目的1.明确肾纤维化小鼠肾脏中IRE1α的表达水平和巨噬细胞的浸润情况;2.阐明IRE1α在小鼠肾纤维化发生发展中的作用;3.探讨过继转移IRE1α敲低的巨噬细胞在小鼠肾纤维化发生发展中的作用。方法1.应用单侧输尿管结扎(UUO)方式构建肾纤维化小鼠模型,应用q RT-PCR和免疫荧光染色技术检测小鼠肾脏组织中IRE1α、XBP1和XBP1s的表达水平,Masson染色检测分析小鼠肾脏Rodent bioassays的损伤和纤维化程度;2.采用流式细胞术检测点击此处分析小鼠肾脏中Ly6C~+MHC-Ⅱ~+细胞的浸润情况;3.应用IRE1α的抑制剂4μ8C按照3.3 mg/kg从术后第二天开始对肾纤维化小鼠进行腹腔注射,每天一次,连续7天,应用q RT-PCR和Masson染色检测分析小鼠肾脏的损伤和纤维化程度,通过流式细胞术检测分析小鼠肾脏中Ly6C~+MHC-Ⅱ~+细胞的浸润情况;4.使用慢病毒转染技术建立稳定表达萤火虫荧光素酶标记基因的Raw264.7细胞系,并腹腔注射到正常和肾纤维化小鼠体内,采用小动物活体成像技术检测小鼠肾脏处荧光强度,利用si RNA敲减Raw264.7细胞中IRE1α的表达,将转染了si-NC或si-IRE1α的Raw264.7细胞系,经腹腔注射于肾纤维化小鼠体内,每两天一次,注射3次,采用q RT-PCR和Masson染色检测分析小鼠肾脏的损伤和纤维化程度。结果1.成功构建肾纤Lapatinib作用维化小鼠模型,q RT-PCR和免疫荧光染色结果显示小鼠纤维化肾脏中IRE1α的表达水平升高且细胞因子TNF-α、IL-1β和趋化因子CCL2的表达水平上调,Ly6C~+MHC-Ⅱ~+细胞浸润增加;2.UUO术后第二天开始对肾纤维化小鼠腹腔注射IRE1α的抑制剂4μ8C,发现4μ8C处理后小鼠肾脏损伤和纤维化程度减轻,同时肾脏损伤部位炎症反应减弱;3.将萤火虫荧光素酶标记的Raw264.7细胞系腹腔注射到肾纤维化小鼠体内,应用小动物活体成像技术检测分析发现,肾纤维化小鼠肾脏损伤部位的荧光强度增强,将敲减IRE1α的Raw264.7细胞经腹腔注射到造模小鼠体内,发现过继转移敲减IRE1α的Raw264.7细胞能够减轻UUO小鼠肾脏损伤和纤维化。结论UUO诱导的肾脏纤维化小鼠模型肾脏中IRE1α表达水平升高,并伴随肾脏组织中Ly6C~+MHC-Ⅱ~+细胞比例增多。抑制肾脏中IRE1α的表达能够减轻肾脏损伤部位的炎症反应和Ly6C~+MHC-Ⅱ~+细胞的浸润,进而显著改善肾脏损伤和纤维化。此外,过继转移敲减IRE1α的巨噬细胞能够减轻UUO小鼠肾脏损伤和纤维化。