ALK抑制剂

目的 探讨大麻素2型受体(CB2)在正畸过程中对小鼠正畸牙移动(OTM)速率和压力侧牙周组织改建的作用。方法 筛选CB2~(-/-)和同窝WT型各30只雄性小鼠,6周龄时建antibiotic-related adverse events立牙齿移动模型,建模时间分别为0、3、7、1IACS-0107594、21 d(n=6)后取材,经体视显微镜测量牙移动距离;HE染色观察根压力区牙周组织变化;TRAP染色统计根压力区破骨细胞数量;免疫组织化学染色观察根压力区基质金属蛋白酶-9(MMP-9)阳性单核细胞和多核细胞的数量变化。结果 正畸牙移动距离测量结果显示,在21 d内,随着时间延长,牙齿移动距离逐渐增加,且3、7、14、21 d时CB2-/-组牙齿移动距离均较WT小鼠增加;HE染色显示OTM第14天时CB2~(-/-)小鼠压力区牙周膜间隙宽度大于WT小鼠(P <0.000 1);TRAP染色显示14 d时,在第一磨牙远中根压力区硬骨板处,CB2~(-/-)小鼠的破骨细胞数量大于WT小鼠(P<0.001);MMP-9免疫组织化Crizotinib溶解度学染色显示OTM 14 d时,在压力区牙周膜区域,CB2~(-/-)小鼠的MMP-9(+)单核细胞和MMP-9(+)多核细胞数量均大于WT小鼠(P<0.05)。结论CB2可加速正畸力作用下牙齿移动速率。CB2缺失加速正畸牙移动是通过加速牙移动过程中压力侧骨吸收实现的。

目的 探究莪术油是否通过抑制铁死亡减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化及作用机制。方法 40只雄性C57BL/6小鼠分为对照组、模型组和莪术油低、高剂量（3.25、13.00 mg/kg）组。小鼠气管插管注射博来霉素（3 mg/kg）制备肺纤维化模型，造模7 d后开始给药，给药组连续14 d隔日ip莪术油。给药结束后，通过各组小鼠体质量和肺干湿质量比评估小鼠一般情况；采用苏木素-伊红（HE）和Masson染色观察肺组织病理变化；检测血清中炎症因子水平和肺组织中羟脯氨酸（hZD1839体内实验剂量ydroxyproline,HYP）、氧化应激水平；Western blotting检测肺组织中肺纤维化和铁死亡相关蛋白表达。结果 与模型组比较，莪术油组小鼠体质量增长（P<0.05），肺水肿程度减轻，肺组织损伤情况好转，胶原纤维沉积减少；肺组织氧化产物丙二醛（malondialdehyde,MDA）及HYP水平减少（P<0.05、0.01），还原酶谷胱甘肽（glutathione,GSnarrative medicineH）活性增加（P<0.05）；血清中炎症因子水平明显降低（P<0.01）；肺组织纤维化相关蛋白I型胶原蛋白（collagen I）、α-平滑肌肌动LGX818 NMR蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）和波形蛋白（vimentin）表达下调（P<0.05、0.01），谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase4,GPX4)蛋白表达上调（P<0.01），转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TFR1)和二价金属转运蛋白1(divalent metal transporter 1,DMT1)蛋白表达下调（P<0.05、0.01）。结论 莪术油能够通过抑制铁死亡，改善氧化应激，抑制炎症水平，减轻博来霉素诱导的小鼠肺纤维化。

