ALK抑制剂

血栓通常指在血管中形成的血块,其会阻碍血液流动,影响氧气及营养物质的运输,与肺栓塞、中风、心肌梗死等心脑血管疾病密切相关。作为抗血栓治疗的主要方法,药物治疗主要通过使用脂质体、聚合型纳米粒子等药物载体向血栓部位递送抗血栓药物,以改善因药物在人体内半衰期短、治疗时间窗口窄及副作用大等问题。多巴胺是一种神经递质,在碱性条件下会发生氧化自聚合反应生成聚多巴胺(Polydopamine,PDA)。PDA具有粘附能力强、光热转换性能高和生物相容性好等优点,被广泛用于药物递送和光热治疗领域。但由于PDA本身对血栓没有靶向能力,并且作为一种“外来物质”容易受到人体免疫系统的快速清除,导致其实际应用受到限制。为了解决Compound C核磁药物递送系统(Drug delivery systems,DDSs)的“脱靶”问题,提高溶栓治疗的效果,本论文工作分别以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(Arginineglycine-aspartic acid,RGD)序列和血小板膜(Platelet membrane,PM)为靶向配体,制备了2种多功能聚多巴胺纳米复合材料,并将其用于血栓的靶向溶栓治疗和光热治疗。具体研究内容如下:(1)RGD序列存在于纤维蛋白原中,可特异性识别血栓部位的血小板膜糖蛋白(Glycoprotein,GP)GPIIb/IIIa。因此,通过模仿纤维蛋白原的结构,将RGD序列修饰在药物载体表面,可实现对血栓部位的靶向药物递送。在本工作中,我们制备了聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG)与cyclic-RGDfk(c RGD)双修饰和L-薄荷醇(L-menthol,LM)与尿激酶(Urokinase,UK)双负载的多功能聚多巴胺纳米复合溶栓材料(LM-UK@PDA-PEG-RGD NBs,简称UK-LPPR NBs)。在溶栓治疗过程中,修饰于UK-LPPR NBs材料表面的c RGD可靶向识别血栓,并将该材料富集在血栓部位;在近红外(Near infrared,NIR)激光的照射下,UKLPPR NBs吸收光能并以热能的形式释放出来,提升血栓附近的温度,进而促进材料负载的UK快速genetic divergence释放和LM的相转变。在升温、释药和气泡冲击的三重作用下,血栓的溶解过程被加速。采用体外构建的富血小板血栓模型,通过测量和对比不同材料在血栓处的富集程度,证明了UK-LPPR NBs材料具有对血栓的靶向能力;在溶栓治疗实验中,通过对比不同材料和处理方式所引起的血栓的质量变化、血栓混合液的颜色变化及其在415 nm处的光密度值和残留血栓表面形貌的扫描电子显微(SEM)图,证明了UK-LPPR NBs具有最好的溶栓效果。(2)血小板是血液的主要成分之一,在生理性止血过程中起重要作用。血小板与胶原蛋白、纤维蛋白原或其他血小板的相互作用可促进血小板在受损血管部位的粘附、活化与聚集,进而促进止血栓子的形成。在本工作中,我们基于血小板这种独特的优势,利用血小板膜包覆尿激酶负载的介孔聚多巴胺纳米粒子(Urokinase@mesoporous polydopamine nanoparticles,UK@m PDA NPs),获得了具有靶向血栓能NSC 119875核磁力的纳米复合材料(UK@m PDA@PM NPs)。在溶栓治疗过程中,UK@m PDA@PM NPs外部包覆的血小板膜可将材料靶向并富集在血栓部位,NIR激光的照射可促进其中的尿激酶被快速释放,进而实现对血栓的靶向溶栓和光热的协同治疗。采用体外血栓模型测定了不同材料和方式处理后的血栓混合液在540 nm处的光密度值,基于混合液中血红蛋白的含量和处理后所得血栓形貌的SEM表征结果评估了相关材料及方式的溶栓性能。结果表明,在NIR激光的照射下,经UK@m PDA@PM NPs材料处理后的血栓混合液中血红蛋白含量最高,残留血栓中的纤维蛋白最少,表明该材料具有较好的溶栓效果。本论文工作所开发的靶向复合溶栓材料与策略涉及光热转换材料及靶向配体材料的种类选择与封装设计,对纳米载药复合材料在血栓的药物靶向和区域光热溶栓治疗过程中的应用方式进行了探索和优化,所得研究成果在未来人体血栓临床治疗过程中具有较好的应用前景。

