ALK抑制剂

目的 通过生物信息学从铁死亡角度探讨溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）活动期和缓解期的异同发TB and HIV co-infection病机制，并筛选可能干预UC的天然药物，为UC的治疗开辟新途径。方法 在GEO数据库中检索与UC相关并符合筛选条件的数据集，ZD1839临床试验进行limma差异分析，分别获得UC活动期、UC缓解期的差异表达靶点。在FerrDb平台收集与铁死亡相关的靶点。构建铁死亡与UC差异表达共同靶点的蛋白互作（protein-protein interaction network,PPI）网络。通过R软件对与铁死亡相关的UC活动期和缓解期的靶点分别进行基因本体（gene ontology,GO）和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of gDS-3201分子量enes and genomes,KEGG）富集分析。利用CMap平台筛选干预不同时期UC的天然活性成分，并通过TCMSP找到天然活性成分所来源的中药。结果 GEO数据库筛选出GSE53306、GSE38713、GSE11223数据集，从UC活动期和缓解期样本分别筛选出差异表达靶点3985个和659个。将收集得到的388个铁死亡相关靶点分别与UC不同时期相关靶点取交集，导入STRING数据库，得到与铁死亡相关的UC靶点间的PPI，筛选到10个核心基因。富集分析显示，UC活动期与刺激的反应相关性较高，UC缓解期与细胞解毒的反应、过氧化物的代谢相关性较高。神经退行性疾病-多种疾病是UC活动期与缓解期的共同信号通路。CMap平台筛选结果显示，大豆苷元、芦丁、胡椒碱、白藜芦醇、杨梅素、苦参碱、槲皮素、黄体酮、染料木素、大黄素为最有可能治疗UC的天然活性成分，且这些活性成分广泛来源于多种中药，分子对接结果显示天然活性成分与其对应的靶点结合能均<5.0 kcal/mol。结论 IL-6、IL-1β、CD44是与UC最相关的靶点，可通过神经退行性疾病、脂质和动脉粥样硬化等信号通路影响UC病情严重程度。大豆苷元、芦丁、胡椒碱等10种天然活性成分可能成为治疗UC的关键药物，为UC的临床治疗开辟新途径。

背景E-cadherin(E-cad)是一种分子量为120k D的跨膜糖蛋白,是钙粘蛋白经典家族中的一员,也是细胞黏附分子,分布在细胞表面及细胞之间的连接处,已被证明在胚胎发育和成人内环境稳态中发挥重要作用。其表达的缺失可导致细胞连接的破坏,在肿瘤组织中缺失表达提示肿瘤预后差、肿瘤细胞的浸润和转移概率高~([1–3])。浆样树突细胞是树突状细胞的一个亚medical therapies群,具有浆细胞样形态和丰富的内质网,通常存在于淋巴器官,如淋巴结和扁桃体。特征为在自身免疫性疾病或病毒感染的背景下,分泌大量的干扰素Ⅰ(Interferon-I,IFN-I)和其他促炎细胞因子促进先天免疫和获得性免疫应答~([4,5])。最近的一项研究显示,E-cad在母细胞浆样树突细胞肿瘤累及皮肤的病例中有强而一致的表达,并证实恶性p DCs肿瘤细胞通过E-cad的表达和信号转导,弱化IFN-I信号,从而导致肿瘤免疫微环境贫瘠~([6])。E-cad是病理学界公认的上皮细胞的标记,表达于皮肤及食道、胃、肠道、胆囊等组织器官的腺上皮。也是各种上皮来源的癌细胞的标记物,在各个系统的多种肿瘤组织广泛表达,临床诊断中E-cad常用于腺癌和间皮瘤,乳腺导管癌和乳腺小叶癌的鉴别诊断。对于E-cad在淋巴组织中表达的研究较少,部分研究表明淋巴组织有时呈弱染色,但并不清楚表达于哪种细胞。Luisa Lorenzi等人通过双重染色证明反应性淋巴结和扁桃体中大多数p DCs呈E-cad阳性,而正常骨髓中散布的p D购买AMG510Cs呈E-cad阴性~([7])。在淋巴血液系统疾病中,Eike Burandt等人利用组织芯片研究,纳入了38例霍奇金淋巴瘤及39例非霍奇金淋巴瘤E-cad的免疫组化表达,但并没有进行更详细的分类,结果显示霍奇金淋巴瘤中E-cad的表达率为26.3%(10/38),而非霍奇金淋巴瘤中为0~([7])。Wang Liangzhe等人研究显示E-cad在浆细胞骨髓瘤(MM)中的阳性表达率为46.34%,且E-cad阴性患者的总生存率低于E-cad阳性的患者。E-cad阳性骨髓瘤细胞和p DCs之间的嗜同性相互作用被证明可以诱导TLR9降解,然后抑制p DCs产生IFN-I~([8–10])。