ALK抑制剂

目的 探讨硝苯地平和低分子肝素钙联合治疗对早发型重度子痫前期(EOSP)患者氧化应激、血压及母婴结局的影响。方法 选择2020年1月至2022年1月三门峡市中心医院产科二病区收治的160例EOSP患者为研究对象，根据治疗方法将患者分为观察组和对照组，每组80例。2组患者均给予硫酸镁解痉、纠正低蛋白血症、持续低流量吸氧、加强营养等常规对症支持治疗。在常规治疗基础上，对照组患者给予硝苯地平治疗，观察组患者给予硝苯地平和低分子肝素钙联合治疗，2组患者均治疗1周。治疗后评估2组患者的临床疗效；分别于治疗前后采用黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性，采用硫代巴比妥酸法检测血清丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)水平，使用血压检测仪测定2组患者的收缩压(SBCL 318952化学结构P)和舒张压(DBP);治疗后对所有患者进行随访，记录2组患者不良妊娠结局的发生情况。结果 观察组和对照组患者治疗总有效率分别为92.50%(74/80)、81.25%(65/80),观察组患者治疗总有效率显著高于对照组(χ~2=4.440,P<0.05)。治疗前2组患者血清SOD、GSH-Px、MDA、LPO水平比较差异无统计学意义(P>0.Neuroimmune communication05);2组患者治疗后的血清SOD、GSH-Px水平显著高于治疗前，血清MDA、LPO水平显著低于治疗前(P<0.05);治疗后，观察组患者血清SOD、GSH-Px水平显著高于对照组，血清MDA、LPO水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗前2组患者的SBP、DBP比较差异无统计学意义(P>0.05),2组患者治疗后的SBP、DBP显著低于治疗前(P<0.05);治疗后，观察组患者的SBP、DBP显著低于对照组(P<0.05)。观察组和对照组不良妊娠结局发生率分别为6.25%(5/80)、18.75%(15/80),观察组不良妊娠结局发生率显著低于对照组(PLX5622供应商χ~2=5.714,P<0.05)。结论 硝苯地平和低分子肝素钙联合治疗可以有效改善EOSP患者的氧化应激状态，控制血压，降低不良妊娠结局发生率。

目的 探讨局部枸橼酸抗凝对于重症急性肾损伤患者接受连续性肾脏替代治疗中的作用。方法 随机选取2019年1月—2022年12月东台市人民医院接诊的重症急性肾损伤患者79例为研究对象，均接受连续性肾脏替代治疗，根据数字表法分为对照组（n=40）和观察组（n=39），对照组实施全身肝素治疗，观察组实施局部枸橼酸抗凝治疗。对比两组患者治疗前后肾功能相关指标、凝血功能指标和治疗结果。结果 治疗前，两组患者肾功能指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗selleckchem后，观察组患者VX-661抑制剂肾功能指标较对照组患者更低，差异有统计学意义（P<0.05）。治疗前，两组患者凝血功能指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）；治疗后，观察组患者凝血功能显著优于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组患者治疗有效率（94.87%）明显高于对照组（75.combined remediation00%），差异有统计学意义（χ~2=6.053,P<0.05）。结论 局部枸缘酸抗凝治疗可以明显改善重症急性肾损伤患者在连续性肾脏替代治疗后的肾功能，同时改善患者凝血功能，疗效确切，值得推广。

