ALK抑制剂

目的 分析潮汕地区脑梗死患者CYP2C19基因多态性的分布特点。方法 采用PCR和DNA微阵列芯片法检测345例脑梗死患者的CYP2C19基因型，统计不同性别、年龄、不同梗死类型患者的基因型、等位基因频率及代谢型等信息，分析其中的分布差异。结果 345例脑梗死患者共检测出5种基因型，其中，杂合突变型*1/*2的检出率最高(137例，占39.71%),其次为野生型*1/*1(124例，占35.94%),双突变型*2/*2(47例，占13.62%),杂合突变型*1/*3(19例，占5.51%),双突变型*2/*3(18例，占5.22%),未检出双突medical training变型*3/*3基因型；快代谢型(EM)124例，占35.94%,中代IDN-6556体内实验剂量谢型(IM)156例，占45.22%,慢代谢型(PM)65例，占18.84%;不同性别、年龄、不同类型脑梗死患者的基因型、等位基因及代谢型分布的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 潮汕地区脑梗死患者CYP2C19基因型、等位基因频率、代谢型分布与性别、年龄、梗死类型无关。中代谢型患者所占比例最高，建议有条件者先行CYP2C19基因多态性检测，并根据CYP2RoxadustatC19基因分型指导脑梗死患者个体化精准用药。

目的 运用Meta分析比较并评估双联抗血小板(DAPT)与双通道抑制(DPI)抗栓方案治疗动脉粥样硬化性心血管疾病(ASCVD)患者的有效性与安全性。方法 检索Cochrane Library数据库、Embase、Web of Science、Pubmed、万方数据库、中国期刊全文数据库、维普数据库，检索时间为自建库起至2022年12月28日。查找DRAD001 NMRAPT与DPI抗栓方案在ASCVD患者中的临床研究。筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后，采用RevMan 5.3软件评价有效性及安全性结局指标。结果 经筛选，本研究纳入6篇文献，共4 279例患者。Meta分析显示，DPI组与DAPT组的全因死亡[相对危险度(RR)=1.26,95%可信区间0.76～2.09,P=0.37]、心源性死亡(confirmed casesRR=1.19,95%可信区间0.69～2.05,P=0.54)、心肌梗死(RR=1.23,95%可信区间0.88～1.72,P=0.22)、脑卒中(RR=0.60,95%可信区间0.3selleck Blebbistatin3～1.07,P=0.08)发生率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。DPI组与DAPT组全部出血(RR=1.21,95%可信区间0.99～1.48,P=0.06)、致死性出血(RR=1.17,95%可信区间0.61～2.24,P=0.64)发生率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 对于接受血运重建的ASCVD患者，DAPT与DPI抗栓方案在预防全因死亡、心源性死亡、心肌梗死、脑卒中方面无显著差异，且不增加出血风险。

本研究利用转录组和代谢组学技术探究了翠绿色和粉红色藜麦（Chenopodium quinoa Willd.）叶片中花青素的合成机制，分析了不同时期不同品种之间的差异表达基因（Differentially expressed genes,DEGs）及差异代谢物（Differential accumulated metabolites,DAMs）。通过对藜麦叶片的DEGs进行分析发现:与花青素生物合成密切相的DEGs有11个分别为4CL、C3’H、HCT、CHS、CHI、ANR、CYP75B1、UGT79B1、FG3、FG2、CYP73A；转录因子有4个分别为：MYC2、BHLH14、HY5和TGA。