hsa_circ_0092337通过抑制miR-154-5p促进血管平滑肌细胞自噬与增殖

目的:血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)是构成血管壁的主要细胞成分之一,VSMC自噬、增殖异常所导致的血管稳态受损,是动脉粥样硬化、高血压等心血管疾病的重要病理学事件。环状RNA(circular RNA,circ medicare current beneficiaries surveyRNA)是一类具有环状结构的调控性非编码RNA,主要通过与Entinostat试剂微小RNA(micro RNA,miRNA)互作,发挥其调控作用。circ RNA如何通过调控RNA参PEG300分子式与调节VSMC自噬与增殖,目前研究还不够深入。我们课题组前期研究发现miR-154-5p在增殖型VSMC下调,其在胞质和胞核中分别靶向抑制ATG7、PRKD2,进而抑制VSMC自噬与增殖。但miR-154-5p是否通过VSMC自噬与增殖调控血管内膜增生?miR-154-5p在增殖型VSMC下调的分子机制是什么?目前尚不清楚。本研究拟采用小鼠颈总动脉结扎模型论证miR-154-5p对血管内膜增生的调控作用,并从circ RNA/miRNA互作角度,论证miR-154-5p在增殖型VSMC下调的分子机制。方法:1.构建小鼠颈总动脉结扎模型,过表达miR-154-5p三周后,通过免疫荧光分析,论证miR-154-5p对VSMC自噬、增殖以及血管内膜增生的影响。2.联合生物信息学分析、q RT-PCR、双荧光素酶报告基因分析等方法,论证hsa_circ_0092337(简称circ_337)是否与miR-154-5p结合并调控其表达水平。3.联合CCK-8、Ed U、Western blot等技术,论证circ_337是否通过抑制miR-154-5p促进VSMC自噬与增殖。结果:1.miR-154-5p通过ATG7抑制VSMC自噬,靶向PRKD2抑制VSMC增殖,进而抑制小鼠颈总动脉内膜增生。2.circ_337能够与miR-154-5p结合,并降低增殖型VSMC中miR-154-5p的表达水平。3.敲减circ_337能够抑制ATG7、PRKD2,进而抑制VSMC自噬与增殖;若抑制miR-154-5p,则可逆转circ_337的调控作用。结论:miR-154-5p通过抑制VSMC自噬与增殖,抑制血管内膜增生;circ_337可以结合miR-154-5p并下调其表达水平,进而上调ATG7、PRKD2,促进VSMC自噬与增殖。

血清OPG/RANKL之值与高血压左心室厚度的相关性研究

目的:分析血清骨保护素/破骨细胞分化因子(OPG/RANKL)之值与高血压左心室厚度的相关性。方法:将87例研究对象分为健康组(27例)和高血压组(60例),其中高血压组通过测定左心室厚度又分为无左心室肥厚组(30例)与左心室肥厚组(30Emricasan分子式例),所有研究者均测定血清OPG、RANKL水平,并计算OPG/RANKL之值。结果:与健康组相比,高血压组的血清OPG水平、血清OPG/RANKL之值均显著升高,血清RANKL水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);与Galunisertib高血压无左心室肥厚组相比,高血压左心室肥厚组的血清OPG水平、血清OPG/RANKL之值均显著升高,血清RANKL水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.001)。相关性分析显示,室间隔厚度与血清OPG水平及OPG/RANKL之值呈正相关bioactive properties(r=0.685、0.636,P<0.001),与血清RANKL水平呈负相关(r=-0.546,P<0.001)。进一步行多元线性回归分析显示,血压水平升高、血清OPG/RANKL之值增高是室间隔增厚的重要因素(B=0.076,P<0.001)。结论:高血压患者测定血清OPG/RANKL之值对其左室厚度评估可能具有一定临床意义。

