新型冠状病毒核蛋白N端结构域的表达纯化以及晶体优化

本研究通过原核表达方法,探索新型冠状病毒核蛋白N端结New Rural Cooperative Medical Scheme构域的表达纯化,同时优化其蛋白晶体的生长条件,为新型冠状病毒核蛋白的结构生物研究提供基础。本研究合成N蛋白N端结构域基因序列,构建原核系统表达载体,利用大肠杆菌表达重组目的蛋白。Ni2+亲和层析和凝胶过滤层析的方法对N蛋白N端结构域重组蛋白进行纯化,SDS-PAGE电泳鉴定重组蛋白的纯度。本研究成功构建原核重组载体pET28b-N-N,大肠杆菌在37℃下进行扩增生长,16℃下进行诱导表达,80%目的蛋白以可溶蛋白的形式表达。Nselleckchem MLN8237i2+亲和纯化和凝胶过滤层析后,Quantity One软件进行蛋白胶积分分析,获得纯化后的积分占比,获得目的蛋白的纯度高达90%以上,利用Hampton的蛋白晶体试剂盒进行蛋白质晶体筛选,获得质量较高的N蛋白N端结构域蛋白质晶体。凝胶迁移试验(EMSA)验LY2835219核磁证了N蛋白N端结构域具有结合特定RNA片段的作用,明确了N蛋白N端结构域稳定新型冠状病毒基因组的功能。为进一步解析N蛋白N端结构域的三维结构以及后续抗体开发提供研究基础。

FAM83H-AS1靶向miR-4684-5p对胰腺癌细胞放射敏感性的影响

目的 探讨FAM83H-AS1对胰腺癌PANC-1细胞放射敏感性的影响。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析胰腺癌组织、癌旁组织、PANC-1细胞、HPDE细胞中FAM83H-AS1和mi R-4684-5p的差异表达。上调pc DNAFAM83H-AS1表达后,采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞技术和Western blot分析细胞凋亡率和Bax、Bcl-2蛋白表达水平。mi Rnada和双荧光素酶报LY-188011研究购买告基因实验检测FAM83H-AS1与mi R-4684-5p的关系。分析上调mi RBelumosudil半抑制浓度-4684-5p或同时上调FAM83H-AS1与mi R-4684-5p表达对PANC-1细胞活力、细胞凋亡率和Bax、Bcl-2蛋白表达水平的影响。结果 与癌旁组织相比,胰腺癌组织FAM83H-AS1表达升高(P <0.01),mi R-4684-5p表达降低(P <0.01);与HPDE细胞相比,PANC-1细胞FAM83H-AS1表达升高(P <0.01),mi R-4684-5p表达降低(P <0.01); FAM83H-AS1的表达水平随X射线照射剂量增加而降低(P <0.05),mi R-4684-5p的表达水平随X射线照射剂量增加而升高(P <0.05)。上调FAM83H-AS1可增强PANC-1细胞活力(P <0.05),降低细胞凋亡率(P <0.05)。FAM83H-AS1和mi R-4684-5p具有靶向和负调控关系。上调mi R-4684-5p表达可降Proliferation and Cytotoxicity低PANC-1细胞活力(P <0.05),增加细胞凋亡率(P <0.05)。干扰FAM83H-AS1表达可通过mi R-4684-5p上调PANC-1细胞的放射敏感性(P <0.05)。结论FAM83H-AS1在胰腺癌PANC-1细胞中高表达,且靶向mi R-4684-5p可减弱胰腺癌细胞的放射敏感性。

