ALK抑制剂

目的 探索牙龈卟啉单胞菌感染的非酒精性脂肪肝局部巨噬细胞功能变化及潜在调控靶点。方Biokinetic model法 利用单细胞测序技术分析合并牙龈卟啉单胞菌感染的非酒精性脂肪性肝炎（NASH）小鼠肝脏中的各类细胞表型及其功能变化。进一步利用实时荧光定量聚合酶链反应、酶联免疫吸附和免疫荧光染色观察肝脏组织中的炎症程度及巨噬细胞抗原呈递功能标志物表达水平，利用油红染色观察NASH肝脏局部脂肪组织堆积情况。体外利用牙龈卟啉单胞菌来源的脂多糖干预小鼠腹腔巨噬细胞，通过实时荧光定量聚合酶链反应和转录组测序验证体内试验结果。结果 与健康肝脏中的巨噬细胞相比，牙龈卟啉单胞菌感染的NASH小鼠肝脏巨噬细胞表GSK J4试剂现出了显著的异质性，其高表达包括C1qb、C1qc、Mafb、Apoe和Cd14在内的多个炎症基因，但ICI 46474分子式与抗原提呈功能相关的基因Cd209a、H2-Aa、H2-Ab1和H2-DMb1等的表达相对较低。进一步的体内外研究表明，这些巨噬细胞的活化和浸润可能是由于局部牙龈卟啉单胞菌来源的脂多糖的积累和诱导造成的。结论 牙龈卟啉单胞菌来源的脂多糖诱导非酒精性脂肪肝的局部巨噬细胞免疫耐受表型，可能是牙周炎致病菌感染促进NASH炎症和发病的关键机制。本研究结果进一步阐明巨噬细胞在NASH相关疾病发病过程中的功能障碍和调节机制，并为其临床治疗提供了几个潜在的调控靶点。

目的：分析产后出血患者应用卡前列素氨丁三醇与缩宫素治疗对凝血功能和血流动力学的影响。方法：选择2020年1—12月在我院治疗的产后出血患者59例，根据治疗方案不同将患者分成两组，将应用缩宫素治疗的29例患者设为对照组，应用卡前列素氨丁三醇结合缩宫素治疗的30例患者设为观察组，比较两组患者凝血功能、血流动力学及不良反应情况。结果：与对照组相比，观察组治疗后活化部分凝血活酶medicine shortage时间（APTT）MK-2206、凝selleck血酶原时间（PT）更短，血小板计数（PLT）值更低，纤维蛋白原（FIB）水平更高，组间存在统计学差异（P<0.05）。相较于对照组，观察组治疗后舒张压（DBP）、收缩压（SBP）更高，心率（HR）更低，组间存在统计学差异（P<0.05）。与对照组比较，观察组不良反应未明显增多，对比无统计学差异（P>0.05）。结论：产后出血患者应用卡前列素氨丁三醇与缩宫素治疗，能够显著减轻患者凝血功能障碍，稳定血流动力学，且不良反应未明显增多，安全可靠。

目的 观察柴胡加龙骨牡蛎汤治疗糖尿病性便秘合并抑郁症的临床疗效。方法 将60例糖尿病性便秘合并抑郁症患者按照随机数字表法分为2组，对照组30例予西医常规治疗，治疗组30例在对照组治疗基础上加用柴胡加龙骨牡蛎汤治疗。2组均治疗8周后统计疗效，比较2组治疗前后便秘症状(包括粪便性状评分及每周排便次数)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分、血糖指标[包括空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、糖化血红蛋白(HbA_1c)]、血脂指标[包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]及同型半胱氨酸(Hcy)水平变化情况。结果 治疗组总有效率76.7%(23/30),对照组总有效率50.0%(15/30),治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较，2组治疗后粪便性状评Dibutyryl-cAMP分均升高(P<0.05),每周排便次数均增多(P<0.05),且治疗组治疗后粪便性状评分高于对照组(P<0.05),每周排便次数多于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较，2组治疗后抑郁症状HAAZD1152-HQPA浓度MD评分均降低(P<0.05),且治疗组治疗后HAMD评分低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较，2组治疗后血糖指标FPG、2 hPG及HbA_1c水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后FPG、2 hPG及HbA_1c水平均低于对照组(P<0.05Human biomonitoring)。与本组治疗前比较，2组治疗后血脂指标TC、TG、LDL-C水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后TC、TG、LDL-C水平均低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较，2组治疗后血清Hcy水平均降低(P<0.05),且治疗组治疗后血清Hcy水平低于对照组(P<0.05)。结论 柴胡加龙骨牡蛎汤治疗糖尿病性便秘合并抑郁症疗效确切，可有效改善患者便秘症状，促进排便，缓解抑郁情绪，调节血糖、血脂代谢，降低Hcy水平，安全可靠。