目的 观察丁苯酞序贯疗法治疗急性脑梗死合并认知功能障碍患者的临床效果及对炎性因子的影响。方法 选取2021年3月—2022年1月潜江市人民医院收治的急性脑梗死合并认知功能障碍患者70例，采用随机数字表法分为观察组和对照组各35例。在常规治疗基础上，对照组给予阿替普酶静脉溶栓治疗，观察组则在对GSK J4体内实验剂量照组基础上给予丁苯酞序贯治疗。比较2组患者治疗效果，治疗前后美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS量表)评分、Barthel指数、α颗粒膜糖蛋白(CD62p)、溶酶体颗粒膜糖蛋白(CD63)、血小板(PLT)计数、血小板体积(MPV)、血清炎性因子[C反应蛋白(CRP)、白介素-3(IL-3)]、简易精神状态评价量表(MMSE)评分及不良反应。结果 观察组患者治疗总有效率为97.14%,高于对照组的80.00%(χ~2=5.081,P=0.024);治疗后，2组患者NIHSS评分低于治疗前，Barthel指数高于治疗前，且观察组降低/升高幅度大于对照组(P均<0.01);2组患者CD62p、CD63低于治疗前，PLT、MPV高于治疗前(P均<0.01);观察组治疗后CD6insect toxicology2p、CD63低于对照组(P<0.01),2组PLT、MPV比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者CRP、IL-3水平均低于治疗前，且观察组低于对照组(P<0.01);2组患者MMSE各项评分均高于治疗前，且观察组高于对照组(P<0.01);观察组不良反应总发生率为8.57%,低于对照组的28.57%(χ~2=4.629,P=0.031)。结论 丁苯酞序贯疗法治疗急性脑梗死合并认知功CL 318952配制能障碍的疗效显著，可改善患者神经功能、血小板聚集、炎性因子水平及认知功能，值得推广应用。

背景:随着电子胃镜检查的普及,胃息肉的检出率也在逐渐增加。而胃息肉的发病机制目前仍然处于未知阶段,有报道认为胃息肉的发展在不同程度上受到几个因素的影响,包括性别、年龄、慢性炎症、血脂异常、遗传易感性,其不同病理类型的影响程度均有不同。目的:通过研究随州市中心医院患有胃息肉的病人的临床特征及相关的伴随资料进行研究,分析出胃息肉及其病理形态的危险因素,旨在为预防胃息肉的发生、胃息肉的治疗及转归提供新的思路。方法:1.实验组:选取2021年08月-2022年08月期间就诊于随州市中心医院消化内科收治的经胃镜检查诊断为胃息肉的,并且其病理类型由病理检查确定的患者。2.对照组:选取2021年08月-2022年08月期间就诊于随州市中心医院消化内科住院接受胃镜检查,其结果为慢性浅表性胃炎的患者。3.应用SPSS26.0统计学软件进行统计分析和数据处理。在单变量分析中,对于符合正态分布的数值变量的测量结果用X±S表示,并通过t检验进行比较;分类变量表示为(%),用X~2检验进行比较,以P<0.05被认为有统计学差异。确定结果存在显著的统计学差异的风险因素,进行二元Logistic回归分析,并计算优势比(Oddsratio,OR)及95%CI。P<0.05认为差异具有统计学意义。结果:1.胃息肉与对照组相比(1)分布情况:本次病例中胃息肉主要以多发为主,占胃息肉组的52.88%,主要发生于胃体(49.80%),胃息肉大小以<0.5cm最多见。病理类型以胃底腺息肉(71.63%)为主要类型,其次为胃增生性息肉(20.67%),胃炎性息肉(6.7%),胃腺瘤性息肉(0.10%)。(2)相关因素分析:行单因素卡方检验,性别、年龄、高脂血症、甘油三酯、是否使用PPIs和使用PPIs的时间与对照组相比,结果存在显著的统计学差异,P<0.05。多因素Logistic回归分析。结果显示性别(OR=0.286,95%CI 0.037-0.153)、年龄(OR=1.028,95%CI 1.008-1.049)、是否使用PPIs(OR=3.247,95%CI2.161-4.880)和PPIs使用时间(OR=4.514,95%CI 2.478-8.211)、高脂血症(OR=1.820,95%CI 1.218-2.719)、甘油三酯升高(OR=1.814,95%CI 1.177-2.795)是胃息肉发生的危险因素。2.