红萸饮对葡聚糖硫酸钠诱导炎症性肠病小鼠的作用

目的 探讨红萸饮对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导炎症性肠病小鼠的作用及机制。方法 将50只小鼠随机分为正常组、模型组及红萸饮低、中、高剂量组(8.95、17.89、35.76 g/kg),每组10只。以2.5%DSS自由饮用建立炎症性肠病(IBD)模型,红萸饮组分别灌胃给予低、中、高剂量红萸饮,正常组、模型组灌胃给予等体积生理盐水,连续7 d。每天记录小鼠体质量、粪便、精神状态等一般情况,并行疾病活动指数(DAI)评分。第14天处死所有小鼠,记录结直肠长度,HE染色观察组织病理学变化,ELISA法检测血清IL-6、TNF-α水平,Western blot法、免疫组化法检测结肠组织BaxFulvestrant配制、Bcl-2、ca寻找更多spase-3蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠DAI评分、结肠组织病理评分、血清IL-6、TNF-α水平、结肠组织Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),Bax蛋白表达降低(P<0.01),结肠长度缩短(P<0.01),肠壁组织受损;与模型组比较,红萸饮各剂量组小鼠DAI评分、结肠组织病理评分、血清IL-6、TNF-α水平、结肠组织Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.01),Bax蛋白表达升高(P<0.01),结Bio-inspired computing肠长度增加(P<0.01),肠壁组织受损得到改善。结论 红萸饮可通过缓解炎症、抑制结肠组织凋亡改善DSS导致的小鼠炎症性肠病症状。

高血糖、高血脂对前列腺癌及前列腺增生患者PSA水平的影响

【目的】旨在探讨血糖、血脂对前列腺癌、前列腺增生患者血清前列腺特异性抗原(Prostate-Specific Antigen,PSA)的影响,通过探明高血糖、高血脂与PSA的相关性,使临床医师充分考虑到异常血糖及血脂水平可能会使血清PSA水平异常表达,以便将代谢异常作为影响血清PSA水平的相关因素进行评估参考,将PSA更好地应用于前列腺癌(prostate cancer,PCa)筛查、前列腺良性增生(Benign prostatic hyperpCellular immune responselasia,BPH)的鉴别诊断,以及前列腺癌治疗、随访、预后的评估。【方selleck法】系统性回顾2018年12月-2022年12月就诊于昆明医科大学第六附属医院的前列腺癌及前列腺增生患者,分析符合纳入标准的病例信息,应用组间比较、协方差分析校正、spearman等级相关性分析等统计学方法,采用数据分析软件SPSS 26.0对收集的数据进行分析,明确高血糖、高血脂与前列腺癌、前列腺增生患者血清PSA表达水平之间的相关性。【结果】1、总计收集了626名符合研究标准的2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)及高血脂患者的年龄、前列腺体积(Prostate volume,PV)、身体质量指数(Body Mass Index,BMI)、空腹血糖、血脂水平等一般基线特征以及患者的血清PSA、病理结果、前列腺癌的临床分期等临床数据。其中2型糖尿病组患者211人,高血脂组患者140人,无代谢疾病的患者275人。2.对T2DM组与无代谢疾病组经过不同的分组分层后发现:(1)T2DM组中PCa及BPH患者血清PSA、f PSA、PV均较NT2DM对照组降低;(2)依据是否使用降糖药物情况将T2DM组分层后,使用降糖药物的PCa及BPH组患者血清PSA、f PSA均较未使用降糖药组降低更显著。(3)T2DM组PCa患者T4人数占比较NT2DM组更低,病理Gleason评分及T1、T2、T3临床分期人数占比中无明显差异。3.高血脂组与无代谢异常对照组患者的比较中:(1)高血脂组患者BMI更高,而年龄、血清PSAPanobinostat使用方法、f PSA、f/t PSA、PV在两组间未见明显差异。(2)高血脂PCa组Gleason≥7的人数占比、T2、T4人数占比少于对照组。4.对年龄、PV、BMI、空腹血糖与血清PSA相关性进行研究后发现:(1)无代谢异常对照组中患者的年龄与血清PSA水平成正相关;T2DM组、高血脂组、无代谢异常对照组中患者PV均与血清PSA水平呈正相关,BMI及胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白与血清PSA水平在各组中均未见相关性。(2)空腹血糖水平在T2DM组、T2DM PCa组、T2DM BPH组、NT2DM BPH组与PSA呈正相关,但依据使用降糖药物情况分组后,仅在使用降糖药物的T2DM PCa及BPH组中空腹血糖与血清PSA、f PSA呈正相关,未使用降糖药物组未见明显相关性。5.将年龄、PV对血清PSA水平的影响进行校正后:(1)T2DM组、T2DM PCa组、T2DM BPH组、使用降糖药物的T2DM组中PCa及BPH患者血清PSA水平显著低于各对照组,且T2DM病程≥5年的PCa组患者血清PSA水平较病程<5年组下降幅度更显著。(2)未使用降糖药的T2DM组PCa及BPH患者血清PSA水平虽较对照组降低,但差异无显著统计学意义。【结论】1.2型糖尿病会导致前列腺癌及良性前列腺增生患者血清PSA水平降低,可能与糖尿病病程及使用降糖药物有关。2.使用降糖药物后若血糖控制不良导致空腹血糖水平升高,可能使糖尿病患者血清PSA水平降低幅度减小。3.前列腺体积与血清PSA水平呈正相关。4.高血脂水平对患者血清PSA表达未见显著影响。