目的1、E-cadherin在多种淋巴组织增殖性疾病中的表达强度及表达率,分析其在日常淋巴组织增殖性疾病诊断中的价值。2、对比E-cadherin及CD123对母细胞浆样树突细胞的标记,观察不同疾病中p DC的分布及强度,揭示其在淋巴组织增殖性疾病发生发展中的作用。方法本课题在广州医科大学附属第二医院病理科病例库中收集了2018年至今的13种常见的淋巴瘤,4种反应性淋巴组织疾病,以5例正常骨髓及5例反应性淋巴结作为对照,对这些病例的组织进行E-cadherin及CD123染色。由2位病理医师进行双盲阅片,根据染色强度和组织中染色的细胞比例,确定四种表达强度。染色强度(i):无染色为0分,黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分。免疫组织化学评分(总分300分)=∑(PI×I)=(黄色细胞百分比×1)+(棕黄色细胞百分比×2)+(棕褐色细胞百分比×3)。表达强度:阴性(评分<10分),弱阳性(10分≤评分<30分),中等阳性(30≤评分<60),强阳性(评分≥60分)。分别记录每个病例E-cad及CD123的免疫组织化学评分,对比不同种类之间的淋巴组织增殖性疾病E-cad及CD123的表达。结果1、E-cadherin在实验的淋巴组织反应性疾病、成熟B细胞淋巴瘤及成熟T细胞淋巴瘤三组病例中均有阳性表达Gefitinib-based PROTAC 3研究购买,染色定位与CD123一致,且染色强度在多数情况下高于CD123,可以作为新的浆样树突细胞染色标记。2、E-cadherin及CD123所标记的浆样树突细胞总是分布于副皮质区,且与高内皮静脉关系紧密,也常分布在病变的坏死区周围,多核巨细胞周围,在边缘区淋巴瘤中可以沿边缘带呈带状分布。3、浆样树突细胞的数量和分布在各种淋巴组织增殖性疾病中不同,在实验的三个诊断组中,淋巴组织反应性疾病组E-cadherin的阳性率及免疫组织化学评分均高于成熟B细胞淋巴瘤组及成熟T细胞淋巴瘤组(差异具有统计学意义),而成熟B细胞淋巴瘤组与成熟T细胞淋巴瘤组无统计学差异。4、本实验中E-cad表达较多的疾病包括Castleman病、组织细胞坏死性淋巴结炎、经典型霍奇金淋巴瘤、血管免疫母T细胞淋巴瘤及NK/T细胞淋巴瘤等。这些反应性病变或淋巴瘤部分发病机制尚不明确,但几乎都与病毒感染和自身免疫性状态相关,组织学上常表现出混合炎细胞浸润模式。5、CD123在所有滤泡性淋巴瘤和个别弥漫大B细胞淋巴瘤、经典型霍奇金淋巴瘤等病例的血管内皮表达,而相应的E-cad则仅标记出浆样树突细胞。研究结论E-cadherin在淋巴组织反应性疾病、成熟B/T细胞淋巴瘤的多种淋巴组织增殖性疾病中都有表达,表达于浆样树突细胞。不同的疾病浆样树突细胞数量和分布模式不同,淋巴组织反应性疾病组表达最高,通常分布于副皮质区高内皮静脉附近,病变的坏死区周围,多核巨细胞周围,在边缘区淋巴瘤中可以沿边缘带呈带状分布。我们的实验拓宽了E-cad在淋巴组织疾病中的表达谱的研究,但淋巴组织增殖性疾病种类众多,我们希望未来对更多的病种、病例和更系统的亚型进行E-cad的染色,观察其中的更多规律。

目的:阐明德都红花-7味散及木犀草素通过调控CCR1、DNMT1抑制CCl_4所致肝纤维化的影响。方法:72只C57BL/6雄性小鼠,按体重随机分为空白组、模型组、木犀草素低剂量组、木犀草素高剂量组、蓝盆花组、德都红花-7味散组,每组12只。除空白组外,其余组采用CCl_4腹腔注射建立肝纤维化模型,其余组给予相应药物灌胃4周,4周后取肝组织。ELISA法检测血清中相关含量,HE染色观察肝组织的炎症活动度,Masson染色评估肝组织胶原面积,Western blot检测CCR1、DNMT1蛋白表达。结果:1.ELISA法:与模型组相比,各给药组DNMT1、a-smA、III型前胶原的血清含量表达明显减低,CCR1血清含量的表达明显升高,具有统计学意义(P<0.05selleck化学)。2.HE染色:模型组多个肝细胞体积明显增大形态不规整,小叶结构紊乱、增生纤维条索交叉形成纤维间隔;各给药组肝细胞体积有所增大,其余症状明显轻于模型组。3.Masson染色:模型组中央静脉周围及汇管区胶原纤维增生,小叶结构紊乱,胶原纤维连接;各给药组与模型组相比,可见少量蓝染的胶原纤维。