胃增生性息肉与对照组相比增生性息肉的危险因素进行单因素分析,发现性别、年Bioactive borosilicate glass龄、BMI、及Hp感染、高血脂、总胆固醇和载脂蛋白B与对照组相比,结果存在显著的统计学差异。将这些因素进行多因素回归分析发现,Hp感染(OR=3.725,95%CI 2.173—6.385)、高血脂(OR=0.331,95%CI 0.182—0.601)和总胆固醇升高(OR=9.750,95%CI2.354—40.377)为增生性息肉发生的危险因素,载脂蛋白B(OR=0.245,95%CI0.095—0.633)为增生性息肉的保护因素。3.胃底腺息肉与对照组相比将胃底腺息肉的相关风险因素进行单因素分析,发现性别、年龄、吸烟、及Hp感染、PPIs的使用及使用时间,高脂血症、甘油三酯和总胆固醇与对照组相比,结果显示存在显著的统计学意义。将这些因素进行多因素回归分析发现,高脂血症(OR=5.145,95%CI 2.286—11.577),PPIs的使用(OR=1.621,95%CI 1.101—2.388)和PPIs的使用时间(OR=5.182,95%CI 2.772-9.685)为胃底腺息肉发生的危险因素,Hp感染阳性(OR=0.570,95%CI 0.354-0.920)是胃底腺息肉的保护因素。4.胃炎性息肉与对照组相比对炎性息肉的危险因素进行单因素分析,发现性别、生活习惯(吸烟史、饮酒史)、Hp感染、使用PPIs、糖尿病史和高脂血症等指标与对照组相比,结果存在显著的统计学差异。将这些因素进行多因素回归分析发现,吸烟史(OR=12.533,95%CI 3.951—39.762)和饮酒史(OR=5.750,95%CI 1.838—17.993)以及Hp感染(OR=4.824,95%CI 1.461—15.927)为胃炎性息肉发生的危险因素。5.胃腺瘤性息肉与对照组相比对胃腺瘤性息肉的危险因素进行卡方检验发现糖尿病、甘油三酯、低密度脂蛋白和载脂蛋白B与对照组相比,结果存在显著的统计学意义(P<0.05)。结论:1.胃息肉的病理类型中以胃底腺息肉为主,其中女性、超重或者肥胖、以及PPIs是胃息肉发生的危险因素。2.增生性息肉的危险因素是女性、高龄、超重或者肥胖、Hp感染、使用PPIs和总胆固醇升高。高脂血症、载脂蛋白B为增生性息肉的保护因素。3.女性、高龄、高脂血症,PPI的使用和PPI的使用时间是导致胃底腺息肉发生率升高的危险因素,Hp感染阳性会降低胃底腺息肉的发生率。4.炎性息肉的危险因素是吸Belnacasan说明书烟、饮酒和Hp感染。5.腺瘤性息肉的发生与糖尿病病史及高Dorsomorphin分子量脂血症之间存在密切关联,尤其是甘油三酯、低密度脂蛋白和载脂蛋白B。

目的 探讨良性前列腺增生(BPH)患者体质量指数(BMI)和血脂指标与前列腺体plasmid biology积相关性。方法 回顾性分析2014年1月2022年12月中国人民解放军总医院泌尿外科收治的初次行前列腺穿刺活检术或前列腺切除术且病理明确诊断为BPH患者578例,收集临床资料包括年龄、发病时间、BMI、既往病史及生化指标,并根据前列腺总体积(TPV)分级将研究对象划分为TPV>75 mL组和TPV≤75 mL组。比较两组一般资料,用Crizotinib线性回归分析法分析BPH患者TPV的预测因素;进一步对样本按照BMI参考值进行分层,观察不同亚组样本中载脂蛋白B(ApoB)对TPV的影响差异。结果 共纳入578例BPH患者,其中TPV>75 mL组215例,TPV≤75 mL组363例,TPV> 75 mL组BMI、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、ApoB水平显著高于TPV≤75 mL组(P<0.01)。多因素线性回归分析结果:年龄(β=0.604,P=0.003)、BMI(β=2.000,P<0.001)、ApoB(β=23.792,P<0.001)与TPV具有显著的正线性相关性。调整年龄、BMI混杂因素后在BMI<24的BPH人群中,ApoB与TPV无线性相关(P>0.05),在超重BPH人群和肥胖BPH人Cobimetinib生产商群,ApoB可分别预测TPV增长(β=26.411,P=0.011;β=47.602,P=0.017)。结论 年龄、ApoB和BMI可作为BPH患者前列腺体积增长的预测指标,有利于进一步研究BPH的发病及进展。