利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建水稻OsABI5突变体

在水稻种植生产上,因其种子经常发芽率不齐,导致水稻直播困难,不仅影响水稻的生产成本还影响其产量,因IACS-010759浓度此水稻直播的突出问题要保持优良的种子萌发力。ABA是种子萌发的抑制因子,它通过诱导ABI5的表达来抑制种子萌发,在种子正常萌发的过程中,随着种子吸胀和GA生物合成,ABA和ABI获悉更多5的含量都迅速下降,促使种子萌发。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建OsABI5突变体,以期提高种子的萌发率和萌发速度。通过农杆菌介导法将构建好的OsABI5敲Biogenic synthesis除质粒转化‘日本晴’水稻的愈伤组织,经PCR和Western Blot鉴定筛选得到两株OsABI5弱表达的阳性突变株系。通过对osabi5-2突变体和‘日本晴’萌发表型的观察,发现osabi5-2突变体2 d发芽率显著高于‘日本晴’,二者4 d的萌发势也是osabi5-2突变体略高。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建了OsABI5突变体,对研究水稻OsABI5调控种子萌发的分子机制具有重要意义。

家蚕黑蛹突变体bpn突变基因的定位克隆和作用机制研究

家蚕作为具有重要的经济价值的鳞翅目泌丝昆虫,同时也是模式生物。经过几千年的驯化和演变,已经积累了较多的遗传突变材料。家蚕突变体类型主要包括斑纹、体色、体型、茧色突变体等。本课题组在家蚕品种秋丰N饲养过程中发现一种蛹皮表现为黑色的突变体,命名为bpn。该突变体的部分蚕在化蛹时出现蜕皮困难,且雌蛾所产的蚕卵虽能正常发育,却有部分不能孵化,导致孵化率显著低于正常雌蛾所产的卵,这在其他黑蛹突变体中未见报道,是一种新的黑蛹突变体。遗传学分析结果显示,突变体bpn的突变性状由1个隐性基因控制,且位于常染色体上,遵循孟德尔遗传规律。本研究采用多态性SSR分子标记对bpn基因进行连锁分析和定位克隆,并采用2-DE和转录组分析突变体蛹皮中总蛋白的变化,阐述突变体bpn的形成原因以及突变的发生对蛹皮蛋白和BmHEL基因的影响,对完善黑色素形成机制及丰富家蚕生长发育的分子机制具有重要意义。本研究获得的主要研究结果如下:1、家蚕突变体bpn的表型特征和遗传分析统计分析突变体bpn的孵化率在50%-60%之间,远远低于正常品种秋丰N(90%以上)。遗传分析结果显示,P50和突变体bpn的杂交后代F_1个体均表现为正常蛹;F_2代出现性状分离,有正常蛹和黑色蛹两种表型,分离比为3:1;回交群体(BC_1F、BC_1M)出现正常蛹和黑色蛹两种表型,分离比均为1:1。根据孟德尔遗传定律,确定控制突变体bpn突变性状的基因为隐性基因,且位于家蚕常染色体。2、bpn基因的连锁分析及精细定位以P50和突变体bpn为亲本配制F_1代,根据家蚕雌性染色体不发生交换的特性,将F_1代雌蛾回交突变体bpn雄蛾组配BC_1F群体,用于bpn基因的连锁分析;F_1代雄蛾回交bpn突变体雌蛾组配BC_1M群体,用于bpn基因的精细定位。遗传分析结果显示bpn基因位于常染色体,因此排除1号性染色体。根据已构建的家蚕SSR分子标记连锁图,以P50、突变体bpn及其杂交后代F_1的基因组为材料,筛选剩余27条染色体上的多态性SSR分子标记,并用筛选出的多态性SSR标记对BC_1F中的10个正常个体和10个突变个体进行连锁分析,确定bpn基因位于26号染色体。