.004、11.098/<0.001]。LVH组血清Lp-PLA2、STIM1水平与LVPWTwww.selleck.cn/products/byl719、IVST、LVEDD、LVMI呈正相关(Lp-PLA2:r/P=0.401/0.015、0.325/0.032、0.362/0.029、0.710/<0.001;STIM1:r/P=0.417/0.021、0.306/0.022、0.317/0.035、0.619/<0.001)。EH病程长、收缩压高、舒张压高、有糖尿病、Hcy高、Lp-PLA2高、STIM1高为EH患者发生LVH的独立危险因素[OR(95%CI)=1.316(1.131~1.531)、 1.150(1.030~1.285)、1.288 (1.083~1.531)、2.105(1.150~3.854)、1.179 (1.031~1.347)、1.027 (1.014~1.041)、1.021 (1.021~1.030)]。血清Lp-PLA2、STIM1及二者联合预测EH患者发生LVH的曲线下面积(AUC)分别为0.732、0.772、0.840,二者联合预测的AUC大于单独预测(Z=3.583、2.714,P=0.000、0.007)。结论 血清Lp-PLA2、STIM1水平升高是EH患者发生LVH的独立危险因素,可作为LVH的预测指标。
泪腺腺样囊性癌中基质金属蛋白酶-2;9的表达及其意义
目的探讨泪腺腺样囊性癌(ACC)组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9的表达与泪腺ACC生物学行为之间的相关性。方法实验研究。1991年1月至2011年6月天津医科大学第二医院眼科病理室共保存泪腺ACC手术标本60例,男性25例,女性35例,年龄29~62岁,中位年龄38岁。其中腺样-管状型36例,实体型24例。初发瘤45例,复发瘤(二次或多次复发)15例。另外选择同期行手术切除的10例多形性腺瘤患者的瘤旁正常泪腺组织作为对照组。应用免疫组织化学SP法检测各组织中CD105、MMP-2及MMP-9的表达情况。采用CD105免疫组织化学染色标记微血管内皮,计数肿瘤微血管密度(MVD)。分别采用方差分析、χ~2检验和Spearman等级相关性检验对研究数据进行分析。结果泪腺ACC组织中MVD值[(17.71±5.63)个/100倍视野SCH772984]、MMP-2(45.0%,27/60)、MMP-9(55.0%,33/60)阳性表达率均明显高于正常对照组[MVD值为(0.70±0.95)个/100倍视野,MMP-2及MMP-9无Whole Genome Sequencing阳性表达](t′=2.039,P<0.05;χ~2=5.550,P<0.05;χ~2=8.315,P<0.01)。实体型肿瘤的MVD值[(26.12±5.32)个/100倍视野]、MMP-2(62.5%,15/24)、MMP-9(79.2%,19/24)阳性表达率均明显高于筛管型肿瘤(t′=2.060,χ~2=4.950,χ~2=9.439,P值均<0.05),复发瘤均明显高于初发瘤(t′=2.129,χ~2=9.899,χ~2=8.103;P值均<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,MVD值与MMP-2、MMP-9阳性表达率均有相关性(r_s=0.636、0.524,P值均<0.05)。结论 MVD值及MMP-2、MMP-9在泪腺ACC组织中的阳性GSI-IX核磁表达率较高,且与病理类型及复发相关。检测MVD值及MMP-2、MMP-9的表达情况对于判断泪腺ACC恶性程度、复发与转移行为有指导意义。
民航飞行员高血压疾病调查分析及其预防措施研究
目的:调查分析民航飞行员高血压患病情况及危险因素,并提出预防措施。方法:选择2019年1月至2021年1月中国南chondrogenic differentiation media方航空股份有限公司的2255例飞行员作为调查对象,根据每年度的个人飞行体检合格证体检鉴定数据进行采集分析。统计高血压发病率,对比高血压与非高血压组患者的调查结果,分析高血压的危险因素。结果:2255例飞行员中,检出高血压106例,患病率为4.70%;高血压组婚姻状况、饮酒、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、肌酐、总胆红素和糖化血红蛋白与非高血压组比较,无明显差异(P>0.05);高血压组年龄、高血压家族史、体重指数、吸烟、体育锻炼、飞行时间、常长距离飞行、Laduviglusib供应商总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇CH-223191配制(LDL-C)和空腹血糖(FBG)与非高血压组比较,有明显差异(P<0.05);飞行员高血压多因素Logistic回归分析结果显示,年龄≥40岁、有高血压家族史、肥胖、吸烟、飞行时间>1000 h、缺乏体育锻炼、TC、LDL-C和FPG水平升高是飞行员高血压的危险因素。结论:高血压在民航飞行员中有一定发病率,年龄、血脂、飞行时间和距离等是高血压的危险因素,对具备高血压危险因素的飞行员进行早期干预,减少高血压发生。