目的：探究小儿脓毒血症使用参附注射液联合低分子肝素干预治疗的临床效果。方法：选取2021年2月—2022年8月收治的89例小儿脓毒血症患者作为研究对象，按随机数表法分为常规组（n=44）和联合组（n=45）。常规组使用低分子肝素进行干预治疗，联合组在上述治疗内容中加入参附注射液，对比两组治疗后凝血指标、PT-Pnovel antibioticsroBNP、Cys水平、APACHE、SOFA评分及治疗有效率。结果：联合不同干预方式后常规组凝血指标、PT-ProBNP、CysNVP-TNKS656溶解度水平均差于联合组（P<0.05）；干预治疗后联合组APACHE、SOFA评分优于常规组（PFulvestrant体内实验剂量<0.05）；常规组治疗后总有效率差于联合组（P<0.05）。结论：联合使用参附注射液及低分子肝素对小儿脓毒血症干预后，凝血指标、PT-ProBNP、Cys等指标均得到有效改善，同时进一步提升APACHE、SOFA评分，并保证生命安全。

沙海蜇(Stomolophus meleagris,S.meleagris)是中国、韩国和日本沿海地区主要的大型致伤水母之一,其触手中的生物毒素具有包括皮肤毒性、心血管毒性、神经毒性和肌肉毒性等在内的多种毒理学效应,每年造成大量的蜇伤事件,对公众健康安全构成巨大威胁。皮肤中毒症状是患者蜇伤后最直接最显著的表现,临床称为“水母皮炎”。水母皮炎的皮损从红斑、丘疹、风团到水疱、溃疡、坏死,轻重各不相同,并伴有剧烈疼痛和瘙痒,甚至出现严重的血管性水肿和过敏性休克。由于水母毒素成分多样,致病机制复杂,目前对于其皮肤毒性机理研究不足、认识尚浅,缺乏针对性和高效的治疗药物,这已成为目前水母蜇伤防治领域面临的主要问题。近年来,许多传统药材和植物提取物因其药理学活性丰富多样、天然安全,并对蛇毒、水母毒素等多种生物毒素具有良好的拮抗作用等优点得到了研究人员的广泛关注。这一点激发我们去寻找我国传统药物中潜在的可以拮抗沙海蜇毒素皮肤毒性,并用于治疗水母皮炎的有效药物。丹酚酸B(Salvianolic acid B,SAB)又称为丹参酚酸乙,是我国传统中药丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)的干燥根及根茎中的主要水溶性复合物之一,具有显著的抗氧化、抗炎、抗血小板聚集、抗肿瘤、抗细胞凋亡、保护微血管内皮细胞等多种药理活性,对心、脑、肝、肺、肾等多个器官都具有保护作用。曲克芦丁(Troxerutin,TRX)是天然提取物芦丁经羟乙基化后形成的半合成黄酮类化合物,研究表明其具有抗炎、抗ICI 46474采购氧化、抗血小板聚集、抗血栓形成、改善微循环、保护血管内皮细胞及组织细胞,降低毛细血管通透性等多种药理活性。然而,针对水母毒素引起的体内外皮肤毒性损伤,这两种药物是否具有较好的干预和保护效应,目前国内外尚未有相关研究报道。因此,在本研究中我们使用含有大量水母毒素的沙海蜇触手提取物(tentacle extract,TE)分别在细胞水平构建人表皮角质形成细胞Ha Ca T中毒损伤模型,在动物水平构建小鼠足掌中毒肿胀模型,分析和评价沙海蜇TE的体内外皮肤毒性,探究其毒性损伤机理。然后通过皮内给药、腹腔给药以及与细胞共孵育的方式,探究丹酚酸B和曲克芦丁对TE介导的体内外皮肤毒性损伤的干预和保护效应,为进一步筛选和研制治疗水母皮炎的针对性药物提供新的思路和方向。第一部分:丹酚酸B和曲克芦丁对沙海蜇TE体外皮肤损伤的保护作用研究目的:通过构建沙海蜇TE介导的Ha Ca T细胞中毒模型,分析与评价TE体外皮肤毒性和潜在机理;并探究丹酚酸B和曲可芦丁对沙海蜇TE介导的体外皮肤毒性损伤的干预和保护效应,分析和阐述其可能的作用机制。