4.WLEE011体外estern blot法:与空白组比较模型组DNMT1、a-smA、Collagen Ⅰ表达显著上调,CCR1表达降低Cup medialisation,具有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,各给药组DNMT1、a-smA、Collagen Ⅰ表达降低,CCR1升高,具有统计学意义(P<0.05)。结论:1.德都红花-7味散、蓝盆花、木犀草素减表达轻CCl_4引起肝纤维化的保护作用,其通过CCR1、DNMT1、a-smA、Collagen Ⅰ蛋白,抑制或延缓肝纤维化。2.对肝癌表达的基因,在肝纤维化上发现DNMT1、CCR1的表达对诊断有意义,单成份、药材与成药对纤维化有显著的调解作用,为进一步诊疗预防癌症的发生,值得进一步研究。

背景:急性主动脉夹层(Acute aortic dissection,AAD)是临床常见的紧急且危重的心血管疾病之一,常伴有灌注不足综合征、低氧血症、心包及胸腔积液、急性肾功能不全等严重的并发症。低氧血症(Hypoxemia,HXA)是AAD常见的并发症之一,HXA的发生可进一步加重AAD患者病情,影响患者的预后。筛选引起AAD合并HXA相关的临床危险因素,探索引起炎症反应的相关指标,尝试阐述相关炎症反应,构建AAD发生HXA的列线图预测模型,有助于提前预警并进行早期干预,对临床指导和科研实验提供思路。目的:通过对急性主动脉夹层患者住院期间的临床数据及特点进行统计分析,筛选引起HXA相关的独立危险因素,构建HXA列线图预测模型,初步阐明引起HXA的可能发生机制,为早期预防及预后提供临床参考。方法:回顾性分析广州医科大学附属惠州医院心血管医学中心2016年12月至2022年10月收治的348例经胸主动脉CTA确诊AAD患者的临床资料。根据纳入排除标准,将所得的患者按住院期间(排除术后24小时内)的最低氧合指数分为低氧组(氧合指数≤200mm Hg)和非低氧组。研究通过将可能相关的危险因素指标纳入数据库后进行单因素分析,筛选出可能有意义的危险因素,再进行多因素Logistic回归分析,将所得到的独立危险因素用于建立回归方程,构建列线图预测模型,利用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC曲线)以及拟合优度(Hosmer-Lemeshow)检验评估模型的区分度和校准度,进行临床有效性检验,同时用2022年10月-12月共28名本中心AAD患者临床资料进行模型的外部验证。最后,再送检获取的40名AAD患者(21例低氧vs19例非低氧)和20名体检健康人血浆标本,检测肝素结合蛋白、髓过氧化物酶、基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9和中性粒细胞弹性蛋白酶,分析各组间炎症因子表达的差异性。结果:1.所纳入AAD患者中HXA的发生率约为41.95%。2.多因素Logistic回归分析结果提示AAD患者的BMI(OR:0.120;95%CI:0.852～0.941;P=0.120)、吸烟史(OR:0.844;95%CI:1.249～4.327;P=0.008)、中性粒细胞计数(OR:0.502;95%CI:1.453～1.880;P<0.01)、CRP(OR:0.023;95%CI:1.003～1.021;P<0.01)、ALB(OR:-0.127;95%CI:0.825～0.941;P<0.01)是发生HXA的独立危险因素。3.根据筛选出的独立危险因素构建列线图预测模型,并进行区分度、校准度、临床SCH727965价格有效性的验证。预测模型ROC曲线下面积为0.887,Hosmer-Lemeshow检验显示χ~2=3.461(P>0.05),表明预测模型具有良好的校准度。DCA曲线中的阀概率为34%,临床净获益为65%。4.HBP在健康组、低氧组、非低氧三组间比较有统计学差异(P<0.05),MMP-2和MMP-9在健康组vs低氧组、健康组vs非低氧组间有统计学差异(P<0.05),但在低氧组和非低氧组间无统计学意义。结论:1.CRP、中性粒细VX-661体内实验剂量胞计数、BMI与吸烟是主动脉夹层患者住院期间发生HXA的独立危险因素,ALB是独立保护因素。2.研究建立的Logistic回归模型对主动脉夹层患者住院期间发生HXA预测效能较高,可视化列线图的区分度、校准度和临床有效性良好,对临床诊断预后有一定的指导意义。3.HBP、MMP-2、MMP-9可能Fetal & Placental Pathology参与早期炎症级联反应,对后期临床指导、模型构建及基础研究有着参考意义。