目的:通过观察啄治法联合益气排脓汤加减治疗肺胃蕴热型慢乳蛾的临床疗效,并与单纯口服益气排脓汤治Brain-gut-microbiota axis疗及啄治法治疗的受试者进行对比,分析内服中药与外用啄治法联合应用及单独应用的优缺点,为肺胃蕴热型慢乳蛾的临床治疗拓展思路,提供参考依据。方法:于云南省中医医院耳鼻咽喉科门诊选取符合西医诊断为慢性扁桃体炎且中医辩证为肺胃蕴热型慢乳蛾伴扁桃体Ⅱ度或Ⅱ度以上肥大的90例患者,随机分为中药啄治联合组、中药组以及啄治组共3组,各组均30例患者,治疗2个疗程。统计各组临床疗效,对各组治疗前后中医证候和体征的积分变化情况进行对比分析,评价中医内治与外治法结合及单独运用治疗肺胃蕴热型慢乳蛾的临床疗效及各自的治疗优势。结果:1.资料均衡性分析:三组受试者在性别、年龄、病程、治疗前单项症状积分及治疗前总积分等方面比较,差异无统计学意义(P值均>0.05),具有可比性。2.临床疗效分析:中药啄治联合组临床治疗总有效率为91.9%,中药组临床治疗总有效率为72.7%,啄治组临床治疗总有效率为70.6%;各组在临床治疗总有效率方面比较,差别具有显著性差异(P<0.001);其中,中药组和啄治组临床治疗总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3.症状体征积分对比:(1)治疗前后各组单项症状积分进行比较,差异具有统计学意义(P值均<0.05);(2)治疗后各组中医症状体征总积分进行比较,差别具有显著性差异(P<0.001);其中,中药组与啄治组治疗后总积分进行比较,差PI3K/Akt/mTOR抑制剂异无统计学意义(P>0.05)。4.积分下降幅度比较:(1)各组治疗后总积分下降幅度比较,差别具有显著性差异(P<0.001);其中,中药组与啄治组治疗后总积分下降幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05);(2)各组在治疗咽痛、扁桃体分泌物、口臭三方面积分下降幅度相比较,差别具有显著性差异(P值均<0.001);在治疗扁桃体充血肿大、咽干咽痒、夜间打鼾、异物感及大便方面积分下降幅度相比较,差异有统计学意义(P值均<0.05);在治疗咽后壁滤泡增生、淋巴结肿大方面积分下降幅度相比较,差异无统计学意义(P值均>0.05)。结论:1.啄治法与益气排脓汤联合治疗肺胃蕴热型慢乳蛾的临床疗效显著优于单纯内服中药及外用啄治法.单纯口服益气排脓通的临床总有效率与单纯使用啄治法治疗的临床总有效率无明显差异性,但两种治疗方法各自存在不同的优势。2.各组的治疗优势:(1)啄治法联合益气排脓汤在治疗咽痛Bucladesine使用方法、扁桃体充血肿大、夜间睡眠打鼾、扁桃体分泌物、咽干咽痒、咽部异物感、口臭及大便方面疗效显著优于单纯口服益气排脓汤与啄治法;(2)在治疗咽干咽痒、咽部异物感及大便方面,口服益气排脓汤的临床疗效明显优于使用啄治法。(3)在治疗扁桃体肿大、夜间睡眠打鼾方面,啄治法的临床疗效明显优于口服益气排脓汤。(4)在治疗咽痛、扁桃体分泌物、口臭、咽后壁滤泡增生及颈部淋巴结肿大方面,口服益气排脓汤的临床疗效与啄治法比较无明显差异;(5)在治疗咽后壁滤泡增生及颈部淋巴结肿大方面,三种治疗方案的临床疗效无明显差异。3.外用啄治法与口服益气排脓通联合治疗肺胃蕴热型慢乳蛾,疗效显著,无明显不良反应及毒副作用,啄治无需麻醉,操作简便,二者联合应用能克服单纯内服中药及外用啄治法的不足,值得临床推广应用。