方法:1.通过自溶、过滤、离心、透析制备沙海蜇TE,并使用蛋白检测试剂盒检测其蛋白浓度作为TE浓度。2.选择不同浓度TE与Ha Ca T细胞共孵育,采用CCK8法检测细胞活力;通过流式细胞术和荧光染色检测细胞凋亡水平,评价TE的皮肤细胞毒性;随后选择10μg/m L TE构建Ha Ca T细胞中毒模型,利用ELISA技术检测中毒模型0~12 h内不同时间点细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α分泌水平以及氧化应激指标活性氧自由基(Reactive oxygen species,ROS)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平。3.选择不同浓度SAB和TRX和30μg/m L TE混合溶液与Ha Ca T细胞共孵育,采用CCK8法检测细胞活力;通过流式细胞术和荧光染色检测细胞凋亡水平,探究SAB和TRX对TE细胞毒性的拮抗能力;随后设阴性对照组、TE模型组、药物干预组、药物内参组,利用ELISA技术检测各组在12 h时细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α分泌水平及氧化应激指标ROS和MDA水平。结果:1.沙海蜇TE对Ha Ca T细胞具有剂量依赖性的体外细胞毒性,细胞活力与TE浓度成反比,LC50(Lethal Concentration 50%)=28.3μg/m L;细胞凋亡实验结果显示TE能明显诱导细胞凋亡,导致细胞坏死,并存在剂量依赖性;ELISA结果显示TE模型组细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α以及氧化应激指标ROS和MDA水平均呈现时间依赖性升高,在8 h~12 h之间达到峰值,趋于稳定。2.丹酚酸B和曲克芦丁这两种药物可以有效拮抗TE对Ha Ca T细胞的细胞毒性,显著提高细胞活力,且具有剂量依赖性;细胞凋亡实验结果显示SAB和TRX可以显著降低TE介导的Ha Ca T细胞凋亡水平;ELILY2835219化学结构SA结果显示SAB和TRX可以显著降低TE模型组细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α分泌水平,显著降低细胞内ROS和MDA水平,差异有统计学意义。第二部分:丹酚酸B和曲克芦丁对沙海蜇TE体内皮肤损伤的保护作用研究目的:通过构建沙海蜇TE介导的小鼠足掌中毒肿胀模型,分析与评价TE体内皮肤毒性和潜在机理;并探究丹酚酸B和曲可芦丁对沙海蜇TE介导的体内皮肤毒性损伤的干预和保护效应,分析和阐述其可能的作用机制。方法:1.通过自溶、过滤、离心、透析制备沙海蜇TE,并使用蛋白检测试剂盒检测其蛋白浓度作为TE浓度。2.将ICR小鼠随机分为对照组、不同剂量TE组;小鼠右侧足掌皮内注射50μL生理盐水(Normal saline,NS)和不同剂量TE(5μg、15μg、50μg)为对照组和不同剂量TE组(对侧足掌无处理),测量并记录小鼠右侧足掌在0~24 h内的足掌厚度变化,计算足掌肿胀百分比,并进行皮肤刺激反应评分。3.随后选取50μg TE构建小鼠足掌中毒肿胀模型,HE染色观察各组小鼠足掌在1 h、12 h、24 h的皮肤组织病理变化;ELISA检测TE模型组小鼠0~24 h内不同时间点血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平及氧化应激指标ROS和MDA水平。4.将ICR小鼠随机分为对照组、TE模型组、TE+药物皮内注射组、TE+药物腹腔注射组;小鼠右侧足掌皮内注射50μL NS、TE、TE+不同浓度药物混合溶液为对照组、TE模型组、TE+药物皮内注射组;预先腹腔注射SAB或TRX,0.5 h后足掌注射TE为TE+药物腹腔注射组。