目获悉更多的 探讨急性髓系白血病(AML)患者miR-363表达与其临床特征及靶基因的关系。方法 下载TCGA数据库中AML患者的miRNA、RNA表达谱及临床数据，按照miR-363表达水平由高到低排序，将前50%设为高表达组(n=81),后50%设为低表达组(n=81),比较两组患者生存曲线及年龄差异；利用Omisc软件，采用Pearson相关性分析筛选与miR-363表达相关的靶基因。将2021年12月至2022年12月在我院诊治的52例AML患者纳入研究，采用RT-qPCR技术检测患者骨髓miR-363表达水平，按照表达水平由高到低排序，将前50%设为高表达组(n=26),后50%设为低表达组(n=26),比较两组患者初诊白细胞计数、血小板计数、血红蛋白及血浆靶基因水平、年龄、性别及预后分层的差异。结果 TCGA数据库分析显示selleckchem IACS-010759，miR-363低表达组患者中位生存时间高于miR-363高表达组(822d vs 365d,P<0.05);miR-363高表达组高龄患者比例明显高于低表达组(54.32%vs 45.68%,P<0.05);共筛选出5 404个miR-363相关基因，KIAA1377相关性最高(rDisease biomarker=0.62,P<0.05)。miR-363高表达组高龄患者比例、预后不良患者比例、初诊白细胞计数≥50×10~9/L比例、血浆KIAA1377水平明显高于低表达组(均P<0.05);血小板计数、血红蛋白水平明显低于低表达组(均P<0.05)。结论 miR-363高表达与AML患者生存率降低、高龄、预后不良、初诊白细胞计数升高、血小板计数及血红蛋白水平降低有关，且KIAA1377可能是miR-363的靶基因之一。miR-363可能是AML基因治疗和预后评估的新靶点。

目的 分析靶向药物治疗联合化疗治疗恶性肿瘤的效果。方法 筛选2021年9月至2022年9月100例淄博市妇幼保健院收治的恶性肿瘤患者，采用随机数字表法分组，对照组以化疗方法治疗，观察组结合靶向药物（贝伐珠单抗注此网站射液）治疗、对比两组的疗效、肿瘤标志物水平、生活质量等指标。结果 观察组疾病缓解率高于对照组（P <0.05）；观察组患者治疗后癌胚抗原（CEA）,肿瘤细胞相关抗原-125（CA-125），肿瘤细胞相关抗原-153（CAin vitro bioactivity153）水平均低于对照组（均P <0.05）；观察组患者治疗后生理、心理、Talazoparib分子式躯体、社会生活评分均高于对照组（均P <0.05）；观察组患者各项生活质量评分均低于对照组（均P <0.05）；观察组患者治疗后CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+水平均优于对照组（均P>0.05）。结论 靶向药物结合化疗治疗恶性肿瘤，疾病控制效果好，利于患者生活质量及机体免疫力的提升。

目的：探究青蒿素通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路减轻哮喘气道炎症和气道重塑的分子作用机制。方法：50只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、OVA模型组、青蒿素低剂量组、青蒿素中剂量组、青蒿素高剂量组，每组各10只。OVA模型组、青蒿素低剂量组、青蒿素中剂量组、青蒿素高剂量组建立卵清蛋白（OVA）诱导大鼠哮喘模型，造模成功后，空白对照组、OVA组、青蒿素低剂量组、青蒿素中剂量组、青蒿素高剂量组每天给予尾静脉注射1.0 mL·kg~(-1)生理盐水、1.0 mL·k确认细节g~(-1)生理盐水、12.5 mg·kg~(-1)青蒿素、25 mg·kg~(-1)青蒿素、50 mg·kg~(-1)青蒿素，持续7 d。采用氯化乙酰胆碱法测定气道阻力；流式细胞术测定各组肺泡灌洗液中细胞数量、种类变化；苏木素-伊红（HE）染色法测定气道内皮组织形态变化；CytoTox 96法测定细胞凋亡情况；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体、白细胞介素(IL)-1β和IL-10含量表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组肺泡支气管组织p-PI3K/p-Akt磷酸化水平。