通过网络药理学与生物信息学及实验验证相结合的方法来阐明榅桲总多酚(total polyphenols of Cydonia oblonga Miller， TPCOM)抗肾癌的作用机制。通过网络药理学筛选榅桲活性多酚类化合物和肾癌相关的靶点。通过对gene expression omnibus database (GEO)数据库中肾癌患者肿瘤组织和正常组织RNA测序数据进行差异表达基因SBE-β-CD细胞培养分析，结合网络药理学预测结果和差异表达基因分析获得TPCOM作用于肾癌的核心基因，结合生存分析找出能够影响患者生存的关键靶点，进行京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）和基因本体 (Gene Ontology， GO)富集分析。采用20 μg·mL~(-1)至640 μg·mL~(-1) TPCOM处理786-O和Renca细胞进行细胞增殖与活性( cell counting kit-8，CCK-8)实验，40、80、160 μg·mL~(-1) TPCOM处理肾癌细胞，检测TPCOM对肾癌细胞迁移和肾癌细胞中蛋白激酶 B( protein kinase B，Akt)，雷帕霉素靶蛋白( mammalian target of rapamycin，mTOR)和磷脂酰肌醇3-激酶 (pmesoporous bioactive glasshosphoinositide 3-kinase， PI3K) 信号通路相关蛋白表达水平的调控作用。通过网络药理学预测获得8个榅桲多酚类活性化合物，通过生存分析获得TPCOM发挥抗肾癌作用的15个显著影响患者生存的肾癌差异表达基因。KEGG和GO分析结果显示以上15个靶点主要与PI3K/AKT信号通路，细胞迁移和增殖等生物过程有关。结果显示TPCOM能够抑制786-O和Renca细胞的增Rapamycin体内殖，IC_(50)值分别为121.4、137.9 μg·mL~(-1)。TPCOM能够抑制786-O和Renca细胞的迁移，能够抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路。榅桲总多酚可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活从而抑制肾癌细胞的增殖和迁移来发挥抗肾癌作用。该研究为新疆天然产物榅桲的抗肿瘤作用研究提供了一定的研究基础，对进一步推动新疆榅桲的开发和利用具有拓展和补充的意义。

背景青光眼是一种常见的致盲性眼病,随着疾病进展可引起进行性、不可逆性的视神经病变,导致不同程度的视力下降及视野缺损,如果没有采取及时、有效的干Staurosporine预措施,甚至会发展到失明的状态,严重影响患者的生活质量。该病的主要发病年龄为40-80岁,随着老龄化人口的增多,本病的患病人数亦在不断增加。青光眼发病的影响因素有很多,如年龄、季节、性别、高眼压、生活习惯、家族史、高度近视、糖尿病及心血管疾病病史等。其中,病理性眼压增高是疾病进展的关键决定因素,也是目前发现的唯一可改变的危险因素。眼压越高、高眼压持续的时间越长,导致视神经损害的可能性越大。因此,目前青光眼治疗的关键是通过降低眼压来减缓视神经损害的程度,达到保存视功能的目的。而眼压的调控与房水循环息息相关,因此,我们可以通过调节房水循环的功能来调控眼压,进而延缓视神经病变的进展。目前,通过药物、激光或手术等方式增加房水排出或减少房水生成是降低眼压的主要手段。近年来,一种新兴的手术方式——微创青光眼手术作为一种安全、有效的治疗手段被越来越多的应用于轻、中度青光眼患者的治疗。前期我们团队结合了已上市的一些微创青光眼手术装置的优点,研究出一种新的微创青光眼手术装置——新型微创内路小梁切除装置,但该装置的可行性目前尚无定论,还需我们进一步的实验研究。目的新型微创内路小梁切除装置在应用于临床前需在动物模型上进行临床前的实验研究以评估其可行性。在本研究中,我们拟用离体猪眼灌注模型进行相关实验,对比新型微创内路小梁切除装置与一种已在临床上应用的小梁切除装置–KDB小梁网切除刀在眼压及外引流速率方面的影响,以评估该装置应用于临床作为可选择的青光眼治疗方案的可行性。研究方法1.