背景:结直肠癌(Colorectal cancer,CRC),亦称大肠癌,为临床上最常见的消化道恶性肿瘤,发病率位居全球第三位,死亡率高居第二位。目前临床上结直肠癌常见的化疗药物有5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-Fu)、奥沙利铂(Oxaliplatin)、伊立替康(Irinotecan)、卡培他滨(Capecitabine)和亚叶酸钙等,这些药物均具有明显的肝脏毒性,因此开发新型结直肠癌治疗药物刻不容缓。近年来,花菁衍生物开始被应用在抗肿瘤领域研究。在一定波长的辐射下,七甲川花菁(Heptamethine cyanine,Cy7)及其衍生物可以产生活性氧(reactive oxygen speciest,ROS),这一特点为Cy7诱导结直肠癌细胞死亡提供可能。光敏疗法是肿瘤治疗中一种非常具有前途的策略,包括光www.selleck.cn/products/mcc950-sodium-salt动力疗法(photothermal therapy,PDT)和光热疗法(photodynamic therapy,PTT)。光敏疗法具有很多优点,例如:微创性、准确治疗和副作用少,但其也具有一定的缺点,例如:对深层次的肿瘤效果甚微,而化学治疗对深部肿瘤效果更好。基于此,本课题组自主设计合成了一种Cy7衍生物Cy7-Cl,不需要光敏疗法即可在体内外均表现出显著的抗结直肠癌活性。且Cy7-Cl显著引起结直肠癌细胞HCT116、SW480、DLD-1和MC38细胞ROS含量和凋亡率升高。在这一过程中我们观察到结直肠癌细胞线粒体形态变化,结直肠癌细胞呈现出凋亡(Apoptosis)的特征。目的:本课题从体内外探究Cy7-Cl抗结直肠癌活性,并深入探究Cy7-Cl诱导结直肠癌发生凋亡的作用机制,最终阐明Cy7-Cl阻滞结直肠癌的药理机制。方法:首先应用MTT、平板克隆-结晶紫染色实验研究Cy7-Cl体外抗结直肠癌活性。随后应用BALB/C裸鼠建立结直肠癌细胞MC38皮下荷瘤模型,经尾静脉注射5 mg/kg/2d剂量的Cy7-Cl治疗20天,研究Cy7-Cl体内阻滞结直肠癌。通过体重监测、血常规检测、肝肾功能检测、HE染色等实验方法评估Cy7-Cl对BALB/C裸鼠的毒副作用。最后通过小分子抑制剂筛选、流式细胞术、蛋白质印迹、Mito-Green探针染色、JC-1染色、DCFH-DA探针染色等技术深入探究Cy7-Cl的作用机制。结果:1.Cy7-Cl体内外显著阻滞结直肠癌且具有良好的肿瘤靶向性。MTT实验表明Cy7-Cl显著诱导结直肠癌细胞活力下降。克隆形成实验确证Cy7-Cselleck产品l阻滞结直肠癌细胞活力,结果表明Cunderlying medical conditionsy7-Cl显著抑制结直肠癌细胞增殖。应用MC38细胞建立皮下荷瘤模型,尾静脉注射干预试剂,结果显示,与生理盐水组相比,Cy7-Cl干预组肿瘤体积显著减小;Cy7-Cl干预组细胞核染色较浅,细胞核分裂少,表明Cy7-Cl在体内抑制结直肠癌皮下荷瘤的生长。治疗结束后对主要脏器进行生化指标、脏器系数及血常规检测。结果显示,与生理盐水组相比,Cy7-Cl未显著引起裸鼠毒副作用。同前述建立MC38细胞BALB/C裸鼠皮下荷瘤模型,尾静脉注射5 mg/kg Cy7-Cl后采用小动物活体成像技术定时观察药物在肿瘤的富集情况,结果表明尾静脉注射Cy7-Cl 10-24 h后Cy7-Cl偏向分布于肿瘤部位。2.Cy7-Cl通过线粒体凋亡途径诱导结直肠癌细胞死亡。为了进一步探究Cy7-Cl的作用机制,我们应用不同的小分子抑制剂与Cy7-Cl联合作用,检测小分子抑制剂对Cy7-Cl抑制结直肠癌细胞活力的影响。结果显示,凋亡抑制剂Z-VAD-FMK、抗氧化剂NAC显著逆转Cy7-Cl诱导的细胞活力下降。应用Annexin V-FITC/PI双染法、Tunel染色法、Hoechst 33342/PI染色法和蛋白质印迹等实验方法确认Cy7-Cl诱导结直肠癌细胞凋亡。且Z-VAD-FMK、NAC显著逆转Cy7-Cl诱导的结直肠癌细胞凋亡。3.Cy7-Cl定位到结直肠癌细胞线粒体并诱导线粒体功能障碍。应用Mito-Green探针确定Cy7-Cl的线粒体定位能力,结果表明,Cy7-Cl具有良好的线粒体定位及靶向能力。随后我们应用线粒体膜电位JC-1探针染色,结果表明,Cy7-Cl诱导结直肠癌细胞线粒体膜电位下降。线粒体是产生ATP的主要部位,进一步应用ATP检测试剂盒确定Cy7-Cl对ATP产生的影响。结果显示,Cy7-Cl显著降低ATP的产生,且呈现剂量依赖性。以上结果表明,Cy7-Cl定位到结直肠癌细胞线粒体并诱导线粒体功能障碍。4.Z-VAD-FMK、NAC显著逆转Cy7-Cl诱导的ROS含量升高。线粒体是ROS的主要来源,ROS是引起线粒体损伤的主要途径之一,我们应用DCFH-DA探针染色法检测细胞的ROS含量。结果表明,Cy7-Cl诱导结直肠癌细胞ROS含量升高。凋亡抑制剂Z-VAD-FMK和抗氧化剂NAC显著逆转Cy7-Cl诱导的ROS含量升高。5.Cy7-Cl在体外经AMPK介导凋亡阻滞结直肠癌。由于AMP活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)在线粒体功能和细胞凋亡中起重要作用,本课题应用蛋白质印迹检测AMPK相关蛋白表达,结果显示AMPK、phospho-AMPKα(Thr172)的表达量升高。