乳腺癌腋窝淋巴结转移的影响因素分析

目的 探讨与乳腺浸润性癌腋窝淋巴结转移相关的临床病理特征,为术前预测乳腺癌腋窝淋巴结转移提供参考因素。方法 回顾性分析2019年12月HIV-infected adolescents至2021年3月大连市妇女儿童医疗中心(集团)体育新城院区收治的70例乳腺癌患者的临床资料,收集患者年龄、肿瘤大小、病理分型、分子分型、病理分级、原发肿瘤灶数、微乳头结构及脉管浸润与否的信息。通过多因素分析影响腋窝淋巴结转移的危险因素。结果 70例乳腺癌患者中,发生GW4869配制腋窝淋巴结转移29例,未转移41例。转移组与未转移组的肿瘤大小及脉管浸润与否比较,差异有统计学意义(P<0.05),而两组的年龄、病理分型、分子分型、病理分级、原发肿瘤灶数及是否伴有微乳头结构比较,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析结果显示,肿瘤大小≥3.5 cm(β=1.829,OR=6.226,P=0.021,95%CI=1.315~点击此处29.490)及脉管浸润(β=2.578,OR=13.171,P<0.001,95%CI=3.861~44.937)是影响腋窝淋巴结转移的独立危险因素。结论 肿瘤大小(≥3.5 cm)及脉管浸润是乳腺癌腋窝淋巴结转移的独立危险因素。临床可针对危险因素实现乳腺癌患者的精准化治疗。

神经母细胞瘤裸鼠原位荷瘤细胞系与转移瘤细胞系生物学异质性分析

目的利用本实验室建立的神经母细胞瘤体外细胞系,建立神MK-1775体内经母细胞瘤荷瘤鼠原位荷瘤与转移瘤模型,并用原位荷瘤及转移瘤分别建立细胞系,比较原位荷瘤及转移瘤的差异,从而验genetic model证神经母细胞瘤的肿瘤异质性。方法利用本实验室建立的神经母细胞瘤细胞系,制备单细胞悬液,通过Typlan细胞计数法,调整细胞浓度为1~9×10~7/mL。接种于裸鼠皮下,建立荷瘤鼠原位荷瘤与转移瘤模型,并用原位荷瘤及转移瘤分别建立细胞系,通过细胞生长的测定、软琼脂克隆形成以及免疫组织化学检测和裸鼠成瘤实验等方法,比较两种细胞系的差异。结果在原位Tezacaftor生产商荷瘤及转移瘤细胞株中,转移瘤细胞株在增殖能力、克隆形成能力及肿瘤细胞成瘤能力方面均明显高于原位荷瘤细胞株。结论裸鼠原位荷瘤及转移瘤两株细胞具有明显差异,证明神经母细胞瘤肿瘤具有异质性,这种异质性可能是神经母细胞瘤转移的重要原因。

同步放化疗和放疗序贯化疗治疗非小细胞肺癌骨转移的临床疗效和安全性

目的 探讨同步放化疗和放疗序贯化疗治疗非小细胞肺癌骨转移的临床疗效和安全性。方法 选取2018年9月至2019年9月本院点击此处收治的80例非小细胞肺癌骨转移患者作为研究对象,按照随机抽签法分为对照组与观察组,每组40例,对照组采用放疗序贯化疗治疗,观察组采用同步放化疗治疗,比较两组近期疗效、不良反应发生率及生存质量。结果 观察selleck合成组治疗总有效率为62.50%,高于对照组的37.50%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应发生率为27.50%,对照组不良反应发生率为35.00%,两组比较差异无统计学意义。治疗后,观察组生理功能、心理功能、社会功能、身体机能评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 同步化疗方法治疗非小细胞肺癌骨转移患者的近期疗效更佳,两种化疗方式的药物安全性相当,同步放化疗治疗方式Prebiotic activity在提高患者生存质量方面效果显著,值得临床推广应用。