结果：与空白对照组比较，模型组细胞总数、巨噬细胞总数、嗜酸性粒细胞总数、淋巴细胞总数、中性粒细胞总数明显提高（P<0.05）；HE染色显示大鼠气道黏膜水肿明显，炎症细胞大量浸润（P<0.05）；细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；炎性小体NLRP3、IL-1β、IL-10含量明显上升（P<0.05）；PI3K/Akt磷酸化水平显著增高（P<0.05）。与模型组比较，青蒿素低、中、高浓度干预后，细胞总数、巨噬细胞总数、嗜酸性粒细胞总数、淋巴细胞总数、中性粒细胞总数明显下降（P<0.05）；HE染色显示大鼠气道黏膜水肿程度减轻，炎症细胞浸润面积大幅减少（P<0.05）；细胞凋亡率明显降低（P<0.05）；炎性小体NLRP3、IL-1β、IL-10含量明显下降（P<0.05）；PGSKJ4I3K/Akt磷酸化水平显immune tissue著降低（P<0.05）。结论：青蒿素可显著抑制NLRP3炎症小体激活并减少细胞焦亡，降低炎性细胞表达，可减轻哮喘大鼠的气道炎症表现及气道重塑，可能与PI3K/AKT 磷酸化调控有关，可为青蒿素治疗支气管哮喘提供实验室见解及依据。

【背景】创伤指由机械性因素造成的组织结构破坏或功能障碍,进而引发一系列病理事件,如:炎症、血管破坏和细胞丢失等。组织愈合或损伤修复速度与程度取决于组织的类型和损伤程度,而对于一些特殊的组织,特别是再生能力有限的组织,很难通过自我修复能力进行损伤修复,如创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)。TBI可在数分钟至数小时内引起脑出血、颅内压升高、神经兴奋性毒、炎症等一系列级联反应。对于TBI后复杂的病理改变,开发一种广泛保护多种神经损伤类型的药物至关重要。然而,目前临床上还没有抑制脑损伤或促进脑修复的有效药物。间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)由于其强大的旁分泌功能,为包括TBI在内的复杂组织损伤的保护和修复提供了一种潜在的治疗策略。大量研究已证实MSCs可分泌多种损伤修复因子,如血管生成因子VEGF和b FGF,抗炎因子IL-10和TSG-6,神经保护因子G-CSF等。因此,在过去的十几年里,MSCs及其衍生物被广泛研究,应用于组织损伤修复。但常规培养的MSCs旁分泌功能非常有限,部分因子分泌水平低,一些重要细胞因子甚至无法分泌。因此,激活MSCs旁分泌功能,增强其治疗潜能在干细胞治疗领域具有重要意义,近年来受到广泛关注。在之前报道的各种调控MSCs的方法中,临床和实验室研究都发现,3D微球培养是最有效的调控MSCs旁分泌功能的方式。目前,悬滴培养(Hanging drop,HD)仍然是无支架3D MSC微球培养最经典的方法。然而,该方法操作复杂,微球收获率低,严重阻碍了其临床应用。为解决上述问题,在本实验中以向日葵盘状花轴的结构为灵感,设计并3D打印制作了微腔阵列培养板(microchamber-array plate,MCAP)。使用MCAP,可以简单、高效地实现规模化制备均一的MSC微球。此外,通过MCAP可以大量收集MSC微球分泌的含有治疗因子的条件培养基(conditioned medium,CM),其对多种类型的神经损伤均有显著保护作用。综上所述,本selleck STM2457研究拟为大规模提升MSC的治疗潜力提供一种实用的方法,对TBI和electric bioimpedance其他组织修复具有重要意义。【目的】研制大规模提升MSC治疗潜力的3D培养板,提高MSC治疗潜能和实用性。【方法】(1)使用Rhino 6设计MCAP并用ABS材质使用熔融层积FDM的方式进行3D打印。MCAP用琼脂糖包被后进行MSC 3D培养,培养3天后收集MSC微球和条件培养基,并以收集到的微球形态、数量及操作难易为指标对MCAP进行改良。将改良好的MCAP培养的MSC微球与MSC传统3D培养方式—HD培养的MSC微球进行粒径、形态、细胞活力方面的对比。(2)收集传统2D培养、HD培养及MCAP培养的MSC提取RNA,用q PCR检测BDNF、VEGF、b FGF、SDF-1、PLGF等营养因子的表达水平,分别选择3种培养方式的最佳培养条件下的MSC进行RNA-seq,系统的比较MSC旁分泌功能,将其对应的条件培养基进行蛋白芯片检测,其对应的微球进行免疫荧光染色,分别从基因和蛋白水平比较不同培养方式下MSC的旁分泌功能。