化合物C(Compound C,CC)作为AMPK的抑制剂能够显著逆转Cy7-Cl诱导的细胞活力下降、ROS含量升高和凋亡率升高。低表达AMPKα2显著逆转Cy7-Cl诱导的结直肠癌细胞凋亡,且显著逆转Cy7-Cl诱导的细胞活力下降和ROS含量升高。二甲双胍作为AMPK的激动剂和高表达AMPKα2结果反之。6.Cy7-Cl在体内经AMPK介导的凋亡阻滞结直肠癌。7.Cy7-Cl与结直肠癌上市药物联合使用促进结直肠癌细胞发生凋亡。结论:Cy7-Cl在体外显著抑制结直肠癌细胞增殖,在体内偏向分布于结直肠癌皮下荷瘤部位,并显著抑制结直肠癌皮下荷瘤的生长,且对荷瘤模型裸鼠无显著异常的毒副作用。Cy7-Cl可通过AMPK影响线粒体,导致线粒体膜电位下降,ATP含量下降,进而影响Bax和Bcl-2的表达,随后影响Cyt c从线粒体释放到胞浆,导致ROS含量升高,激活Cleaved Caspase-3酶活性,最终诱导结直肠癌细胞凋亡。

目的 比较用于检测血清碳酸氢盐(HCO_3~-)浓度的生化试剂的开瓶稳定性和试剂组分有效性，评估改良酶法试剂质量，探讨其临床应用前景。方法 每天固定时间测量两种酶法试剂的空白吸光度值，连续20 d,分别计算当天与第1天空白吸光度值的检测偏倚oncologic imaging(B_A);同时，用不同底物浓度的改良酶法试剂测量同一份定值质控品，连续20 d,分别计算检测值的前n天变异系数(CV)。结果 磷酸烯醇式丙酮酸羟化酶法(PEPC法)试剂开瓶20 d内空白吸光度值B_A为-19.03%±6.Bafilomycin A1说明书01%,最大可达-28.35%。方法学改良后的循环酶法(CEM法)试剂的空白吸光度值B_A为-1.47%±3.19%,最大B_A为-11.3%。使用PEPC法试剂检测低值和高值血清PORCN抑制剂HCO_3~-质控品，所得检测值前n天CV分别为6.50%±2.90%和6.34%±3.60%,最大分别为11.43%和13.64%。使用CEM法试剂检测值CV分别为3.71%±1.19%和3.47%±2.22%,最大分别为6.05%和7.48%。当加大CEM法试剂的底物还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸浓度，检测值CV进一步分别降低至3.62%±1.18%和2.35%±1.27%,最大分别为4.92%和3.72%。结论 CEM法试剂开瓶稳定性高于PEPC法试剂，反映出改良后检测方法学的优势。与此同时，加大底物浓度可长期维持试剂组分有效性，保证酶促反应稳定进行，进一步提高检测结果准确性，具有广泛的临床应用价值。

目的探讨抑郁症患者生活事件、痛苦容忍度、心理韧性和自杀风险间的关系,以及探究痛苦容忍度和心理韧性是否在生活事件与自杀风险间起中介作用,以期了解痛苦容忍度和心理韧性对自杀风险的影响路径。方法纳入2021年12月至2022年10月在广东省精神卫生中心就诊的136例抑郁症患者为研究对象。采用简明国际神经精神访谈(MINI-International Neuropsychiatric Interview,MINI)5.0中文版自杀模块评估自杀风险,并根据访谈结果≥ 6分的患者纳入自杀风险组(102例),<6分的患者纳入非自杀风险组(34例)。采用17项汉密尔顿抑郁量表(17-item Hamilton Depression Scale,HAMD-17)评估患者的抑郁病情严重程度,采用生活事件量表(Life Events Scale,LES)评估患者生活事件带来的精神压力,采用痛苦忍受性量表(Distress Tolerance Scale,DTS)评估患者的痛苦容忍度水平,采用Connor-Davidson心理韧性量表简版(10-item Connor-Davidson Resilience Scale,CD-RISC-10)评估患者的心理韧性水平。使用SPSS 26.0进行Pearson相关性分析和多元线性回归分析,选用SPSS宏程序PROCESS中的模型4和模型6进行中介效应检验。结果(1)Pearson相关分析显示,LES总分与MINI自杀模块总分呈显著正相关关系(r=0.198,P<0.05),DTS总分和CD-RISC-10总分与MINI自杀模块总分均呈负相关关系(r=-0.335、-0.373,P<0.01)。(2)回归分析显示,生活事件能够显著正向预测自杀风险(β=0.034,P<0.05);痛苦容忍度能够显著负向预测自杀风险(β=-0.355,P<0.01);心理韧性能够显著负向预测自杀风险(β=-0.533,P<0.001)。