GO富集分析结果表明有7条GO Terms(GO:0009812（类黄酮代谢过程，flavonoid metabolic process）、GO:0010468（基因表达调控，regulation of gene expression）、GO:0051553（黄酮生物合成过程，flavone biosynthetic process）、GO:0009813（类黄酮生物合成过程，flavonoid biosynthetic process）、GO:0009411（应对紫外线，response to UV）、GO:0043169（阳离子绑定，cation binding）和GO:00selleckchem PLX339716703（氧化还原酶活动，oxidoreductase activity）)与花青素生物合成密切相关；KEGG富集分析发现6条（苯丙氨酸代谢（Phenylalanine metabolism,ko00360）、苯丙素的生物合成（Phenylpropanoid biosynthesis,ko00940）、类黄酮生物合成（Flavonoid biosynthesis,ko00941）、植物激素信号转导（Plant hormone signal transduction,ko04075）、黄酮和黄酮醇生物合成（FlavMicrolagae biorefineryone andflavonolbiosynthesis,ko00944）和昼夜节律-植物（Circadianrhythm-plant,ko047selleckchem INCB2806012））与花青素生物合成显著相关的代谢途径。代谢组学分析确定了矢车菊素3-O-3″,6″-O-二丙二基葡萄糖苷（Cyanidin 3-O-3″,6″-O-dimalonylglucoside）和柚皮素（Naringenin）可能是粉红色藜麦叶片形成的关键DAMs；转录组-代谢组学联合分析表明类黄酮生物合成和花青素生物合成途径是藜麦叶片中花青素生物合成的主要富集途径；通过qRTPCR对10个DEGs进行验证，结果表明qRT-PCR的验证结果与转录组测序结果一致。

目的：利用网络药理和分BI 10773作用子对接技术，探究附子-丹参药对治疗病态窦房结综合征(sicksinussyndrome，SSS)的作用机制。方法：通过TCMSP数据库检索并筛选附子、丹参的有效成分及其对应靶点；利用DisGeNET、GeneCards、OMIM数据库预测SSS治疗靶点；借助韦恩图取交集，然后利用String数据库及Cytoscape3.7Human biomonitoring.2进行PPI网络分析，通过拓扑分析得到关键靶点，利用Metascape数据库对靶点进行GO功及KEGG富集分析，使用AutoDock 软件对疾病核心靶基因与潜在活性成分进行分子对接，对接结果selleck Canagliflozin通过Pymol软件可视化。结果：共挖掘出64种活性成分，77个靶点与改善SSS相关。治疗SSS的重要靶点涉及AKT1、TP53、IL-6、TNF、VEGFA等，主要作用于脂质和动脉粥样硬化通路、松弛素信号通路、钙信号通路、cAMP信号通路、NF-κB 信号通路、细胞凋亡、脂肪细胞脂肪分解等信号通路。分子对接结果显示核心成分和核心靶点之间可稳定结合。结论：附子-丹参可能通过AKT1、TP53、IL-6、TNF、VEGFA等靶点发挥抑制窦房结及周围组织纤维化、调节离子通道、保护心肌、阻止其他疾病对SSS的诱发等机制治疗SSS。

目的 探讨骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes,MDS）的修订版国际预后积分系统（IPSSrevised,IPSS-R）与中医证型及症状的相关性。方法 选择2016年1月1日—2021年9月30日北京中医药大学东直门医院血液肿瘤科收治的80例MDS住院患者，对IPSS-R指标（血红蛋白水平、中性粒细胞水平、血小板水平、骨髓原始细胞百分比、细胞遗传学）及中医证型（正虚证型、邪实证型）和舌象临床数据进行分析，明确其相关性。并对其中32例患者进行中医症状分级与IPSS购买Bafilomycin A1-R积分的相关性分析。结果 IPSS-R与中医证型分布方面，不同IPSS-R患者正虚均以气血两虚证、气阴两虚证为主，然而中危+高危+极高危患者相比极低危+低危患者，脾肾阳虚比例大幅上升。舌质方面，随着IPSS-R积分增加，淡红舌比例下降，其他舌质（包括淡白、淡紫、红舌）比例上升。血细胞减少与中医证型分布方面，单系血细胞减少的患者以气血两虚、气阴两虚为主（分别占12/33和10/33），双系、三系血细胞减少的患者脾肾阳Puromycin化学结构虚证型比例较单系血细胞减少增加。在单系血细胞减少患者中，血红蛋白减少者以“无”邪实为主（9/21），而血小板减少者邪实以“瘀”为主（6/11）。IPSS-R与中医症状分级相关性方面，疲乏分级与IPSS-R呈正相关，与血红蛋白水平呈负相关；瘀斑分级、出血分级与血小板水平呈负相关。结论 脾肾阳虚证与epigenetic adaptationIPSS-R积分升高、多系血细胞减少、骨髓原始细胞增多可能存在相关性；在单系血细胞减少患者中，血红蛋白减少可能与虚证有相关性，而“瘀”可能与血小板减少存在相关性。