非高发区人群中血浆EB病毒DNA对鼻咽癌的筛查及临床应用价值

目的探讨非高发区人群血浆EB病毒(EBV)DNA检测对鼻咽癌筛查的价值及临床应用。方法回顾性分析2015年11月至2020年7月就诊于四川省肿瘤医院的1 153例初GDC-0973浓度治鼻咽癌和244例性别年龄相匹配的健康正常人血浆EBV DNA检测结果。用实时荧光定量PCR法检测EBV DNA。分别以400拷贝/ml为临界值判断(≥400拷贝/ml判定为阳性)和优化临界值方法(将有S型扩增者均判定为阳性)统计EBV DNA阳Terpenoid biosynthesis性率。比较不同临床分期、TNM分期的患者血浆中Dinaciclib体外EBV DNA拷贝数分布特征, 采用受试者工作特征(ROC)曲线分析2种临界值判定方法对鼻咽癌的诊断价值。结果初治鼻咽癌组血浆EBV DNA明显高于正常对照组(P0.001);鼻咽癌不同TNM分期患者血浆EBV DNA水平比较, 差异有统计学意义(P0.001)。2种临界值判定方法均显示, TNM及临床分期越晚, EBV DNA阳性率有升高趋势(P均0.001)。以400拷贝/ml作为临界值, 血浆EBV DNA对鼻咽癌诊断的敏感度为40.9%, 特异度为100%, 曲线下面积为0.704(95%CI 0.676~0.733, P0.001)。使用优化临界值方法, 敏感度增加至82.0%, 特异度为99.2%, 曲线下面积为0.910(95%CI 0.894~0.924, P0.001)。结论在鼻咽癌非高发区, 血浆EBV DNA以400拷贝/ml为检出下限, 鼻咽癌诊断的敏感度仅为40.9%, 可考虑优化核酸提取方法, 从检测技术上落实临界值的优化, 在保证诊断特异度的基础上提高诊断的敏感度。

非高发区人群中血浆EB病毒DNA对鼻咽癌的筛查及临床应用价值

目的探讨非高发区人群血浆EB病毒(EBV)DNA检测对鼻咽癌筛查的价值及临床应用。方法回顾性分析2015年11月至2020年7月就诊于四川省肿瘤医院的1 153例初GDC-0973浓度治鼻咽癌和244例性别年龄相匹配的健康正常人血浆EBV DNA检测结果。用实时荧光定量PCR法检测EBV DNA。分别以400拷贝/ml为临界值判断(≥400拷贝/ml判定为阳性)和优化临界值方法(将有S型扩增者均判定为阳性)统计EBV DNA阳Terpenoid biosynthesis性率。比较不同临床分期、TNM分期的患者血浆中Dinaciclib体外EBV DNA拷贝数分布特征, 采用受试者工作特征(ROC)曲线分析2种临界值判定方法对鼻咽癌的诊断价值。结果初治鼻咽癌组血浆EBV DNA明显高于正常对照组(P0.001);鼻咽癌不同TNM分期患者血浆EBV DNA水平比较, 差异有统计学意义(P0.001)。2种临界值判定方法均显示, TNM及临床分期越晚, EBV DNA阳性率有升高趋势(P均0.001)。以400拷贝/ml作为临界值, 血浆EBV DNA对鼻咽癌诊断的敏感度为40.9%, 特异度为100%, 曲线下面积为0.704(95%CI 0.676~0.733, P0.001)。使用优化临界值方法, 敏感度增加至82.0%, 特异度为99.2%, 曲线下面积为0.910(95%CI 0.894~0.924, P0.001)。结论在鼻咽癌非高发区, 血浆EBV DNA以400拷贝/ml为检出下限, 鼻咽癌诊断的敏感度仅为40.9%, 可考虑优化核酸提取方法, 从检测技术上落实临界值的优化, 在保证诊断特异度的基础上提高诊断的敏感度。