(3)中介效应分析显示,痛苦容忍度在生活事件与自杀风险间的中介作用模型中生活事件对自杀风险的总效应显著(β=0.034,P<0.05),直接效应不显著(β=0.017,P>0.05),痛苦容忍度在生活事件与自杀风险间的中介效应显著(β=0.017,P<0.05),中介效应占总效应的50.00%。心理韧性在生活事件与自杀风险间的中介作用模型中生活事件对自杀风险的总效应显著(β=0.034,P<0.05),直接效应不显著(β=0.023,P>0.05),心理韧性在生活事件与自杀风险间的中介效应显著(β=0.011,P<0.05),中介效应量占总效应量的32.35%。链式中介模型中总效应显著(β=0.034,P<0.05),生活事件对自杀风险的直接效应不显著(β=0.016,P>0.05),间接效应显著(β=0.018,P<0.05),生活事件主要通过链式中介路径(生活事件→痛苦容忍度→心理韧性→自杀风险)来影响抑郁症患者的自杀风险(β=0.008,P<0.05),总中介效应量占总效应量的52.94%,链式中介效应量占总效LY-188011生产商应量的23.53%。结论(1)抑郁症患者经历越多的生活事件,自杀风险增加;抑郁症患者的痛苦容忍度水平越高,心理韧性心理韧性水平越高,自杀风险降VE-822分子量低。痛苦容忍度和心理韧性均能够显著负向预测自杀风险。(2)抑郁症患者痛苦容忍度infant infection在生活事件与自杀风险间起完全中介作用。(3)抑郁症患者心理韧性在生活事件与自杀风险间起完全中介作用。(4)抑郁症患者痛苦容忍度、心理韧性在生活事件与自杀风险间起链式中介作用。

随着可移动电子器件、“物联网”以及新能源发电等产业的快速发展,人们对二次电池及其相关电极材料的MK-1775性能提出了更高的要求。与传统锂离子电池相比,水系锌离子电池(AZIB)具有安全性高、性价比优异、制造工艺简单等优点,使其有望成为下一代大规模电化学储能器件。近年来,人们致力于探索适用于AZIB的高性能电极材料,其中普鲁士蓝类似物正极材料由于其灵活可调的反应活性中心、较强的结构稳定性以及较低廉的成本等优势而备受关注。但是普鲁士蓝类似物正极材料在电池循环过程中普遍存在活性材料溶解和结构相变等问题,导致其较低的库伦效率和较快的容量衰减。与此同时,常规的金属锌负极存在枝晶生长、电化学腐蚀和副产物生成等问题,严重妨碍了水系锌离子电池的发展和商业化。因此,本论文针对普鲁士蓝基正极材料容量衰减快和金属锌负极稳定性差等问题,对AZIB的正、负极材料提出相应的改性方案,旨在开发出具有优异电化学性能的水系锌离子电池体系。具体研究内容如下:(1)通过共沉淀法制备了K_xFe_yMn_(1-y)[Fe(CN)_6]·z H_2O(y=0,0.5,1)正极材料,通过X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)和X射线光电子能谱(XPS)表征了样品的结构、形貌、元素组成及其价态差异。以K_xFe_yMn_(1-y)[Fe(CN)_6]·z H_2O作为正极,金属Zn作为负极,3 mol L~(-1)Zn(CF_3SO_3)_2水溶液作为电解液,构建了水系K_xFe_yMn_(1-y)[Fe(CN)_6]·z H_2O//Zn电池。其中K_xFe_yMn_(1-y)[Fe(CN)_6]·z H_2O(y=0.5)作为电极时电化学性能最为优异,在200 m A g~(-1)的电流密度下循环200圈之后的放电容量为70.3m A h g~(-1),容量保持率为97.1%。为了进一步确定反应机理,采用非原位XRD技术对K_xFe_yMn_(1-y)[Fe(CN)_6]_w正极在第一次循环过程中的结构演变进行了表征,阐明了电极中Zn~(2+)的存储机理。(2)首先通过共沉淀法合成了六氰合铁酸钒材料(VHCF),之后在不同温度下(400℃、500℃和600℃)对其进行煅烧,制备了由VO_2、KV_3O_8、Fe_2O_3和C共同组成的复合物正极材料。通过XRD、SEM和XPS对其进行了结构、形貌、元素组成以及物质占比的表征。以不同温度煅烧后的VHCF作为正极,金属Zn作为负极,3 mol L~(-1)Zn(CF_3SO_3)_2水溶液作为电解液,构建了水系锌离子电池,探究了不同温度煅烧对电池电化学性能的影响。结果表明,当煅烧温度为500℃时,其性能最好。在100 m A g~(-1)https://www.selleck.cn/products/dibutyryl-camp-bucladesine.html的电流密度下进行100次循环之后仍有111.3 m A h g~(-1)的容量,容量保持率为90.7%。并且测试结果显示,经过煅烧后产生的Fe_2O_3/C的矩阵抑制了钒的溶解,同时提高了材料的电导率,从而提高了电池的循环稳定性及倍率性能。(3)通过乙醛酸枝接的聚乙烯醇(PVA-GA)水凝胶涂层方法开发了高度稳定且无枝晶生长的金属Zn负极(PVA-GA@Zn)。