【背景】神经退行性疾病是一类神经元慢性进行性损伤的疾病,表现为神经元死亡、变性及坏死,相关机制尚未明immunity to protozoa确。小胶质细胞作为重要的免疫细胞,在中枢神经系统起着关键作用,参与免疫应答、炎症反应和神经损失修复等多种过程。大脑遭遇损伤、感染时后,小胶质细胞可被激活为具有神经毒性作用的M1型小胶质细胞,也可分化为具有神经保护作用的M2型小胶质细MDV3100试剂胞,其中M2型小胶质细胞可趋化于损失部位进行吞噬损伤和坏死细胞,而M1型小胶质细胞可分泌炎症因子损伤周围神经元。LncRNA作为一类长链非编码RNA,通过调控转录、翻译来抑制靶基因的表达,它作为表观遗传修饰物参与了多种生物过程和越来越多的疾病。目前,关于LncRNA U90926在神经退更多行性疾病的作用研究相对较少。因此,本研究通过细菌脂多糖刺激小胶质细胞,检测lncRNA U90926的表达量,进而探讨抑制lncRNA U90926对LPS诱导原代小胶质细胞氧化应激和炎症反应的影响,并分析其作用机制,为神经退行性疾病提供新的作用靶点。【实验目的】探讨LncRNA U90926对小胶质细胞细菌脂多糖(LPS)诱导后表型和炎症反应的影响及其机制。【实验方法】将原代的小胶质细胞和BV2细胞(小胶质细胞细胞系)进行体外培养,依照Lipofectamine3000试剂盒将si RNA-Nrf2、si RNA-U90926转染至小胶质细胞中,并设置阴性对照组。LPS诱导激活小胶质细胞建立炎症反应模型,采用q RT-PCR检测体外LPS激活小胶质细胞后lncRNA U90926表达谱,同时也检测小胶质细胞M1标记物i NOS、IL-1、IL-6、TNF-α的m RNA表达水平和小胶质细胞M2标记物Arg1、IL10的m RNA表达水平;Western blot测定TNF-α、IL-6、IL-1β、i NOS、Nrf2、keap1的蛋白表达水平;流式细胞术检测活性氧ROS含量。【结果】LPS诱导BV2细胞后,lncRNA U90926表达水平显著上调;同时也明显增强其氧化应激和炎症反应,增加了TNF-α、IL-6、IL-1β和i NOS促炎因子的表达和ROS含量。因此在敲减lncRNA U90926后,M1型标记物i NOS、IL-1β、IL-6和TNF-α的表达明显降低,M2型标记物Arg-1 m RNA和IL-10的表达明显增加,并减少ROS含量,抑制氧化应激反应。此外,敲减lncRNA U90926可靶向调控BV2细胞中Nrf2的活化,使其入核激活下游通路,从而发挥抑制BV2细胞的炎症反应和氧化应激效应。【结论】小鼠的小胶质细胞可以被细菌脂多糖诱导激活,并向M1型转化,其细胞内lncRNA U90926表达量显著升高。而抑制lncRNA U90926的表达可以阻碍小胶质细胞向M1型转化,并通过Keap1/Nrf2-ARE信号通路促进小胶质细胞向M2型转化,抑制小胶质细胞的炎症反应和氧化应激效应。本研究提示lncRNA U90926可能为抑制神经炎症的一个关键分子,是预防神经退行性疾病发生的可靠策略。