(3)收集传统2D、HD及MCAP三种培养方式的最佳培养条件下的CM,在小鼠海马神经元细胞系的复杂损伤模型—拉伸损伤中通过观测细胞形态、细胞活力及细胞损伤标志物对比其损伤保护效果。通过细胞凋亡、坏死及铁死亡模型进一步对比其对特定损伤的保护作用。通过血管静脉内皮细胞迁移模型及血管形成模型对比其对损伤后的血管重塑作用。(4)收集MCAP-CM用3KD透析袋进行透析,去除营养因子外的副产物并用蔗糖进行不同程度的浓缩。将不同预处理后的r CM在小鼠TBI后立即给予尾静脉注射,12h后取损伤部位组织,q PCR检测铁死亡、凋亡、炎症损伤标志物,选取最佳治疗组进行RNA测序,系统性检测r CM对TBI的治疗作用。(5)在损伤后12h进行Evans blue染色,观测r CM对血脑屏障功能恢复的影响。在损伤后7day进行CD31、Iba1、Arg-1等免疫荧光染色,检测r CM对TBI后血管重塑及炎症的影响。在损伤后1month内不同时间点进行平衡木、转棒、高架十字及新物体识别等行为学实验,检测r CM对TBI小鼠运动、情绪和认知功能的影响。【结果】(1)受向日葵盘状花轴可规模化产生高度均一的种子启发,设计并3D打印制作了MCAP。与传统的平底式培养皿不同,MCAP的底部有许多均匀阵列的微腔,在一个125×85mm的MCAP上排列有近1000个微腔。对微腔进行3次改良,最终微腔呈上大下小结构,顶部开口为3mm的正方形、腔室中部为倒棱台状、腔室底部为直径2mm的半球、微腔深1.5mm、相邻腔室间隔为线型时,细胞可均匀沉降至微腔底部的半球中形成大量规则、均一的细胞微球。与HD培养相比,MSC微球培养效率提高了30—40倍。(2)在微球形态上,MCAP来源的MSC微球的大小更加均一,变异系数是0.0842,且符合正态分布。HD来源的MSC微球变异系数为0.1895,且不符合正态分布,表明MCAP培养的MSC微球更为均一。Live/Dead染色显示,虽然HD和MCAP培养的细胞微球均保持高活力水平,但MCAP组的细胞活力仍显著高于HD组。(3)在HD培养中,最佳培养密度是6×10~4/m L,MCAP的最佳培养密度是1.2×10~5/m L。HD、MCAP、2D最佳培养条件下的MSC RNA-seq结果表明,HD和MCAP培养的微球高度相似(R>0.8)。HD、MCAP与2D MSC差异基因GO分析表明,environmental information processing通路显著富集,对此通路基因进行KEGG分析,PI3K-AKT、c GMP-PKG、JAK-STAT等调控细胞增殖、分化、促进细胞存活的通路显著富集,表明3D培养更有利于干细胞生长。此外,促血管再生基因(VEGF、b FGF)也在两种3D培养微球中显著高表达。在关于神经系统相关基因分析中,HD和MCAP培养的微球相关基因变化一致,对其进行GSEA分析,其中neuro active基因集与2D培养相比在两种3D培养中显著富集。(4)蛋白芯片检测结果同样表明,PI3K-AKT通路,血管再生通路在HD组和MCAP组显著富集,与RNA-seq结果一致。用q PCR对其中代表性基因进行验证,神经营养因子:BDNF、GDNF、PLGF;促进神经再生因子:G-CSF、SCF、SDF-1;血管再生因子:b FGF、VEGF、HGF;抗炎因子:IL-10、TSG-6;抗氧化因子:IGF-1等均可上调几十到几百倍。免疫荧光染色结果也表明3D培养的干细胞微球中含大量细胞因子(BDNF、HGF、IGF-1、VEGF等)。以上结果表明,HD培养与MCAP培养对MSC旁分泌功能的调控作用一致,均可显著增强MSC旁分泌功能。(5)细胞拉伸损伤中MCAP-CM表现出最显著的保护效应,Erastin和RSL3诱导的铁死亡模型、星孢菌素诱导的凋亡模型、H_2O_2诱导的坏死模型及HUVEC血管形成及迁移实验中,与2D条件培养基相比,3D干细胞条件培养基的保护作用均更为显著,MCAP-CM和HDCM保护作用一致,表明MCAP是可替代HD培养的一种更高效、实用的可规模化增强干细胞治疗潜能的培养方式。(6)透析后条件培养基由粉色变为近透明,表明以酚红为代表的治疗非必需物质被去除。TBI后立即给予条件培养基,12h后取损伤部位进行检测,q PCR结果表明:条件培养基透析后原浓度治疗效果www.selleck.cn/products/ly2157299最佳,可发挥抗炎、抗坏死等保护作用。