背景:免疫检查点抑制剂联合化疗已作为HER2阴性的晚期胃及胃食管结合部腺癌病人的一线治疗方案。β-葡聚糖是自然界存在的多糖成分,作为天然免疫调节剂,已被广泛用于肿瘤的免疫治疗之中。因此,我们试图探讨β-葡聚糖在胃癌或胃食管结合部腺癌中是否能与免疫治疗和化疗产生协同作用。方法:从2021年4月1日起,本研究计划招募ECOG评分≤2分的HER2阴性的晚期胃或胃食管结合部腺癌患者。符合条件的患者接受β-葡聚糖(500mg,po,bid,d1-14)+卡瑞利珠单抗(200mg,i.v.,d1)+奥沙利铂(130mg/m~2,i.v.,d1)+替吉奥(40mg被用于体表面积小于1.25m~2的患者;50mg被用于体表面积1.25-1.5m~2之间的患者;60mg被用于体表面积超过1.5m~2者;po,bid,d1-14)联合治疗。每3周为一个周期。在入组时进行首次评估,此后每两个周期(6周)进行一次疗效评估(R ECIST v1.1),直到死亡或进展。本研究主要终点是客观缓解率和安全性。次要终点为中ablation biophysics位无进展生存期和中位总生存期。治疗期间留取患者血液样本,在基线和第一次疗效评估这两个节点评估与免疫激活相关的指标。结果:截至2022年10月31日,共30例患者纳入研究。这些患者中ECOG评分为2分的占26.7%,且没有患者评分为0selleck NMR分;男性占比66.7%;中Belumosudil浓度位年龄为67.5岁;PD-L1表达阳性占比53.3%。最终客观缓解率60%,其中完全缓解3.3%,部分缓解56.7%。疾病控制率93.3%。在这些患者中,中位无进展生存期10.4个月(95%置信区间,9.52-11.27个月),中位总生存期14.0个月(95%置信区间,11.09-16.91个月)。最常见的治疗相关不良反应主要为恶心(53.3%,16例)和食欲下降(50%,15例);3级及以上不良反应发生率为30%(9例);特殊的不良反应为血管瘤(33.3%,10例)。尚未观察到与口服β-葡聚糖相关的不良事件。对这些患者血液样本进行细胞因子检测分析时发现,IL-2和IFN-γ在治疗2个周期后明显上升(P<0.05)。在对T细胞亚群的分析中也发现CD4~+T细胞数量在治疗后明显上升(P<0.05)。结论:我们的研究表明,即使入选ECOG评分较差的患者,β-葡聚糖联合卡瑞利珠单抗和SOX方案治疗具有一定的疗效,且安全性良好,值得进一步扩大样本研究。

目的:分析铁死PI3K/Akt/mTOR抑制剂亡基因SOCS1多态性与胃癌遗传易感性的关系,以丰富胃癌的遗传背景,为胃癌的诊断和治疗提供思路。方法:采用病例-对照研究方法,筛选符合条件的云南大理地区122例胃癌患者及78例健康体检者,收集研究对象的一般资料和临床资料信息并进行对比。采集研究对象全血标本并提取DNA,通过Taq Man荧光探针技术对SOCS1基因的2个SNP位点rs243327、rs33977706进行基因分型。对基因分型结果进行Hardy-Weinberg遗传平衡检测,通过χ~2检验、Logistic回归分析计算P值、OR值、95%CI,从而分析两组间遗传模型、等位基因及基因型children with medical complexity的分布差异。结果:(1)与健康对照组相比,胃癌组呼吸频率、收缩压、淋巴细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞压积、肌酐水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)SOCS1基因2个位点的基因型分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05),表明本研究纳入的样本具有较好的群体代表性。(3)SOCS1基因2个位点等位基因、基因型分布在胃癌组和健康对照组中均无差异(P>0.05)。(4)构建遗传模型发现,SOCS1基因rs243327位点多态性在不同遗传模型下与胃癌发生风险无关(P>0.05),rs33977706位点在超显性模型下A/C基因型的个体相较于A/A或C/C基因型的个体患胃癌的风险会升高(OR=1.91,95%CI=1.06-3.44,P=0.029)。(5)在汉族人群中胃癌组和健康对照组中rs243327位点A、G等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05),rs33977706位点A、C等位基因分布存在差异(P<0.05)且携带C等位基因的个体患胃癌的风险会升高(OR=1.73,95%CI=1.11-2.70,P=0.014)。