使用BC_1M群体中的200个突变个体进行精细定位。结果显示bpn基因位于S26-4-12和S26-2-14两个分子标记之间,物理距离约211 kb,包含6个候选基因:KWMTBOMO15782、KWMTBOMO15783、KWMTBOMO15784、KWMTBOMO15785、KWMTBOMO15786和KWMTBOMO15787。3、候选基因表达谱的筛选及结构分析为了确定目的基因,分析了候选区域内6个基因在蛹期的表达情况。以秋丰N和突变体bpn的蛹皮c DNA为模板进行q RT-PCR,结果显示:KWMTBOMO15783在蛹期不表达,KWMTBOMO15787的相对表达量在秋丰N和突变体bpn的蛹皮中无显著差异,而KWMTBOMO15782、KWMTBOMO15784、KWMTBOMO15785和KWMTBOMO15786的相对表达量在秋丰N和突变体bpn的蛹皮中有显著差异,结果表明,候选基因可定为Knarrative medicineWMTBOMO15782、KWMTBOMO15784、KWMTBOMO15785和KWMTBOMO15786。根据KAIKObase提供的基因注释信息可知:KWMTBOMO15782,KWMTBOMO15784CX-5461供应商和KWMTBOMO15785均为纤毛和鞭毛相关蛋白基因,KWMTBOMO15786为ebony基因。对4个候选基因进行序列分析,结果显示KWMTBOMO15782和KWMTBOMO15784和KWMTBOMO15785的序列与参考序列均无差异,而ebRaf抑制剂ony基因的6号外显子中部插入一段长度为99 bp的poly A结构,功能区出现一个终止密码子TAA;8号外显子和10号外显子部分缺失,9号外显子全部缺失。结果表明,ebony基因发生了无义突变,使其抑制黑色素的功能丧失,黑色素累积,从而导致突变体bpn的蛹皮出现黑化表型。4、蛹皮总蛋白的2-DE分析以及蚕卵中BmHEL的表达分析为确定突变体的发生对蛹皮总蛋白是否产生影响,采用2-DE分析了秋丰N和突变体bpn在蛹期不同发育时间的蛹皮总蛋白表达情况,并通过转录组和q RT-PCR验证2-DE结果。结果显示,秋丰N和突变体bpn的蛹皮蛋白表达稳定,且在不同时间点,两者之间均存在3个差异显著的蛋白,质谱鉴定该3个差异蛋白为KWMTBOMO11902,KWMTBOMO11904和KWMTBOMO11906,均为30K蛋白。结果表明,突变体bpn蛹皮中30K蛋白的表达发生了变化。BmHEL基因在蚕卵孵化过程中起到软化卵壳,促进孵化的作用,由于突变体bpn的自交蚕卵孵化率显著低于秋丰N,猜测可能与BmHEL基因有关。利用q RT-PCR分析BmHEL基因在秋丰N和突变体bpn蚕卵中的表达情况,结果显示:在点青期,BmHEL在秋丰N和突变体bpn蚕卵中的表达量均较低,是由于孵化酶的作用是软化卵壳,在蚕卵孵化前期一直处于低表达;从点青直至孵化,突变体bpn蚕卵中BmHEL的表达量均显著高于秋丰N蚕卵,结果表明,突变体bpn部分蚕卵孵化困难,需要更多的孵化酶软化卵壳,导致BmHEL基因的高表达。以上结果表明,家蚕ebony基因的突变不仅使家蚕蛹皮的黑色素形成异常,呈现黑色表型,且可能对30K蛋白、孵化酶等与生长发育关系密切的基因也产生了重要影响。因此,研究bpn突变体发生机制对完善黑色素形成机制及丰富生长发育的分子机制具有重要意义,值得进一步研究。