通过XRD、SEM表征了制备出的PVA-GA@Zn负极表面具有均匀且致密的PVA-GA涂层。本实验以改性或未改性的金属锌片分别构建了Zn//Zn对称电池、Zn//Ti非对称电池以及Zn//KMn_(0.5)Fe_(0.5)FC全电池(电解液为3 mol L~(-1)Zn(CF_3SO_3)_2水溶液)。通过线性扫描伏安法(LSV)、循环伏安法(CV)和Zn沉积后的负极的SEM、XRD等测试对该水凝胶人工界面膜的保护机制进行了研究。结果表明,PVA-GA水凝胶涂层在锌负极侧具有抑制析氢反应和副产物产生的作用,使得锌负极实现更均匀的Zn成核和沉积。并且在对Zn//KMn_(0.5)Fe_(0.5)FC全电bioheat transfer池系统中进行测试时,PVA-GA@Zn负极在容量和循环稳定性方面也均表现出明显的优势。

目的铅是广泛存在于自然界中的环境持久性污染物,可以在机体内蓄积。中枢神经系统作为其靶器官,在神经发育的早期阶段最容易受到影响,并且铅引起人类早期神经分化过程的毒性效应及机制尚不明确。本研究通过构建人诱导多能干细胞(human induced Pluripotent Stem Cells,hiPSCs)诱导分化拟胚体(Embryoid bodies,EBs)以及脑类器官模型,探索醋酸铅对多能干细胞期、三胚层分化期和脑类器官的毒性作用。材料和方法分别用含0μmol/L、0.1μmoMG132供应商l/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L、醋酸铅的细胞培养液处理hiPSCs细胞及EBs 7天,CCK-8法检测细胞增殖活力,使用流式细胞仪检测细胞凋亡率及周期分布情况,使用RT-qPCR法检测hiPSCs多能性基因的表达情况及EBs三胚层(内胚层、中胚层和外胚层)特异性分化基因的表达情况。另外,提取EBs DNA对其外显子进行捕获及测序,同样进行单核苷酸多态性(SNP)、插入缺失标记(InDel)、染色体结构变异(SVs)和融合基因分析。脑类器官使用0μmol/L、0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.5μmol/L醋酸铅处理60天。通过免疫荧光标记GFAP,MAP2,GABA,VGselleck激酶抑制剂LUT1,CTIP2,SATB2,BRN2,TBR1等神经标志物,对类脑发育进行检测。结果凋亡结果显示hiPSCs凋亡率与醋酸铅染毒浓度存在剂量反应关系(P<0.05);在醋酸铅的作用下,hiPSCs细胞周期主要阻滞在G1与S期,G2/M期细胞率显著下降;RT-qPCR结果显示醋酸铅会影响hiPSCs多能性因子的表达,其中相比于对照组,醋酸铅染毒组Sox2基因表达降低,而Nanog基因表达升高(P<0.05);EBs外胚层(Dlk1),中胚层(Cxcr4,Gata6,Foxa2,Sox17),内胚层(Hand1,Mixl1,Sava)mRNA的表达都显著降低,说明醋酸铅抑制EBs向三胚层的自发分化。外显子测序结果发现,与对照组相比,醋酸铅染毒EBs组增加了2632个SNP突变;,以非同义突变最多,其中碱基改变形式以G>A/C>T、A>G/T>C为主;InDel检测共发现1502个插入缺失,其中以移码突变最多;SVs变异检测发现增加83个结构变异,以染色体缺失、染色体插入为主;由于染色体插入和缺失等产生37个融合基因。免疫荧光检测显示,与对照组相比,各染毒组脑类器官神经标志物表达均出现不同程度的下调。结论低浓度醋酸铅染毒可抑制hiPSCs的多能性,干扰EBs向三胚层的自发分化,导致神经发育相关基因发生突变并影响脑类器官的正常发育。本研究为铅暴露引起的早期胚胎神经发育毒性的Biometal trace analysis作用与机制提供了新的线索,为神经毒性的替代毒理学研究提供了新的思路。

目的 探讨达格列净(DAPA)在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导形成的人髓系白血病单核细胞(THP-1)源性泡沫细胞焦亡中的作用。方法 通过ox-LDL诱导THP-1源性巨噬细胞构建THP-1源性泡沫细胞焦亡模型。设置实验分组为：空白对照(NC)组antiseizure medications、ox-LDL组和药物干预(ox-LDL+DAPA)组；以油红O法检测巨噬细胞泡沫化水平；细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8)检测DAPA对泡沫细胞活力的影响；Hoechst 33342/PI双染检测THP-1源性泡selleck CHIR-99021沫细胞焦亡；细胞免疫荧光双染检测DAPA对泡沫细胞焦亡中焦亡关键因子Caspase-1表达的影响；采用微量酶标法检测细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性；采用qRT-PCR和Western blot分别检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、消皮素D(GSDMD)、白细胞介素(IL)-18、IL-1β mRNA和蛋白表达水平。