(6)在白族人群中胃癌组和健康对照组中rs243327位点A、G等位基因分布存在差异(P<0.05)且携带G等位基因的个体患胃癌的风险会降低(OR=0.81,95%CI=0.67-0.98,P=0.043),rs33977706位点A、C等位基因分布存在差异(P<0.05)且携带C等位基因的个体患胃癌的风险会升高(OR=1.81,95%CI=1.07-3.06,P=0.016)。(7)SOCS1基因rs243327位点在四种病理类型胃癌患者中的基因分布没有统计学差异,但印戒细胞癌组A/A基因型频率低于健康对照组,A/G基因型频率高于健康对照组,分布差异具有统计学意义(P<0.05)。rs33977706位点等位基因分布在四种病理类型胃癌患者中存在差异(P<0.05),且低分化腺癌组和高分化腺癌组人群中A/C基因型频率高于健康对照组(P<0.05)。(8)SOCS1基因rs243327位点在不同临床分期胃癌患者中的基因分布没有统计学差异,但Ⅰ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌组A/A基因型频率低于健康对照组(P<0.05)、A/G基因型频率高于健康对照组(P<0.05)。rs33977706位点在不同临床https://www.selleck.cn/products/carfilzomib-pr-171.html分期胃癌患者中的基因分布没有统计学差异,但Ⅲ期胃癌人群中A/C基因型频率高于健康对照组(P<0.05)。结论:(1)SOCS1基因rs243327位点基因多态性与胃癌风险无明显相关关系,rs33977706位点携带C等位基因的个体可能患胃癌的风险会增加。(2)SOCS1基因rs243327位点A/G基因型可能是印戒细胞癌发生的危险因素。rs33977706位点A/C基因型可能是低分化胃腺癌和高分化胃腺癌的危险因素。(3)SOCS1基因rs243327位点A/G基因型可能是Ⅰ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌发生的危险因素。rs33977706位点A/C基因型可能是Ⅲ期胃癌发生的危险因素。

目的:本课题组在前期数据分析中发现CEBPA双突变患者中2例患者存在ELF4D124T*21突变,2例患者存在ELF4R234*突变。本研究通过分子水平、蛋白质水平以及细胞水平进一步探索ELF4突变对白血病细胞的影响以及ELF4在CEBPA突变急性髓系白血病(Acute myeloid leukemia,AML)中的作用及其机制。方法:构建野生型及突变型ELF4和CEBPA的表达载体,使用转盘式激光共聚焦观察与绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Proteins,GFP)融合表达的野生型及突变型ELF4、与红色荧光蛋白(Red Fluorescent Proteins,RFP)融合表达的野生型及突变型CEBPA在细胞内的定位。通过双荧光素酶报告基因系统检测野生型及突变型ELF4或CEBPA对下游靶基因的转录激活作用。利用dox诱导的慢病毒载体系统构建可诱导表达野生型及突变型ELF4、CEBPA的白血病细胞系,研究其对白血病细胞增殖的影响。应用CRISPR/Cas9的方法敲除白血病细胞系ELF4、CEBPA基因并观察白血病细胞增殖的变化。通过免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,CO-IP)实验探究CEBPA与ELF4蛋白质在细胞内是否结合。结果:1.探究突变型 ELF4(ELF4D124T*21、ELF4R234*)的功能。在细胞内定位方面,与GFP融合表达的野生型ELF4和ELF4R234*与蓝色细胞核重叠提示其定位于细胞核中,与GFP融合表达的ELF4D124T*21与蓝色细胞核完全不重叠,提示其定位在细胞浆中。在转录活性方面,野生型ELF4对下游靶基因报告质粒的平均激活作用是阴性对照组的11.65倍(P<0.001),是ELF4D124T*21的9.87倍(P<0.001),是ELF4R234*的 12.07倍(P<0.001),且ELF4D124T*21、ELF4R234*与阴性对照组激活作用无差异(P>0.05)。