岩藻多糖对断奶羔羊小肠组织形态、消化酶活性和抗氧化指标的影响
本试验旨在探讨代乳粉添加岩藻多糖对断奶羔羊小肠通透性、组织形态、消化酶活性及抗氧化指标的影响。选择24只平均体重为(7.32±0.37) kg的30日龄健康川中黑山羊公羔,随机分为4个组,每组6个重复,每个重复1只羊。Ⅰ组(对照组)饲喂不含岩antiseizure medications藻多糖的代乳粉,Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组分别在代乳粉中添加0.1%、0.3%和0.6%的岩藻多糖。试验预试期7 d,正试期30 d。结果表Epigenetics抑制剂明:1)Ⅲ组和Ⅳ组羔羊血清二胺氧化酶活性和D-乳酸含量显著低于Ⅰ组(P<0.05);各组间血清内毒素含量差异不显著(P>0.05)。2)Ⅲ组羔羊小肠各肠段绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度(V/C)以及肌层和黏膜厚度显著高于Ⅰ组(P<0.05);各组小肠隐窝深度之间无显著差异(P>0.05)。3)Ⅲ组和Ⅳ组羔羊空肠α-淀粉酶和乳糖酶活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);各组间空肠脂肪酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶活性差异不显著(P>0.05)。4)随着代乳粉中岩藻多糖添加水平的提高,羔羊小肠抗氧化酶活性呈先升后降趋势,小肠丙二醛(MDA)含量则呈先降后升趋势。Ⅲ组和Ⅳ组羔羊十二指肠、空肠总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅱ组空肠T-AOC、CAT活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);Ⅲ组十二指肠、空肠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及Ⅲ组和Ⅳ组空肠超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于Ⅰ组(P<0.05);岩藻多糖添加组小肠各肠段(Ⅱ组回肠除外) MDA含量显著低于Ⅰ组(P<0.05)。综上所述,代乳粉中添加岩藻多糖能有效降低断奶羔羊血清D-乳酸含量和二胺氧化酶活性,提高小肠黏膜GSK2118436厚度、肌层厚度、绒毛高度及V/C,并提高空肠α-淀粉酶和乳糖酶活性以及小肠抗氧化能力,改善小肠肠道屏障结构与功能,从而在一定程度上提高断奶羔羊的肠道健康;在本试验条件下,代乳粉中岩藻多糖的适宜添加水平为0.3%。
冷自体血心脏停搏液对婴幼儿未成熟心肌超氧化物歧化酶、基质金属蛋白酶2的影响
目的对比研究冷自体血心脏停搏液与HTK液(康斯特停搏液)在婴幼儿体外循环室间隔缺损修补术冠状静脉窦回流血中超氧化物歧化酶(SOD)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的浓度变化,揭示其对未成熟心肌的保护作用。方法≤1岁行室间隔缺损修补术患儿60例,随机分为A组与B组,各30例。A组于体外循环前经主动脉根部抽取血液配制K+浓度为20 mmol/L的4℃自体血心脏停搏液。A组BMS-354825应用冷自体血心脏停搏液、B组应用HTK液。分别于主动脉阻断前即刻、主动脉开放后第1分钟及第15分钟抽取冠状静脉窦回流血,ELISA法检测SOD、MMP-2浓度,进行统计学处理。结果 SOD、MMP-2两个指标在组内、组间及交互差异均有统计学意义(P均<0.05),A组和B组两个指标均在主动脉开放后升高。