结果 CCK-8法检测结果提示DAPA的最佳干预浓度为10μmol/L;油红O染色结果示THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞焦亡模型构建成功；与NC组比较，ox-LDL组中NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD、IL-18、IL-1β mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),碘化丙啶(PI)阳性细胞数及LDH活性增加(P<0.05),Caspase-1的荧光强度增强，细胞胞质内的红色脂滴增多；予DAPA干预后，ox-LDL+DAPA组中前述焦亡相关因子的mRNA和蛋白表达水平均降低(均P<0.05),PI阳性细胞数及LDH活性降低(P<0.05),Caspase-1的荧光强度减弱，细胞胞质内的红色脂滴减少(P<0.05)。结论 DAPA对ox-LDL诱导形成的TH购买TelaglenastatP-1源性泡沫细胞焦亡具有抑制作用。

二维(2D)电极应用于钾离子电池(PIBs)具有能量密度高、容量大的优点。然而,充放电过程中大尺寸K~+引起的体积变化显著以及电极界面扩散动力学缓慢的问题阻碍了其电化学性能的提高。基于此,本论文以二维层状过渡金属硫化物MoS_2电极为研究对象,通过引入导电基体MXene以及缺陷工程修饰策略实现二维复合电极的界面离子缺陷调控,从而进一步调节二维MoS_2基电极的储钾性能。论文中不仅详细研究了制备的电极材料的储钾性能、扩散行为以及循环前后的结构变化,还利用动态原位光谱测试和第一性原理计算对复合电极的储能机制进行了探究和阐明。该课题的实施和研究成果将为二维电极的结构修饰与电化学储能之间的研究提供重要的基础研究数据,为高容量钾离子电池电极材料的制备及应用开拓新的思路。(1)二维层状MoS_2材料具有多晶型结构,不同的晶型有不同的原子排列,进而表现出不同的物理化学性能。因此,本论文首先通过水热法和磁-水热法分别制备不同晶型的MoS_2和1T-MoS_2材料并将其用作钾离子电池负极,对比研究晶型的不同对电极结构与电化学性能的影响。结果表明,1T-MoS_2负极在相同电流密度时有更良好的储钾性能:0.1A g~(-1)时可逆容量为628 m A h g~(-1);2.0 A g~(-1)时容量为494 m A h g~(-1);0.1 A g~(-1)时循环500次后可逆容量保持在412 m A h g~(-1),这主要归因于1T-MoS_2材料相较于MoS_2具有更高的电导率和更大的层间距,从而赋予其更优的储能特性。(2)针对MoS_2基电极材料固有电导率低、体积变化明显和易聚集的缺点,通过水热法、磁水热法和原位生长策略引入导电基体V_2CT_x MXene,构建MoS_2@V_2CT_x和1T-MoS_2@V_2CT_x复合材料用作钾离子电池负极。结果表明,与MoS_2@V_2CT_x负极相比,1T-MoS_2@V_2CT_x负极具有更突出的储钾性能:0.1 A g~(-1)时容量达到887.3 m A h g~(-1);2.0 A g~(-1)时容量保持在563.6 m A h g~(-1),表明倍率性能良好;1.0和2.0 A g~(-1)时循环2000次后容量分别保持在601.2和374.7 m A h g~(-1),相应的容量保留率分别为69.4%和56.5%,证实了其良好的循环MCC950半抑制浓度性能。1T-MoS_2@V_2CT_x负极更好的储钾特性是CNS infection1T-MoS_2更高的容量以及1T-MoS_2@V_2CT_x更大的比表面积综合作用的结果。此外,原位测试和DFT计算证实了1T-MoS_2@V_2CT_x电极可逆的储能机制、稳定的结构以及增强的离子扩散动力学行为,这同样是其良好的电化学性能的来源。(3)通过一种简便的有机溶剂拖曳法将Mo空位缺陷引入1T-MoS_2@V_2CT_x电极中实现二维复合电极的界面离子缺陷调控,从而进一步调节复合电极的离子扩散和储钾特性。结果表明,与1T-MoS_2@V_2CT_x电极相比,引入缺陷后的D-1T-MoS_2@V_2CT_x电极具有增强的储钾性能:0.1 A g~(-1)时容量达到959.9 m A h g~(-1);2.0 A g~(-1)时可逆容量可达63INCB018424作用2.1 m A h g~(-1),表明倍率性能良好;0.1 A g~(-1)时循环500圈后容量保持在820.7 m A h g~(-1),相应的容量保留率为90.6%,印证了良好的循环性能。D-1T-MoS_2@V_2CT_x电极更优的储钾性能表明其中存在的空位不仅为K~+提供了更丰富的吸附/存储/活性位点;还有助于K~+穿过空位进行扩散以促进K~+迁移/传输以及界面电荷的转移。