测量并记录各组小鼠足掌在0~24 h内的厚度变化,计算肿胀百分比,并进行皮肤刺激评分;HE染色观察足掌皮损在12 h时的组织病理变化;ELISA检测小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平以及氧化应激指标ROS和MDA水平。结果:1.沙海蜇TE具有明显的体内皮肤毒Immunotoxic assay性。与对照组小鼠相比,TE模型组小鼠足掌出现明显的中毒性肿胀,皮肤刺激评分显著升高,并存在剂量依赖性;HE染色可见TE组小鼠足掌真皮显著水肿,胶原纤维分离淡染,真皮内大量毛细血管扩张充血、出血,真皮及皮下可见中性粒细胞和淋巴细胞为主的混合炎细胞密集浸润;ELISA结果显示TE模型组小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平以及氧化应激指标ROS和MDA水平均呈时间依赖性升高,并在12 h~24 h之间达到峰值,趋于稳定。2.与TE组相比,丹酚酸B和曲克芦丁这两种药物通过皮内注射和预先腹腔注射两种给药方式均有效降低了不同时间点小鼠足掌肿胀百分比和皮肤刺激评分:HE染色显示SAB和TRX组均明显改善了TE引起的真皮层水肿,胶原纤维分离淡染,真皮内毛细血管扩张充血、出血及混合炎细胞浸润的炎症性病理改变;ELISA结果显示SAB和TRX组均显著降低了小鼠血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α水平以及氧化应激指标ROS和MDA水平,其中SAB和TRX腹腔注射组的降低效果略优于皮内注射组。结论:1.沙海蜇TE在动物水平和细胞水平均具有明显的皮肤毒性作用,其毒性损伤机制与炎症和氧化应激损伤相关;可能通过上调炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达水平,诱导剧烈炎症反应;并刺激大量活性氧ROS产生释放,引发脂质过氧化反应,显著升高MDA水平,造成组织和细胞氧化应激损伤,从而进一步诱导和加剧炎症反应而实现。2.丹酚酸B和曲克芦丁对沙海蜇TE介导的体内外皮肤毒性损伤均具有较好的保护作用,其机制可能与两种药物显著的抗炎和抗氧化损伤活性相关;可能通过下调炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α的表达水平,降低细胞和组织炎症反应水平;并抑制ROS的大量产生释放,抑制脂质过氧化反应,显著降低MDA水平,从而改善组织和细胞氧化应激损伤而实现,是潜在的治疗水母皮炎的有效药物。

目的：观察认知行为护理在青光眼术后患者中的应用效果。方法：选取2019年2月至SCH727965体内2020年2月该院收治的100例青光眼患者进行前瞻性研究，按照随机数字表法将其分为对照组和观察组各50例。两组均接受激光虹膜切除术治疗，术后对照组给予常规护理，观察组在对照组基础上给予认知行为护理。比较两组护理前后自护能力[自我护理能力量表（ESCA）]评分、视野缺损、眼压、视力水平和护理满意度。结果：护理后，两组健康知识、自我概念、自寻找更多我责任感、自我护理技能等各项ESCA评分均高于护理前，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；两组视野缺损、眼压均低于护理前，且观察组低于对照组，两组视力水平均高于护理前，且观察组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.0Medullary carcinoma5）；观察组护理满意度为98.00%，高于对照组的80.00%，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：认知行为护理应用于青光眼术后患者，可提高其自护能力，改善视力和眼压，减轻视野缺损，提高护理满意度，效果优于单纯常规护理。