探究新型微创内路小梁切除装置对眼压的影响取新鲜离体猪眼球8只,按照眼睑及GDC-0973体内实验剂量附属器分为左右眼,并将其分为两组,左眼为新型微创内路小梁切除装置组(n=4),右眼为KDB小梁网切除刀装置组(n=4)。用微量注射泵以2.5ml/h的灌注速率对两组离体猪眼连续灌注1小时,利用压力传感器及心电监护仪实时监测眼压变化,稳定时的眼压即为基线眼压。然后使用新型微创内路小梁切除装置及KDB小梁网切除刀分别第一次去除两组猪眼上方90°的小梁网组织,每分钟记录一次眼压变化直至稳定。1小时后,再次使用两种微创手术装置第二次去除90°的小immune monitoring梁网组织,继续监测眼压变化。假设此时离体猪眼的巩膜外层静脉压为零,评估两种手术装置对于流出功能的影响。(根据Goldmann方程(Tian,Bet al 2006)计算)2.探究新型微创内路小梁切除装置对外引流速率的影响取新鲜离体猪眼球6只,按照眼睑及附属器分为左右眼,并将其分为两组,左眼为新型微创内路小梁切除装置组(n=3),右眼为KDB小梁网切除刀装置组(n=3)。使用新型微创内路小梁切除装置及KDB小梁网切除刀分别去除上方90°小梁网,通过单色荧光染料灌注造影测得的平均荧光强度评估外引流速率。结果两种手术装置均可在一定程度上降低眼压,增强流出功能,提高外引流速率,这种作用在第一次手术时更显著。在第一次手术切除部分小梁网组织后,微创内路小梁切除装置组的眼压由基线时的22.25±0.88mm Hg降至9.55±0.55mm Hg,流出功能由基线时的0.11±0.00增强至0.28±0.02,而KDB小梁切除刀装置组眼压由基线时的23.00±0.91mm Hg降至10.00±1.47mm Hg,流出功能由0.11±0.00增强至0.27±0.02。而第二次切除部分小梁网组织仅导致了轻度的眼压下降及流出功能增强,且两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。将德克萨斯红染料在一定重力下对两组处理过的离体猪眼进行灌注后,可以观察到两组均有一定程度的荧光外流,且这种荧光外流随观察时间的延长会表现得更加显著,但两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在离体猪眼灌注模型中,使用新型微创内路小梁切除装置与KDB小梁网切除刀装置分别进行小梁网切除后,两组装置表现出相似程度的眼压降低及流出功能增强,或可说明微创内路小梁切除装置是一种可行且有效的青光眼治疗手术方式。

背景:目前我国结直肠癌的复发率和死亡率居高不下,其中最重要原因是癌细胞对化疗药物的耐药性。顺铂作为结直肠癌治疗的一线抗癌药物,近年来由于耐药性的产生导致患者的治疗效果随时间的延长而逐渐减弱甚至无效,增强结肠癌顺铂敏感性可成为降低结肠癌患者死亡率的有效策略。罗哌卡因被证实可以抑制肿瘤细胞增殖,但其是否能够增敏结肠癌对顺铂的敏感性目前尚不清楚。目的:体外实验探究罗哌卡因是否能够通过诱导细胞铁死亡来增强人结直肠癌细胞的顺铂敏感性。方法:采用浓度递增法将LOVO细胞暴露于顺铂中诱导顺铂耐药株LOVO/DDP形成。光学显微镜下观测细胞形态,Cell Counting Kit-8检测细胞活力;平板克隆、Transwell、细胞划痕和Annexin V/PI流式细胞术分别检测细胞增值、迁移和凋亡;JC-1和ROS检测试剂盒测定罗哌卡因、顺铂单独及联合作用下细胞线粒体膜电位和活性氧水平。Western-blot和免疫荧光测定细胞迁移和铁死亡相关蛋白的表达,并通过亚铁离子荧光染色评价罗哌卡因联合顺铂对人结肠癌细胞铁死亡的影响。结果:光学显微镜下观察LOmedia analysisVO与LOVO/DDP细胞形态存在差异。