将损伤部位进行RNA测序,TBI组和条件培养基给药组差异基因分析结果表明:条件培养基给药组抗凋亡、促进神经再生、血管重塑和抗炎相关基因上调而促进凋亡、抑制血管重塑和促炎相关基因下调。(7)平衡木、转棒、高架十字和新物体识别等动物行为学结果表明,r CM可以促进小鼠运动功能恢复,并对认知功能有所改善。损伤后12h,Evans blue染色中给药组损伤部位染色面积较小,颜色较浅,表明r CM可以促进血脑屏障功能恢复。损伤1week后,CD31免疫荧光结果表明,r CM可以促进损伤部位血管重塑;Iba1和Arg-1染色表明,r CM可以抑制小胶质细胞过度激活并促进其向抗炎表型的M2型转化;同时观察到损伤部位空洞较小,表明r CM可以减少TBI后组织丢失。【结论】(1)设计并制备了一种微腔阵列培养板,可以实现均质MSC微球的规模化生产,与经典的悬滴培养相比,培养效率提高了约40倍。(2)MCAP可从基因到蛋白水平系统性增强MSCs的旁分泌功能。(3)在体外细胞损伤模型中,MCAP培养的MSCs对神经细胞的拉伸、铁死亡、凋亡、坏死及血管内皮细胞的多种损伤类型均表现出显著的保护作用。(4)在TBI小鼠中,MCAP培养的MSCs表现出对组织修复的巨大治疗潜能。(5)本研究为提高MSCs的治疗潜能提供了一种实用、便捷的培养装置,并在规模上满足治疗需求,具有良好的临床应用前景。

目的 探讨叙事疗法在前列腺增生患者中的应用效果。方法 便利抽样选取瑞金市人民医院2020年3月—2022年3月诊治的156例前列腺增生患者，依据简单数字表法将其分为对照组(n=78)和观察组(n=78)。对照组给予常规护理干预，观察组给予叙事疗法护理干预，两组均连续干预4周。比较两组干预前后前列腺症状、病耻感、心理弹性、应对方式、社会功能。结果 干预后，观察组前列腺症状评分低于对照组(P<0.05);观察组社会影响量表中的社会排斥、经济歧视、内在羞耻、社会隔离各维度评分低于对照组(P<0.05);观察组心理弹性量表中的坚韧、自强、乐观各维度评分高于对照组(P<0.05);观察组积极应对评分高于对照组，消极应对评分低于对DNA Damage/DNA Repair抑制剂照组(P<0.05);观察组社会功能缺陷筛选量表中的职业和工作、婚姻职能、父母职能、社会性退缩、家庭外的社会活动、家庭内活动过少、家庭职能、个人生活自理、对外界的兴趣和关心、责任心和计划性评分低于对照组(P<0.05)。结论 应Biolistic transformation用叙事疗法护理能够有效缓解前列腺增生患者前列腺症状，降低病RSL3 IC50耻感，改善心理弹性和应对方式，从而提高社会功能。

目的:本研究构建阿霉素诱导的兔慢性心脏毒性模型,旨在探讨二维斑点追踪成像技术(two-dimensional speckle tracking imaging,2D-STI)评估阿霉素致兔早期心肌损伤的诊断价值,并初步探讨阿霉素致右室功能障碍的可能机制。方法:将30只雄性新西兰兔随机分为三组(10只/组):(1)阿霉素高剂量组(HD组),经耳缘静脉注射阿霉素溶液,3 mg/kg/周,持续6周,累积剂量18 mg/kg;(2)阿霉素低剂量组(LD组):经耳缘静脉注射阿霉素溶液1.5 mg/kg/周,持续6周,累积剂量9 mg/kg;(3)对照组(Control组):经耳缘静脉注射Annual risk of tuberculosis infection等剂量生理盐水,1次/周,持续6周。分别于第0、2、4、6周对所有实验兔进行超声心动图检查,常规超声心动图测量左室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末期内径(Left ventricular end-systolic diameter,LVESD)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室缩短分数(left ventricular ejection fractional shortening,LVFS)、心率(heart rate,HR)、右室面积变化分数(right ventricular fractional area change,RVFAC)及三尖瓣环收缩期位移(tricuspid annular plane systolic excursion,TAPSE)等,2D-STI获得左室整体纵向应变(left ventricular global longitudinal strain,LVGLS)、右室游离壁整体纵向应变(right ventricular free-wall longitudinal strain,RVFWLS)及右室整体纵向应变(right ventricular global longitudinal strain,RVGLS)等,重复测量方差分析比较各组在各时间点的超声参数差异;比较全心质量指数。