臂间血压差异与动态血压监测时的检测臂选择

<正>我国年龄≥18岁人群高血压患病率为23.2%,患病总人数约2.445亿~([1])。准确的血压测量是诊断高血压和合理治疗高血压的第一步。如今,动态血压监测(ambulatory blood pressure monitoring,ABPM)在临床上广泛应用,但ABPM时检测臂的选择对于监测结果的准确性来说十分重要。1 ABPM对于新发现的1~2级诊室高血压患者,应进行ABPM,selleck HPLC以排除白大衣性高血压,明确高血压诊断~([2-3])。ABPM可获得24h、白昼和夜间血压的数据,可评价昼夜血压变异性。当前多部临床指南推荐使用ABPM来确诊高血压、评估降压疗效和优化降压治疗~([4-5])。此外,ABPM还有助于筛查某些特殊的血压情况,如发作性高血压、体位性低血压、餐后低血压、卧位高血压等~([2,5])。ABPM结果可辅Telaglenastat助识别一些与高血压相关的疾病,如阻塞性睡眠呼吸暂停综合征~([6]Infection rate)。

乳腺癌MRI的特征性表现与腋窝淋巴结转移的相关性分析

目的 探究乳腺癌MRI的特征性表现与腋窝淋巴结转移的相关性。方法 选择2019年1月—2021年4retinal pathology月医院收入的70例乳腺癌患者作为本次的研究对象,其中有31例患者出现腋窝淋巴结转移作为观察组,其余39例患者作为对照组,对70例患者手术前均统一进行MRI检查,分析患者MRI的特征性表现与腋窝淋巴结转移的相关性,并对相关数据进行统计学分析。结果 观察组患者乳腺癌肿块短径及长径比值远远小于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);观察组肿块边缘早期强化率高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 通过研究发AZD2281说明书现乳腺癌患者其癌肿短径与长径之比越小,其腋窝淋巴结转移可能性越大;患者癌症肿块早期边缘强化率越大,腋窝淋巴结转移可能性越大。从本研究结果来看乳腺癌MRI的特征性表现与患者腋窝淋巴结转移与否有较显著的相关性,可以通过术前MRI检查对乳腺癌患者是否发生淋巴结转移进Immunology & Inflammation抑制剂行提示,能够有效地为手术方案的制定提供依据,临床应用价值显著,建议进行推广应用。

化痰排浊解毒法联合胸腔镜根治术治疗早期非小细胞肺癌疗效及对免疫功能、生活质量的影响

目的:观察化痰排浊解毒法联合胸腔镜根治术治疗早期非小细胞肺癌患者的疗效及对免疫功能、生活质量的影响。方法:selleck BMS-354825选取60例Ia~IIa期非小细胞肺癌痰热阻肺证患者,按随机数字表法分为对照组及观察组各30例。对照组采取肺癌胸腔镜根治术后常规治疗,观察组在对照组基础上加用化痰排浊解毒法中药治疗,2组均连续治疗3个月。比较2组临床疗效,比较2组治疗前后中医证候积分、Epigenetics抑制剂免疫功能指标[调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17 (Th17)]、血清指标[巨噬细胞抑制因子-1 (MIC-1)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白酶-9 (MMP-9)]、生活质量[肺癌患者生存质量测定量表(FACT-L)评分]、观察2组治疗期间不良反应发生情况。结果:观察组疾病控制率(DCR)为96.67%,对照组为76.67%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组中医证候积分均较治疗前下降,观察组中医证候积分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组Treg指标值均较治疗前下降,Th17、Th17/Treg比值均较治疗前上升,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组Treg指标值低于对照组,Th17、Th17/Treg比值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MIC-1、uPA、MMP-9水平均较治疗前下降(P<0.05),观察组上述3项水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组FACT-L量表中生理状况、情感状况评分均较治疗前下降,功能状况、肺癌相关症状评分均较治疗前上升,差异均有统计学意义medical financial hardship(P<0.05),社会/家庭状况与治疗前相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,观察组FACT-L量表中生理状况、情感状况评分均低于对照组,功能状况、肺癌相关症状评分均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),2组社会/家庭状况评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。2组在治疗过程中,均未发生与药物相关的严重不良反应。结论:化痰排浊解毒法联合胸腔镜根治术治疗早期非小细胞肺癌临床疗效显著,可改善患者临床症状,提高免疫功能,提高生活质量,用药安全性较高。