主动脉阻断前,A组和B组间SOD和MMP-2浓度差异均无统计学意义[两组分别为:SOD:(85.37±16.82)mU/L与(91.51±15.02)mU/L,P>0.05;MMP-2:(362.29±29.52)μg/L与(372.32±31.42)μg/L,P>0.05];主动脉开放后1min,A组和B组间的SOD和MMP-2浓度差异均有统计学意义[两组分别为:SOD:(106.97±17.46)mU/L与(98.74±12.54)mU/L,(P<0.05);MMP-2:(439.48±51.62)μg/L与(465.49±48.83)μg/L,P<0.05];主动脉开放后15 min,A组和B组间的SODhost-derived immunostimulant和MMP-2浓度差异均有统计学意义[两组分别为:SOD:(104.03±12.63)mU/L与(97.94±10.87)mU/L,www.selleck.cn/products/diabzi-sting-agonist-compound-3P<0.05;MMP-2:(390.16±45.63)μg/L与(425.21±48.24)μg/L,P<0.05]。A组较B组心率失常发生率低(χ~2=8.223,P<0.05),正性肌力药物倚赖程度低(χ~2=4.022,P<0.05)。结论冷自体血心脏停搏液可促进未成熟心肌SOD的释放、减少MMP-2的产生,更具有保护作用。
血清miR-92a和miR-155-5p表达对老年高血压合并脑梗死诊断与预后的影响
目的 观察血清miR-92a和miR-155-5p表达对老年高血压合并脑梗死诊断和预后的影响。方法 选择2017年1月至2018年12月诊断为高血压合并急性脑梗死患者105例为高血压合并脑梗死组;选择同期诊断为原发性高血压患者89例和健康体检者45例,为高血压组和健康对照selleck Talazoparib组。采用定量RT-PCR方法测定3组血清miR-92a和miR-155-5p表达。观察高血压合并脑梗死组、高血压组和健康对照组血清miR-92a和miR-155-5p表达变化,对高血压合并脑梗死影响预后因素进行单因素和多因素分析,观察血清miR-92a和miR-155-5p表达在高血压合并脑梗死诊断和预测预后的灵敏度和特异性。结果 高血压合并脑梗死组患者血清miR-92a表达水平明显高于高血压组和健康对照组(P<0.01),而高血压组明显高于健康对照组(P<0.01);miR-155-5p表达水平明显低于高血压组和健康对照组(P<0.01),而高血压组低于健康对照组(P<0.01)。高血压合并脑梗死患者随访3个月后,41例患者评分为预后不良,64例患者为预后良好。单因素分析发现,性别、年龄、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、冠心病史、心房颤动史、HDL-C、LDL-C、三酰甘油、总胆固醇、空腹血糖、血肌酐、NIHSS评分和梗死部位与高血压合并脑梗死预后差异无统计学意义(P>0.05),而收缩压、舒张压、D-二聚体、病灶直径、miR-92a和miR-155-5p与高血压合并脑梗死患者的预后呈密切相关(P<0.05)。多因素分析发现收缩压、病灶直径、miR-92a和miR-155-5p是高血压合并脑梗死预后的独立预后因素(P<0.05)。血清miR-92a和miR-155-5p表达在高血压合并脑梗死的诊断和预测预后具有较高诊断效能,联合检测曲线下面medial gastrocnemius积明显高于单独miR-92a和miR-155-5p的检测(P<0.05)。结论 在高血压合并脑梗死患者中,血清miR-92a表达出现明显升高,而miR-155-5p表达出现明显降低,是高血压合并脑梗死独立预后因素,联合检测在高血压合并脑梗死的诊断和预测预后方面具有较高的效Docetaxel molecular weight能。
新型冠状病毒PLpro抑制天然免疫的机制研究
新型冠状病毒(Severe acute rSCH727965分子式espiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)是冠状病毒科β冠状病毒属成员,属单股正链RNA病毒,基因组大小为29.9kb,是新型冠状病毒肺炎(Corona virus disease 2019,COVID-19)的病原体。SARS-CoV-2基因组编码28种蛋白质,其中包括4种结构蛋白(刺突蛋白S、包膜蛋白M、膜蛋白N和核衣壳蛋白E),16种非结构蛋白(Nonstructural protein,NSP1-NSP16)和8种辅助蛋白(ORF3a,ORF3b,ORF6,ORF7a,ORF7b,ORF8,ORF9b,ORF14)。COVID-19病死率仅为2.1%,但与2003年流行的SARS相比较,其传播能力更强。SARS-CoV-2的威胁迫在眉睫,其发病机制研究尚存在诸多空白。病毒在进化过程中会有一系列对抗宿主先天免疫反应的策略,利用宿主蛋白对自身进行加工包装以避免被宿主的免疫系统识别清除。