在细胞增殖方面,Molm13细胞系中,dox诱导野生型或突变型ELF4表达72h时,表达突变型ELF4D124T*21、ELF4R234*的细胞增长为0h的5.56倍和5.8倍,与表达空载体的阴性对照组细胞增长倍数(6.03倍)相仿,而表达野生型ELF4的细胞增长倍数为1.47倍明显少于阴性对照组和表达突变型ELF4组(P<0.001),在其他白血病细胞系(K562细胞系、U937细胞系)中也得到了相似的结果。2.探究ELF4与CEBPA是否存在相互影响。在分子水平,一方面,野生型CEBPA对其下游靶基因(G-CSFR)报告质粒的激活作用是阴性对照组的29.57倍,野生型ELF4和野生型CEBPA同时加入后激活倍数升至44.36倍,两者联合时明显高于单独的野生型CEBPA(P<0.01),提示野生型ELF4可以明显增强野生型CEBPA对下游靶基因报告质粒的转录激活作用;另一方面,野生型ELF4对其下游靶基因(IL-3)报告质粒的激活作用是阴性对照的8.97倍,当在此体系中同时加入野生型CEBPA和野生型ELF4后激活倍数降至4.54倍,转录激活作用明显低于单独野生型ELF4(P<0.05),提示野生型CEBPA可以减弱野生型ELF4对下游靶基因报告质粒的激活作用。在蛋白质水平,与RFP融合表达的野生型CEBPA和与GFP融合表达的野生型ELF4可重叠呈现黄色,提示二者存在共定位;免疫共沉淀(CO-IP)结果显示带有Flag标签的ELF4在以Flag作为CO-IP抗体时可以下拉野生型CEBPA,提示CEBPA与ELF4在细胞中存在相互结合。在细胞水平,敲除Molm13细胞系的CEBPA和ELF4后检测72h细胞增殖,我们发现两个基因都没有敲除的阴性对照组(NC-RFP+NC-Puro组)细胞增长为0h的3.06倍,仅敲除CEBPA组(CEBPAsg3+NC-puro:1.82倍)细胞增殖明显慢于阴性对照组(P<0.0001),而敲除CEBPA和ELF4组的细胞增长倍数(CEBPAsg3+ELF4sg3:2.93 倍、CEBPAsg3+ELF4sg5:2.87 倍)明显快于敲除 CEBPA组(P<0.0001)。我们用CEBPAsg8重复上述实验也得到了相似的结果,结果提示敲除ELF4能够部分解除敲除CEBPA对Molm13细胞系的抑制增殖作用。结论:本研究从细胞内定位、转录活性、细胞增殖等方面证明了白血病细胞中ELF4突变(ELF4D124T*21、ELF4R234*)是功能缺失的突变。另外,通过分子水平、蛋白质水平和细胞水平证明了 ELF4与CEBPA在白血病细胞中存在相互作用,为ELF4在CEBPA突变的AML发病机制的研究提供了线索。目的:回顾性分析239例新诊断的CEBPA双突变(double-mutated CEBPA,CEBPAdm)急性髓系白血病(AcCH-223191体外ute myeloid leukemia,AML)(非APL)患者的临床特征,并比较不同突变类型的CEBPAdm患者的基线特征和转归。方法:收集本中心于2011年7月至2021年12月新诊断的2211例AML(非APL)中239例符合纳入标准的CEBPAdm患者的临床资料及生存情况。根据是否含有bZIP 区域的突变,将其分为CEBPAdmnonbZIP组和CEBPAdmbZIP组。对这两组患者进行临床特征以及转归的比较分析。使用SPSS(21.0)软件对数据进行分析,GraphPad Prism(7.0)软件作图。结果:1.239例CEBPAdm AML患者中位年龄为40岁(IQR 30-48岁),中位随访时间为 42.43 个月(IQR 19.57-60.57 个月)。中位生存期(Overall survival,OS)和无事件生存期(Event-free survival,EFS)分别为 33.53 个月(IQR 17.20-59.13 个月)和 23.70 个月(IQR10.30-56.00 个月)。2.CEBPAdmbZIP组和CEBPAdmnonbZIP组患者的基线特征比较:CEBPAdmnonbZIP 组患者 GATA2 突变率为 0%,CEBPAdm bZIP 组为 30.29%,(P=0.034)。在治疗方面,两组诱导化疗后CR率及MRD阳性率没有统计学差异(P=1.000)。3.CEBPAdmbZIP组和CEBPAdmnonbZIP组患者的转归比较:OS与EFS均无统计学差异(OS:HR=2.027,95%CI 0.802-5.121,P=0.135;EFS:HR= 1.147,95%CI 0.501-2.626,P=0.746)。