与对照组相比,LOVO细胞活力随顺铂浓度增加显著下降,LOVO/DDP细胞活力下降平缓,联合罗哌卡因处理后,LOVO/DDP细胞活力较顺铂单独作用明显下降(P>0.05)。与单独顺铂治疗组相比,罗哌卡因联合顺铂处理后,LOVO细胞和LOVO/DDP细胞增殖、迁移明Belnacasan临床试验显受限,罗哌卡因增强了顺铂诱导的细胞凋亡,活性氧的增多以及线粒体功能障碍。进一步检测铁死亡相关蛋白的表达,结果显示罗哌卡Ceralasertib研究购买因联合顺铂组通过下调GPX4,SLC7A11的表达促进LOVO细胞以及LOVO/DDP细胞铁死亡。结论:罗哌卡因能够增强已耐药人结肠癌细胞对顺铂的化学敏感性,其作用可能是通过促进癌细胞铁死亡实现。

随着中国饮酒人数逐年增加，酒EZH1/2抑制剂精性肝病(ALD)及相关的肝脏代谢性疾病患病率逐年递增，严重威胁公众健康。肝脏不仅是酒精的主要代谢器官，也是酒精损伤的重要靶器官，酒精诱导产生的活性氧(ROS)及氧化应激是其致肝损伤的重要机制之一。铁死亡是一种新型的细胞死亡，其发生与ROS、脂质过氧化和铁代谢平衡密切相关。酒精在肝脏的代谢过程中可诱导产生大量ROS，引起铁离子代谢紊乱，使氧化脂膜上多不饱和脂肪酸产生过多脂质过氧化物，破坏生物膜，诱导铁死亡。酒精诱导的铁死亡，使肝脏细胞部分死亡，出现脂质累积且无法及时代偿，对肝脏造成损伤，导致ALD。本文主要从线粒体产生ROS诱导脂Alisertib质过氧化、胱氨酸/谷氨酸逆转运受体(system X_(C-))和谷胱subcutaneous immunoglobulin甘肽/谷胱甘肽过氧化物酶4(GSH/GPx4)系统及铁代谢等角度综述ALD中铁死亡机制的研究进展，为调控铁死亡防治ALD提供新思路。

目的:探讨脑脊液神经元特异性烯醇化酶(NSE)、肝素结合蛋白(HBP)、高迁移率族蛋白BVE-822-1(HMGB-1)对细菌性脑膜炎(BM)的诊断价值及这些指标与病情的相关性。方法:选取2018年2月至2020年8月本院神经外科收治的114例脑肿瘤术后2～3 d出现疑似细菌性颅内感染症状的患者，按照颅内感ICI 46474浓度染诊断标准分为BM组(32例)和无菌性脑膜炎组(82例)。比较两组临床资料以及脑脊液NSE、HBP、HMGB-1水平，分析BM的影响因素，比较不同病情BM患者脑脊液NSE、HBP、HMGB-1水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析脑脊液NSE、HBP、HMGB-1水平对BM及其病情严重程度的诊断价值。结果:两组脑脊液白细胞、蛋白质、多核细胞比例、糖、C反应蛋白(CRP)、血小板压积(PCT)、NSE、HBP、HMGB-1水平相比，差异有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归方程分析显示，将脑脊液白细胞、蛋白质、多核细胞比CAU chronic autoimmune urticaria例、糖、CRP控制后，脑脊液PCT、NSE、HBP、HMGB-1水平变化仍与BM有关(P<0.05);脑脊液HBP诊断BM的曲线下面积(AUC)为0.995,大于脑脊液NSE、HMGB-1的AUC(P<0.05);脑脊液NSE、HBP、HMGB-1联合评估BM病情的AUC最大，为0.984。结论:脑脊液NSE、HBP、HMGB-1水平异常高表达均与BM发病密切相关，联合检测或可为临床早期诊断及评估患者病情提供重要参考。