木瓜样蛋白酶(Papain-like protease,PLpro)是SARS-CoV-2 NSP3编码的一种半胱氨酸蛋白酶,是病毒复制过程中必须的蛋白水解酶,完成SARS-CoV-2复制所需的NSP1、NSP2和NSP3的释放。先前研究表明,SARS-CoV-2能够通过NSP1、NSP6、NSP12和NSP13等蛋白抑制天然免疫反应,且SARS-CoV中PLpro也能发挥相同的抑制作用,但SARS-CoV-2 PLpro的作用机制不清楚。为阐明SARS-CoV-2PLpro在宿主I型干扰素应答(包括I型干扰素的产生及I型干扰素的信号转导)中的作用,并解析其作用的分子机制,本研究首先将SARS-CoV-2编码的PLpro克隆至真核表达载体pc DNA3.1中,转染HEK-293T细胞,经Western blot检测验证其表达。通过双荧光素酶报告基因检测发现SARS-CoV-2 PLpro能够抑制Poly(I:C)和Se V诱导的IFN-β启动子活性,并且呈剂量依赖性。q RT-PCR检测发现SARS-CoV-2 PLpro能抑制IFN-β等抗病毒因子的表达,ELISA检测结果也表明PLpro可以抑制Se V诱导的A549细胞上清液中IFN-β分泌,提示SARS-CoV-2 PLpro具有抑制I型干扰素分泌的作用。为进一步探究SARS-CoV-2 PLpro干预天然免疫的机制,通过双荧光素酶报告基因和Western blot检测确定PLpro抑制天然免疫信号的作用靶点,Eus-guided biopsy发现PLpro可以促进内源性和外源性MDA5的降解,同时可以抑制IRF3的磷酸化。为探究PLpro表达对MDA5蛋白降解的影响,采用自噬抑制剂或泛素蛋白酶体降解抑制剂后发现,抑制自噬后,PLpro对MDA5的Erdafitinib小鼠降解无显著影响,而使用蛋白酶体抑制剂后,MDA5的表达重新恢复。进而我们检测PLpro对MDA5的K48泛素化水平的影响,结果显示PLpro促进了MDA5的K48泛素化降解。提示PLpro通过泛素化蛋白酶体途径降解MDA5,抑制MDA5对病毒RNA的识别,实现病毒免疫逃逸。同时,使用蛋白酶体降解抑制剂MG132能够提高感染SARSCoV-2细胞的存活率。最后,在探究SARS-CoV-2 PLpro对I型干扰素下游信号转导的影响,我们使用IFN-α激活下游通路,发现SARS-CoV-2 PLpro能够通过抑制STAT1和STAT2的磷酸化来抑制下游信号的转导。综上所述,本研究证明了SARS-CoV-2编码的PLpro能够抑制IRF3磷酸化和促进MDA5泛素化降解抑制IFN-β产生;抑制STAT1和STAT2的磷酸化阻止Ⅰ型干扰素下游信号转导。这些发现进一步加深了对SARS-CoV-2免疫逃逸机制的理解,为了解SARS-CoV-2致病机理提供了理论基础。
南通市妊娠期糖尿病临床特点及对妊娠结局的影响
目的 分析南通市妊娠期糖尿病临床特点及及对妊娠结局的影响。方法 随机选取2018年6月至2020年6月来的南通市妊娠期糖尿病孕妇352例,根据FPG水平和OGTT将所有孕妇分为轻度组(FPG<5.1 mmol/L,n=185)、中度组(FPG为5.1~6.0 mmol/L,n=104)和重度组(FPG≥6.1mmol/L,n=63),对比3组Mangrove biosphere reserve血糖水平、胰岛功能指标水平、血脂水平、妊娠结局情况及围生儿结局情况。结果 重度组FBG、HbA1c和HOMA-β水平显著高于轻度组和中度组(P<0.05);重度组HOMA-IR水平显著低于轻度组和中Z-IETD-FMK半抑制浓度度组(P<0.05);中度组FBG、HbA1c和HOMA-β水平显著高于轻度组(P<0.05);中度组HOMA-IR水平显著低于轻度组(P<0.05);重度组TC和LDL-C水平显著高于轻度组和中度组(P<0.05);重度组HDL-C水平显著低于轻度组和中度组(P<0.05);中度组TC和LDL-C水平显著高于轻度组(P<0.05);中度组LDL-C水平显著低于轻度组(P<0.05);确认细节重度组剖宫产、胎膜早破、产后感染、羊水过多、产后出血发生率显著高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组剖宫产、胎膜早破、羊水过多、产后出血发生率显著高于轻度组(P<0.05);重度组新生儿低血糖、巨大儿、早产儿、新生儿窒息发生率显著高于轻度组和中度组(P<0.05);中度组新生儿低血糖、巨大儿、早产儿、新生儿窒息发生率显著高于轻度组(P<0.05)。结论 南通市妊娠期糖尿病孕妇血脂随着血糖升高而增加,血糖升高对妊娠结局具有明显影响,会导致剖宫产率、不良妊娠结局和围生儿结局发生风险增加。