目的:在肿瘤微环境中,肿瘤细胞、基质细胞和免疫系统细胞之间的相互作用,导致肿瘤微环境的细胞成分向促进肿瘤恶性进展的方向改变。肿瘤微环境在细胞恶性进展、免疫逃避和治疗抵抗中发挥关键作用。肿瘤相关巨噬细胞作为肿瘤微环境中最丰富的一种细胞类型,对肿瘤发生和肿瘤微环境起中心调控作用。巨噬细胞通过产生细胞因子、趋化因子和生长因子来影响血管内皮细胞、树突细胞、成纤维细胞和T细胞等的功能,其造成的免疫抑制微环境是肿瘤治疗失败的关键原因。因此,重塑肿瘤相关巨噬细胞来改变肿瘤微环境,已成为治疗肿瘤的有效策略。IFN-γ是促进抗肿瘤免疫的关键介质,在抗肿瘤免疫中发挥了关键作用。IFN-γ可诱导巨噬细胞向M1型极化并抑制肿瘤生长,然而具体的作用机制还有待进一步阐明。细胞周期蛋白G2(cyclin G2)是一种非经典的细胞周期蛋白,由CCNG2基因编码,可以负性调控细胞周期,阻碍细胞周期的进程。Cyclin G2在各种癌细胞中发挥肿瘤抑制因子的作用,然而其在免疫细胞中的作用还未见报道。鉴于巨噬细胞在肿瘤微环境中的核心调控作用,本研究主要探讨在IFN-γ作用下巨噬细胞中cyclin G2在体内外对肿瘤进展的作用及其分子机制,为肿瘤的靶向治疗提供理论基础。研究方法:1.检测cyclin G2在不同类型巨噬细胞中的表达:将THP-1细胞、人外周血单核细胞和小鼠骨髓来源的单核细胞诱导成不同类型巨噬细胞,使用RT-q PCR和Western blot检测cyclin G2的表达。2.明确巨噬细胞regular medication中cyclin G2对体内肿瘤生长的影响:将结肠癌细胞MC38或肺癌细胞LLC与WT或Ccng2~(-/-)C57BL/6小鼠的骨髓来源巨噬细胞混合,皮下接种于C57BL/6小鼠右背侧。合适时间腹腔注射IFN-γ,定期测量肿瘤大小。3.评估巨噬细胞中cyclin G2对细胞毒性T细胞趋化及杀伤能力的影响:采用免疫组化染色、免疫荧光染色和流式细胞术检测小鼠肿瘤组织中细胞毒性T细胞的数量。此外,通过细胞毒性T细胞的趋化实验评估巨噬细胞中cyclin G2对细胞毒性T细胞趋化的作用,流式细胞术检测细胞毒性T细胞颗粒酶B和穿孔素的表达。4.评估巨噬细胞中cyclin G2对血管生成的影响:采用免疫组化染色检测小鼠肿瘤组织中血管的数量。体外成管实验探究巨噬细胞中cyclin G2对血管内皮细胞成管能力的作用。5.验证CXCL9是cyclin G2发挥作用的下游效应分子:通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测敲除cyclin G2后CXCL9的分泌水平,将CXCL9重组蛋白加入至巨噬细胞的条件培养基中,采用细胞毒性T细胞的趋化实验以及血管内皮细胞的成管实验进行验证。6.探究cyclin G2调控CXCL9分泌的机制:采用RT-q PCR检测巨噬细胞CXCL9的m RNA表达,通过Western blot检测STAT1和p-STAT1(Y701)的表达水平,核质分离实验以及免疫荧光染色评估STAT1在细胞质和细胞核的分布。7.明确PP2Ac是参与cyclin G2调控STAT1核含量的关键分子:通过免疫沉淀(IP)研究cyclin G2、STAT1以及PP2Ac三者的关系。敲低PP2Ac后,通过Western blot检测STAT1和p-STAT1(Y701)的表达水平,核质分离实验以及免疫荧光染色评估STAT1在细胞质和细胞核的分布。结果:1.IFN-γ能够上调巨噬细胞cyclin G2的表达。2.IFN-γ通过cyclin G2发挥抑制结肠癌和肺癌的作用:将结肠癌或肺癌细胞分别与WT或Ccng2~(-/-)小鼠骨髓来源巨噬细胞混合后皮下接种于小鼠右背侧,合适时间腹腔注射IFN-γ,构建皮下成瘤模型。与WT组相比,Ccng2~(-/-)组的肿瘤重量和体积显著增加,并且Ccng2~(-/-)组Ki-67的阳性细胞数显著增多。结果表明敲除cyclin G2可以减弱IFN-γ对结肠癌和肺癌的抑癌作用。3.巨噬细胞敲除cyclin G2减少对细胞毒性T细胞的招募:与WT组肿瘤组织相比,Ccng2~(-/-)组中细胞毒性T细胞的数量明显减少。趋化实验证明Ccng2~(-/-)组处理的细胞毒性T细胞趋化能力减弱。结果表明巨噬细胞敲除cyclin G2减少细胞毒性T细胞的募集,从而减弱了IFN-γ的抑癌作用。