6′-O-咖啡酰熊果苷处理通过激活苯丙烷代谢提高采后蓝莓果实对灰霉病的抗性

为研究6′-O-咖啡酰熊果苷(6′-O-caffeoylarbutin,CA)处理对采后蓝莓果实灰霉病的防控作用Bucladesine,以蓝莓果实为研究材料,蒸馏水处理为对照,研究2.5 mmol·L~(-1)6′-O-咖啡酰熊果苷浸泡处理对蓝莓果实灰霉病的防控效果及其对果实苯丙烷代谢的影响。结果Extrapulmonary infection表明,与对照组比,6′-O-咖啡酰熊果苷处理显著降低了采后蓝莓果实灰霉病的发病率,抑制了病斑直径的扩张;与此同时,与对照组比,还提高了果实苯丙氨酸解氨酶(PAL)、4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)、肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)、肉桂醇脱氢酶(CAD)、多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD)活性Mirdametinib半抑制浓度以及总酚、类黄酮和木质素的含量,对蓝莓果实的贮藏品质也无不良影响。据此认为,6′-O-咖啡酰熊果苷处理通过激活采后蓝莓果实苯丙烷代谢相关酶活性,促进抗性物质的合成积累,从而增强蓝莓果实对灰霉病的抗性。

代谢组和转录组整合分析箭叶淫羊藿质量差异机理研究

目的本研究基于课题组前期研究结果,于同一营养阶段,采集箭叶淫羊藿3个不同化学型居群叶片进行代谢组和转录组整合分析,绘制黄酮醇类活性成分合成通路图,筛选候选基因,探索质量差异形成机制。方法(1)箭叶淫羊藿代谢组分析。利用广泛靶向代谢组学方法,对同质园栽培3年以上箭叶淫羊藿3个质量和化学型差异较大的居群,即化学型为空白谱类安徽黄山居群(AHHS)、朝藿定C主导-普通类江西武宁居群(JXWN)和淫羊藿苷主导-朝藿定B强峰类湖北罗田居群(HBLT),于同一营养阶段采样,进行叶片代谢物进行整体表征和相对定量。对花青素类成分和总黄酮醇苷进行相关性分析。整合主成分分析、聚类分析、正交偏最小二乘判别分析和单变量统计分析,对3个居群整体代谢物进行分析和差异代谢物分析。通过KEGG数据库对差异代谢物进行KEGG功能注释及富集分析。(2)箭叶淫羊藿转录组分析。利用高通量转录组测序对箭叶淫羊藿3个居群叶片进行测序,使用Trinity软件进行转录本拼接获得转录组参考序列,使用Corset软件对转录本进行Corset层次聚类分析,获得后续分析用的unigene。使用Diamond Blastx软件基于6大公共数据库(KEGG、NR、Swiss-Prot、GO、KOG、Trembl)并使用Hmmer软件基于Pfam数据库,对各样本中的基因进行比对和功能注释。通过Trans Decoder软件对组装得到的转录本进行CDS预测,再通过RSEM软件进行基因表达定量。使用DESeq2进行样品组间的差异表达分析,获得差异表达基因。基于K-means聚类分析分析基因在居群间表达趋势,运用GO和KEGG数据库对差异表达基因进行注释和功能富集分析。使用i TAK软件预测转录因子并进行注释。(3)代谢组和转录组整合的质量差异机理分析。基于差异表达基因和代谢物及文献调研对箭叶淫羊藿3个居群叶片黄酮醇类成分生物合成途径进行构建,并对该途径差异表达基因进行聚类分析。对差异表达基因和代谢物进行KEGG通路分析、KEGG富集分析和相关性分析。选取皮尔森相关性系数(Pearson correlation coefficient,r)r>0.80的结果,利用Cytoscape_v3.10.0对基因-代谢物、代谢物-转录因子相关性网络网络进行可视化分析。结果(1)箭叶淫羊藿代谢组分析。基于广泛靶向代谢组学技术,在箭叶淫羊藿3个居群叶片中共鉴定出1020个代谢物。其中,差异代谢物共573个,黄酮类差异代谢物共228个,为差异代谢物中占比最大的化合物(39.8%)。鉴定的3个花青素类物质中,仅矢车菊素-3,5-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-(2”-O-葡萄糖基)葡萄糖苷含量与朝藿定C含量存在显著相关性(P<0.01),朝藿定A、朝藿定B和淫羊藿苷含量与花青素类成分含量均没有显著相关性。以AHHS居群为对照组,JXWN和HBLT居群多数黄酮类、酚酸类、其他类和萜类呈上调趋势。证实AHHS居群为箭叶淫羊藿质量机制研究的理想对照居群。对差异代Alisertib细胞培养谢物进行KEGGLEE011配制功能注释和富集分析,3个差异分组差异代谢物均显著富集到黄酮生物合成途径,AHHS vs HBLT和AHHS vs JXWN中差异代谢物均富集显著的通路为黄酮与黄酮醇生物合成途径和黄酮生物合成途径。(2)箭叶淫羊藿转录组分析。基于转录组测序技术,对箭叶淫羊藿3个居群同一营养阶段叶片的9个样本进行转录组分析,总共获得61.32 Gb高质量reads碱基总数,每个样本高质量reads碱基总数6.00 Gb以上。