在本课题中,我们研究阐明了萝卜硫素(sulforaphane,SFN)保护受精后3天(day-post-fertilization)斑马鱼幼鱼免受H2O2诱导的氧化损伤的可能保护机制之一。氧化应激被认为是缺血再灌注损伤的关键发病因素之一,可导致一定程度的心脏损伤和位于血管末端的耳蜗损伤。各种细胞死亡方式均与氧化应激息息相关,例如细胞凋亡、坏死性凋medicine containers亡和铁死亡等。斑马鱼在药物筛选和研究机制的实验中具有一定的优势,常用来探究药物的治疗效果等方面,而过氧化氢(H2O2)属于活性氧(reactive oxygen species)的三种主要类型之一(另外两种是超氧阴离子和羟基自由基),是一种可广泛用于诱导斑马鱼幼体氧化损伤的氧化物质。由此,我们使用3-dpf斑马鱼幼鱼,模拟缺血再灌注损伤因素之一的氧化应激损伤,建立了幼鱼的全点击此处身性氧化损伤模型。模型损伤的观察指标分为心功能和侧线毛细胞数量两个部分,其中心功能指标为静脉淤血情况、心率、心包腔面积和射血分数(Ejection Fraction,EF)。Z-VAD-FMK是一种广谱caspase抑制剂,本研究证明其能够抑制细胞凋亡发生,逆转H2O2诱导的心功能异常和神经丘毛细胞的减少,提示H2O2建立的模型Z-IETD-FMK试剂损伤原因之一是细胞凋亡,但不仅限于细胞凋亡。近年来,由于萝卜硫素具有抗氧化、抗炎和抗凋亡的特性,在科研中和临床上得到了广泛的关注和研究。萝卜硫素是一种Nrf2的激动剂,能够激活细胞内的抗氧化酶和解毒酶的表达从而保护机体。本课题以斑马鱼幼鱼作为体内实验的氧化损伤模型,探究萝卜硫素能否通过抗氧化作用缓解H2O2诱导的氧化损伤,实验结果发现,萝卜硫素可显著减轻过氧化氢诱导的斑马鱼幼鱼心率增加、心包底部静脉淤血、射血分数降低、心包腔面积减少和毛细胞减少的表征。此外,结果也证明了,萝卜硫素对H2O2诱导的损伤的保护作用被Sirt1(NAD-Dependent Protein Deacetylase Sirtuin-1)抑制剂Ex527所阻断,这提示萝卜硫素诱导的Sirt1通路蛋白参与了其对幼鱼的保护作用,即sirt1蛋白可能是萝卜硫素发挥保护作用的靶蛋白或靶蛋白下游蛋白之一。我们的研究通过q PCR和Western Blotting实验在m RNA和蛋白表达水平上证明了,SFN在H2O2造成幼鱼损伤时,通过维持sirt1相关的氧化还原状态发挥预保护作用,其中分别检测了细胞凋亡线粒体通路中相关的几个关键因子,分别为促凋亡蛋白因子bax、caspase-3和caspase-9,抑凋亡蛋白因子bcl-2,同时检测了sirt1蛋白的表达情况。以上内容表明,使用萝卜硫素在临床上预防缺血再灌注损伤导致的心脏损伤和耳蜗损伤可能是一种可行的治疗方法。实验结果如下:1.使用过氧化氢成功建立了斑马鱼幼鱼全身性氧化损伤模型;2.过氧化氢造模诱导了幼鱼体内凋亡的发生;3.萝卜硫素能够抑制过氧化氢引起的幼鱼损伤以及凋亡现象;4.萝卜硫素通过Sirt1蛋白发挥对幼鱼氧化损伤的保护作用。

目的 通过mRNA异常剪接体外验证实验，即体外微基因剪接系统(minigene splicing assay, MSA),研究中国人群中发现的RHAG突变对于RHAG基因mRNA剪接的影响。方法 通过对KMxD数据库中RHAG基因数据的分析，选择10种中国人群中分布频率相对较高的位于RHAG基因剪接位点附近的突变或编码区域的同义突变，构建相应的RHAG外显子野生型及突变型pSplCanagliflozin采购icePOLR2G微基因表达质获悉更多粒。转染HEK-293T细胞，48 h后收集细胞提取总RNA,反转录后进行PCR扩增，然后进行琼脂糖凝胶电泳检测和毛细管电泳检测，根据实验结果判断RHAG基liver biopsy因突变是否会影响相应外显子的正常剪接。结果 2种RHAG基因剪接位点附近突变(c.158-5delT,c.807+3A>C)轻微减弱了原剪接位点的剪接效率，其余8种突变(c.312G>A,c.341+3G>A,c.609C>T,c.681G>A,c.861G>A,c.957T>A,c.984T>C和c.1139-7G>A)均不影响RHAG基因mRNA的剪接。结论 RHAG基因在剪接方面比较保守，剪接位点附近突变及编码区同义突变较少会引起RHAG基因异常剪接。