4.巨噬细胞敲除cyclin G2促进肿瘤血管生成:与WT组肿瘤组织相比,Ccng2~(-/-)组中血管的数量明显增加。成管实验证明Ccng2~(-/-)组处理的血管内皮细胞成管能力增强。结果表明巨噬细胞敲除cyclin G2促进了血管生成,从而减弱了IFN-γ的抑癌作用。5.巨噬细胞中cyclin G2通过CXCL9调节细胞毒性T细胞趋化和血管生成。与WT组相比,Ccng2~(-/-)组中CXCL9的分泌减少。回复实验验证CXCL9是cyclin G2发挥作用的下游效应分子。6.Cyclin G2通过促进STAT1核转位上调CXCL9的m RNA表达。与selleck NMRWT组相比,Ccng2~(-/-)组中CXCL9的m RNA表达下调。此外,敲低cyclin G2后,p-STAT1(Y701)的蛋白表达下调,STAT1的核含量降低。结果表明cyclin G2通过STAT1调控CXCL9的转录。7.Cyclin G2介导的STAT1核转位依赖于PP2Ac:STAT1与cyclin G2都与PP2Ac存在相互作用,并且敲低cyclin G2时STAT1结合PP2Ac的含量增加。此外Regorafenib临床试验,与对照组相比,敲低PP2Ac上调了p-STAT1(Y701)的表达,STAT1的核含量得到回复。结果表明cyclin G2以PP2Ac依赖的方式增加STAT1的核含量。结论:1.IFN-γ能够上调巨噬细胞cyclin G2的表达,并通过cyclin G2发挥抑制结肠癌和肺癌的作用。2.Cyclin G2以PP2Ac依赖的方式促进STAT1核转位来上调CXCL9的m RNA表达,进而使CXCL9的分泌增加,导致细胞毒性T细胞的募集和抑制血管生成,最终抑制肿瘤。

目的 研究Th1/Th2及相关细胞因子、共信号分子分化簇抗原28(CD28)、可诱导共刺激分子（ICOS）、程序性死亡受体1(PDRemediating plant-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)在急性冠脉综合征（ACS）患者外周血中的表达，并探讨其是否参与ACS的发病机制。方法 前瞻性选取2021年7月至2022年4月经中山大学附属第三医院粤东医院心血管内科诊断为ACS的120例患者作为研究对象，采用ACS不同亚型的诊断标准将其分为不稳定型心绞痛（UA）组、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）组、非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）组，每组各40例。选取同时间段行冠状动脉造影检查正常的40例住院患者作为对照组。采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定血清中的干扰素（IFN）-γ、白介素（IL）-2、IL-4和IL-10表达水平，采用流式细胞仪检测外周血互助性T细胞（Th）1、Th2细胞占CD4~+T细胞的比例以及共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4在CD4~+T细胞表面的表达水平，通过冠脉造影手术采用SYNTAX评分法评估ACS患者冠脉病变严重程度，比较四组上述各指标之间的差异并进行各指标之间的相关性分析。结果 ACS患者外周血中Th1/Th2比值、Th1数量及相关细胞因子IFN-γ和IL-2的血清表达量高于对照组，其外周血CD3~+CD4~+T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达量也高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）；另外，STEMI组和NSTEMI组的这些指NSC 125973生产商标也均高于UA组，差异有统计学意义（P<0.05）;SYNTAX评分与外周血Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2水平和外周血CD3~+CD4~+T细胞的CD28及ICOS表达量呈明显正相关（P<0.05）；外周血CD3~+CD4~+T细胞的CD28及ICOS表达量均与Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2表达水平呈明显正相关（P<0.05）。结论 ACS患者外周血中的Th1、相关细胞因子IFN-γ和IL-2以及其CD3~+CD4~+T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达较健康体检者均明显上调，其均可能在ACS的发病机制CB-839供应商中发挥了重要作用。