组装后得到179679个表达基因,序列平均长度为869 bp。将unigene与7大数据库(KEGG、NR、Swiss-Prot、Trembl、KOG、GO和Pfam数据库)进行比对和功能注释,共91388个基因(50.86%)至少在一个数据库中被注释。在NR数据库的物种注释表明,Nutrient addition bioassay箭叶淫羊藿与耧斗菜Aquilegia coerulea E.James亲缘性关系较近。对箭叶淫羊藿不同居群叶片的基因进行差异表达分析。AHHS vs HBLT、AHHS vs JXWN和JXWN vs HBLT的差异表达基因总数分别为18569、9657和18784个。其中,AHHS vs HBLT、AHHS vs JXWN和JXWN vs HBLT分别有867、344和842个差异表达基因被注释为转录因子。3个比较分组共有的差异基因为1201个,AHHS vs JXWN中特有差异基因最少,为1643个,AHHS vs HBLT中特有差异基因最多,为3938个。通过KEGG数据库对箭叶淫羊藿3个居群叶片转录组数据进行富集分析,箭叶淫羊藿3个居群表达基因共被注释于140条KEGG代谢通路,3个比较分组中的差异基因均富集的通路为植物昼夜节律通路。(3)代谢组和转录组整合的质量差异机理分析。对代谢组和转录组数据进行整合分析,鉴定出参与黄酮醇类成分生物合成途径中84个差异表达基因编码的8种酶(7个PAL、16个4CL、6个CHS、12个CHI、2个F3H、13个FLS、2个Ao MT和26个GT)和10种代谢物,初步完成箭叶淫羊藿总黄酮醇苷生物合成途径构建。其中,糖基转移酶为合成途径中差异表达数量最多的基因。将生物合成途径图中10个代谢物、总黄酮醇苷(即:朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷)、2”-鼠李糖基淫羊藿次苷-II、淫羊藿次苷II和箭藿苷B与差异基因进行相关性分析,表明56个基因与总黄酮醇苷、2”-鼠李糖基淫羊藿次苷-II、淫羊藿次苷II、箭藿苷B、肉桂酸、对香豆酸、柚皮素查尔酮、柚皮素、二氢山柰酚、山柰酚和淫羊藿素含量具有强相关性(r>0.80)。对170个MYB、MYB-related和b HLH家族转录因子与箭叶淫羊藿生物活性成分及各阶段代谢物进行相关性分析表明,105个MYB、MYB-related和b HLH家族转录因子与总黄酮醇苷、2”-鼠李糖基淫羊藿次苷-II、淫羊藿次苷II、箭藿苷B、肉桂酸、对香豆酸、柚皮素查尔酮、柚皮素、二氢山柰酚、山柰酚、8-异戊烯基山柰酚和淫羊藿素含量具有强相关性(r>0.80)。其中,在NR数据库中,注释为箭叶淫羊藿转录因子的序列Cluster-4340.101633与朝藿定A、朝藿定B和淫羊藿素积累呈正相关(r>0.80)。结论(1)质量评价研究启示。广泛靶向代谢组学可获取箭叶淫羊藿不同居群更全面的质量评价。3个居群间的差异不仅存在于总黄酮醇苷差异,整体代谢物也存在显著差异,且可稳定遗传。这种差异进一步证实,值得对箭叶淫羊藿质量优势居群HBLT和江西本地优质居群JXWN进行更深入的总黄酮醇苷积累分子机制研究。箭叶淫羊藿3个居群的整体化学成分变异度较大。基于中医药整体观思维,需对淫羊藿不同物种和产地开展更深入细致的药理学和药代动力学研究及临床试验,完善其质量评价体系并指导合理用药。此外,花青素含量与朝藿定A、朝藿定B和淫羊藿苷含量均不存在显著相关性。结合HBLT居群叶片具有丰富紫红色斑块和花青素含量的特性,化学型为淫羊藿苷主导-朝藿定B强峰类的HBLT居群,可用于选育花青素合成量高且总黄酮醇苷含量适宜品种,提高观赏价值和经济价值,促进中药资源综合利用。(2)质量差异机制启示。在同质园栽培环境因素一致前提下,基因表达仍存在显著差异,证实箭叶淫羊藿不同居群间质量差异可稳定遗传。箭叶淫羊藿尚有大量遗传信息等待解析,具有巨大挖掘潜力。尤其是HBLT居群,本研究筛选出大量差异表达基因,结合代谢组学和酶学表征等数据将有望挖掘功能基因,并解析总黄酮醇苷和淫羊藿素的生物合成,为淫羊藿黄酮醇类活性成分的异源生产提供遗传基础。3个比较分组中的差异基因均富集的通路为植物昼夜节律通路,表明淫羊藿活性成分积累可能与昼夜节律具有密切相关性,后续研究可进一步证实。提示或可通过昼夜节律特征进行品种选育。(3)生物合成途径启示。根据构建的总黄酮醇苷生物合成途径,推测箭叶淫羊藿O-甲基转移酶为S-腺苷-L-蛋氨酸依赖性酶,AHHS居群总黄酮醇苷含量低可能受S-腺苷-L-蛋氨酸含量限制。糖基转移酶在转录组数据中为合成途径中差异表达数量最多的基因,淫羊藿糖基转移酶多样性是淫羊藿黄酮醇苷类成分种类多的重要原因。此外,在NR数据库中注释为箭叶淫羊藿转录因子的序列Cluster-4340.101633与朝藿定A、朝藿定B和淫羊藿素积累呈正相关(r>0.80),推测其为箭叶淫羊藿活性成分生物合成的候选正调控因子。