当 CR1-HSCT 视为删失事件时,CEBPAdmnonbZIP 组患者 OS 为 16.63 个月(IQR7.67-34.87 个月),CEBPAdmbZIP 组患者 OS 为 27.27 个月(IQR11addiction medicine.08-56.97 个月)(HR=3.132,95%CI 1.223-7.979,P=0.017),EFS 没有统计学差异(HR=1.437,95%CI 0.627-3.293,P=0.391)。R/RAML 患者中CEBPAdmnonbZIP 组患者 OS 为 22.93 个月(IQR7.67-23.13 个月),CEBPAdmbZIP组患者 OS 为 25.55 个月(IQR16.95-40.87 个月)(HR=2.881,95%CI 1.021-8selleckchem Barasertib.131,P=0.046)。结论:CEBPAdm患者预后良好。CEBPAdmnonbZIP组患者GATA2突变发生率低,当CR1-HSCT被认为是删失事件时,CEBPAdmnonbZIP患者OS较短,但病例数有限,未来需要扩大样本量后进一步验证。

目的 观察尤瑞克林联合阿替普酶治疗急性脑梗死的疗效及对脑血管储备功能的影响。方法 选取2020年3月—2022年3月重庆市梁平区人民医院收治的急性脑梗死患者120例，根据随机数字表法分为观察组(n=60)和对照组(n=60)。在基础治疗基础上，对照组给予阿替普酶静脉溶栓治疗，观察组在对照组基础上联用尤瑞克林治疗，2组患者均持续治疗14 d。比较2组临床疗效，治疗前后血小板活化标志物[α颗粒膜糖蛋白(CD62p)、溶酶体颗粒膜糖蛋白(CD63)、血小板计数(PLT)、血小板体积(MPV)]、不同途径[花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)]对血小板的抑制情况、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、脑血管储备功能[血流速度(MFV)、屏气指数(PI)、搏动指数(BHI)]及不良反应。结果 观察组治疗总有效率为96.67%,高于对照组的80.00%(χ~2=8.086,P=0.004);治疗14 d后，2组CD62p、CD63水Human papillomavirus infection平较治疗前降低，PLT、MPV水平较治疗前升高，且观察组CD62p、CD63水平低于对Stem Cells & Wnt抑制剂照组(P均<0.01),PLT、MPV水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05);2组AA及ADP对血小板抑制情况均较治疗前提升，且观察组高于对照组(P均<0.01);2组NIHSS评分均较治疗前降低，且观察组低于对照组(P<0.01);2组MFV、BHI均较治疗前升高，PI较治疗前降低，且观察组升高或降低的幅度大于对照组(P均<0.01);观察组与对照组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(5.00%vs. 3.33%,χ~2=AY-22989研究购买0.209,P=0.648)。结论 尤瑞克林联合阿替普酶治疗急性脑梗死效果显著，可有效改善CD62p及CD63的表达，明显改善血小板活化、聚集的抑制情况及脑血管储备功能，且安且性较好，值得推广。

植物MYB转录因子在植物防卫反应过程中发挥重要作用，番茄LeMYB330是与根结线虫效应蛋白MiPDCD6互作的靶标蛋白。本研究利用在线软件CRISPR-GE (http://skl.scau.edu.cn/)设计了番茄LeMYB330基因编辑双靶点，在番茄LeMYB330S63845说明书基因第3外显子区域找到彼此相距124 bp的2个靶点，分别为TG1:5′-ATGCAACAGTGGTACAACTGAGG-3’和TG2:5′-寻找更多GGTGGTCAAGAAGbiological feedback controlTTGTATGAGG-3’。将靶点T1和靶点T2的sg RNA表达盒进行Golden Gate克隆连接到pYLCRISPR/Cas9Pubi-H双元表达载体，成功获得CRISPR/Cas9重组双元载体(pCas9-MYB330T1T2)。利用农杆菌介导的遗传转化将重组载体转入‘新金丰一号’番茄愈伤组织，经潮霉素抗性筛选获得共计50株CRISPR/Cas9突变番茄植株。番茄转基因后代测序结果表明,有3株阳性植株发生突变,由此成功构建了番茄LeMYB330突变体。试验结果可为加快番茄LeMYB330功能基因资源的开发利用提供有力的理论与方法支持。