ELISA检测血清肌酸激酶同工酶(Creatine kinase-MB,CK-MB)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平;于实验第6周采集图像后处死兔子,HE染色观察三组实验兔的心肌组织病理学变化;透射电子显微镜观察各组右室心肌组织超微结构及线粒体的变化;检测右室心肌组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽(glutathione peroxide,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)水平及铁含量;Western blot检测三组右室心肌组织Nrf2和Gpx4的蛋白表达水平。结果1.与Control组相比,HIACS-010759采购D组及LD组实验兔均出现不同程度的精神萎靡、对外界刺激反应减弱,体重增加缓慢,毛发干枯,掉毛,耳缘静脉炎,腹泻等情况,LD组的情况较HD组轻,Control组兔精神状况良好。三组实验兔的全心质量指数差异无统计学意义(P>0.05)。2.常规超声心动图:第6周时,HD组的LVEF值明显低于给药前及其余两组(P<0.05),在各实验周期,3组兔的LVEDD、LVESD、LVFS、HR、RVFAC及TAPSE差异均无统计学意义(P>0.05);3.2D-STI:重复测量方差分析结果显示,组别和实验周期对LVGLS、RVFWSL及RVGLS的影响均存在交互效应,HD组和LD组的LVGLS、RVFWSL及RVGLS值随化疗周期的延长逐渐减低,第2、4和6周时,HD组的LVGLS、RVFWSL均明显低于给药前及其余两组(P<0.05);第4和6周时,LD组LVGLS、RVFWSL均明显低于给药前及其余两组(P<0.05);第4和6周时,HD和LD两组的RVGLS均明显低于Control组(P<0.05),HD组的RVGLS值低于给药前(P<0.05);第6周时,LD组的RVGLS值低于给药前(P<0.05)。4.ELISA结果显示,与Control组及LD组相比,HD组的CK-MB及LDH的含量均明显升高(P<0.01),与Control组相比,LD组的LDH值显著升高(P<0.01)。5.HE染色结果显示,Control组的左、右心室心肌组织结构正常,排列整齐,未见明显病理性改变。HD及LD组的左、右室心肌组织可见不同程度的肌纤维排列紊乱、心肌细胞肿大等表现,与HD组相比,LD组的上述病理表现较轻;6.透射电镜结果显示,阿霉素导致心肌线粒体损伤并呈一定剂量依赖性,与Control组相比,HD组可见部分Z线扭曲,肌纤维部分断裂,线粒体肿胀,部分呈空泡状,膜内基质变淡,部分线粒体皱缩变小,嵴结构模糊不清;LD组线粒体聚集,肿胀,形态不规则,部分空泡,程度较HDFUT-175研究购买组轻。7.阿霉素导致心肌组织氧化应激增强:与Control组相比,阿霉素组的SOD、GSH水平均呈明显的剂量依赖性降低(P<0.05),HD组的SOD、GSH水平低于LD组(P<0.05);与Control组相比,阿霉素组的心肌组织铁含量、MDA水平呈明显的剂量依赖性增加(P<0.05),HD组的心肌组织铁含量、MDA水平明显高于LD组(P<0.05);8.Western blot结果显示,HD组和LD组的Nrf2、Gpx4蛋白表达水平均低于Control组(P<0.01),LD组的Nrf2、Gpx4蛋白表达水平均低于HD组(P<0.01)结论:1.阿霉素对左室、右室的心脏毒性具有同步性和剂量依赖性,随着阿霉素剂量的增加,左室整体纵向应变、右室整体纵向应变及右室游离壁纵向应变均出现减低。2D-STI技术相比于常规超声心动图可更敏感地发现左室、右室的心肌损伤,其中以左室整体纵向应变及右室游离壁纵向应变的敏感性较高,有望成为评估阿霉素诱导的亚临床心肌损伤的可靠手段,指导临床早期干预治疗;2.阿霉素诱导右室功能障碍的机制可能与Nrf2/Gpx4信号通路、氧化应激增强、铁死亡有关,为将来阿霉素心脏毒性的防治提供实验依据。图 [14] 表 [3] 参 [110]