为了探究葫芦素B(Cucurbitacin B， CuB)的抗结肠癌活性，并明确铁死亡在CuB发挥抗癌作用中的关键作用及其分子机制。Neuromedin N本文将人结肠癌细胞HCT-116作为研究对象，评价了CuB的抗结肠癌活性，检测了铁死亡相关指标如细胞内铁离子浓度、谷胱甘肽(Glutathione， GSH)含量和乳酸脱氢酶(Lactatedehydrogenase， LDH)水平，并采用网络药理学分析、代谢组学分析、分子对接及分子动力学模拟，探究了CuB抑制结肠癌的作用机制。研究结果表明，CuB能显著抑制人结肠癌细胞HCT-116增殖，半数抑制浓度(IC_(50))是64.48nmol/L。此外，CuB可以降低细胞内GSH含量、促进总铁离子的积累和LDH的释放，并且铁死亡抑制剂Fer-1能够逆转CuB诱导的LDH释放。网络药理学分析和代谢组学分析结果指出，CuB抑制结肠癌的作用机制与铁死亡密切相关的谷胱甘肽代谢途径有关。随后，分子对接结果提示CuB能与谷胱甘肽代谢通路中的关键蛋白SLC7A11和GPX4分别以-4.819和-3.833的得分结合点击此处，分子动力学模拟技术表明CuB与SLC7A11的结合具有较好的结构稳定性、波动性以及能量稳定性。由此，本研究发现CuB可以通过诱点击此处导人结肠癌细胞HCT-116中铁死亡的发生来发挥抗癌作用。

目的 探讨富血小板血浆(PRP)能否通过促进糖尿病(DM)大鼠骨髓巨噬细胞(BMDMs)向M2型极化，从而诱导糖尿病大鼠脂肪干细胞(ADSCs)向成骨细胞分化，促进骨损伤愈合。方法 分离培养DM大鼠BMDMs和ADSCs,采用流式细胞仪对其进行鉴定；BMDMs极化分组为：对照组(PRP0%),PRP组(1%,5%,10%);ADSCs成骨分化antibiotic-loaded bone cement分组为：对照组(control, ADSCs, 2×10~5/mL,+同PRP组相同容积不含PRP血浆),ADSCs+BMDMs组(简称BMDMs组，2×10~5/mL,+不含PRP血浆),ADSCs+10%PRP组(简称PRP组，加入PRP使培养液中含有10%PRP),ADSCs+BMDMs+10%PRP组(简称BMDMs+PRP组)。Transwell小室法鉴定极化的BMDMs促进ADSCs侵袭；RT-qPCR和Western blot鉴定BMDMs极化和ADSCs的成骨分化以及相关基因和蛋白的表达；免疫荧光检测成骨蛋白Osterix的表达；DM大鼠股骨干骺端构建3 mm×5 mm的骨缺损为骨损伤模型，将大鼠分为：对照组、ADSCs+巨噬细胞清除剂CLP组(简称ADSCs组)、ADSCs+BMDMs组(简称BMDMs组，无CLP注射),ADSCs+CLP+PRP组(简称PRP组),ADSCs+PRP组(简称BMDMs+PRP组，无CLP注射)。构建模型前48 h尾静脉注射CLP(5 mL/kg),术后每周注射2次，连续8周；在骨缺损处局部注射ADSCs(1×10~7/mL)与藻酸盐凝胶混合物，骨缺损处PRP连续治疗4次，每次间隔2周，每次注射500μL;采用micro-CT重建并定量分析DM大鼠骨缺损修复。结果 ADSCs阳性标志物Sca-1和CD29纯度达85.4%和99.9%,BMDMs阳性标志物CD11b和F4/80纯度达94%和90%;与对照组相比，随着PRP浓度的提高更多，BMDMs向M2型极化的蛋白和基因表达增高(P<0.05);与PRP组相比，BMDMs+PRP组ADSCs迁移的数量显著增多(P<0.05);与其他组相比，BMRTX1133采购MDMs+PRP组ADSCs的成骨分化活性更强，成骨蛋白和基因的表达显著提高(P<0.05);与其他组相比，BMDMs+PRP组的骨体积/组织体积(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)和厚度(Tb.Th)显著提高(P<0.001)。结论 体外实验表明，PRP通过促进BMDMs向M2极化从而促进ADSCs迁移和成骨分化；体内实验表明，BMDMs+PRP能够显著促进ADSCs向成骨细胞分化，加速骨形成，进而改善糖尿病骨缺损愈合不良的问题。