微柱凝胶抗球蛋白法、凝聚胺法与固相凝集法检测在临床输血中的应用价值

目的 分析微柱凝胶抗球蛋白法(MGCT)、凝聚胺法及固相凝集法用于临确认细节床输血中的价值。方法 选取20biological feedback control22年9月至12月在东莞康华Belumosudil研究购买医院进行输血治疗的2 071例患者。其中血小板输注无效的106例患者通过固相凝集法测定血小板抗体,后对血小板抗体阳性的患者进行谱细胞检测并以谱细胞检测结果为金标准,分析固相凝集法和谱细胞检测在血小板抗体测定中的阳性符合率;所有患者通过MGCT及凝聚胺法开展配血,比较两种方法的交叉配血试验不合检出情况,并提出相应的解决方法。结果 血小板输注无效的106例患者通过谱细胞法测定血小板抗体显示:阳性30例,阴性76例;固相凝集法结果显示:阳性29例,阴性77例,阳性符合率为96.67%。2 017例受血者开展交叉配血试验显示64例存在交叉配血试验不合的情况,其中MGCT显示58例存在交叉配血试验不合的情况,符合率为90.63%;凝聚胺法显示50例存在交叉配血试验不合的情况,符合率为78.13%。结论 固相凝集法应用到临床输血期间血小板抗体检测中和谱细胞检测的符合率较高,MGCT用于交叉配血试验较凝聚胺法效果更为理想,能更好检出交叉配血试验不合的情况,值得应用。

经阴道超声诊断子宫内膜病变的临床价值探讨

目的:分析临床诊断子宫内膜病变时应用经阴道超声诊断的应用价值。方法:抽取2021年2月—2022年2月期间在我院就诊的疑似子宫内膜病变患者selleck激酶抑制剂100例作为研究对象,所有研究对象均接受了经阴道和经腹超声检查,以病理结果为准,对比两种检查方式的符合率,并以阴道超声诊断良恶性病变进行分组,对比两组血流信号率以及动脉阻力指数。结果:(1)100例研究对象经病理medical libraries诊断结果如下:26例子宫内膜癌,32例子宫内膜息肉,16例子宫内膜增生,4例萎缩性内膜,22例子宫黏膜下小肌瘤。经阴道超声诊断子宫内膜Colforsin抑制剂癌、子宫内膜息肉、子宫内膜增生以及子宫黏膜下小肌瘤的诊断符合率均高于经腹超声诊断(P <0.05);两种检查方式诊断萎缩性内膜的符合率对比无明显差异(P> 0.05)。(2)良性组血流信号率低于恶性组,动脉阻力指数高于恶性组(P <0.05)。结论:经阴道超声检查用于诊断子宫内膜病变的应用价值较高,尤其适用于已婚女性。