肿瘤相关巨噬细胞（tumor-associated macrophages, TAMs）具有极高的可塑性，是肿瘤微环境（tumor microenvironment, TRP56976ME）中含量最丰富的免疫细胞。各种TME成分（如细胞因子、趋化因子以及外泌体等）将TAMs招募到肿瘤区域内。随后，这些环境因子把TAMs诱导为抗肿瘤状态（M1样）或促肿瘤状态（M2样）之间的某一极化状态。另外，TAMs的极化过程是连续的，并且会随着肿瘤LEE011恶性进展而逐渐地朝向M2样状态，构成了一个有利于肿瘤生长和转移的正反馈环。因此，深入研究影响TAMs极化的各种因素和机制，有助于研发一种新的且可以与其他免疫治疗相结合的肺癌治疗策略。在既往的研究中已发现了许多可以促进TAMs的M2极化的分子和通路。然而，肿瘤细胞、间质细胞和TAMs之间这种复杂的串扰的潜在机制仍然难以研究adhesion biomechanics清楚。在这篇综述中我们总结了促进TAMs向M2表型极化的各种因素，并进一步探讨了相关的分子机制。

为了改善医用Mg-1Zn-0.2Ca-1MgO合金的耐蚀性,满足骨修复植入材料临床医用要求,本文在硅酸、磷酸混合电LY2157299 molecular weight解液中采用微弧Nirmatrelvir溶解度氧化工艺在合金表面制备微弧氧化陶瓷层,系统分析了不同正向电压对Mg-1Zn-0.2Ca-1MgO合金微弧氧化涂层的影响。为进一步提高镁基合金的成骨性能,采用浸泡法在微弧氧化涂层表面生长聚多巴胺,探讨了不同浸泡时间对微弧氧化—聚多巴胺涂层组织性能的影响。通过冷冻干燥法合成β-环糊精与柚皮苷的包合物,研究了不同包合物浓度下聚多巴胺—β-环糊精/柚皮苷涂层组织性能的变化及模拟体液中柚皮苷的释放。为保护微弧氧化涂层免受多巴胺的破坏,采用浸渍法在微弧氧化涂层上结合聚己内酯,后续再次进行载药处理。通过对聚己内酯载药涂层物相、微观形貌、耐蚀性及成骨性研究,得出以下结论:(1)微弧氧化过程中不同正向电压下制备的MAO样品主要由Mg、MgO,Mg2SiO4,Ca3(PO4)2组成。涂层的表面、截面显微组织结果显示,电压从450 V增加到550 V时,涂层孔洞逐渐被填充,致密性提高,样品耐蚀性提高。电化学和析氢实验结果显示,F3涂层具有最大的腐蚀电位:-1.318 V,最低的腐蚀电流密度:1.808 μA/cm2和最低的年腐蚀速率:0.09 mm/y。继续升高电压(600 V)会造成大孔的产生,同时截面出现较多的缺陷,加剧了腐蚀离子的破坏。(2)微弧氧化涂层样品在多巴胺缓冲液中浸泡时,涂层会伴随浸泡时间的延长而发生变化。在浸泡时间达到10 h时,孔隙率达到最低(13.62 %),涂层最为致密,同时涂层厚度达到40 μm。电化学和析氢实验证明,涂层耐蚀性随着浸泡时间先增高后降低,在浸泡时间为10 h时具有最佳的耐蚀性能。(3)包合体药物加入到多巴胺缓冲溶液后,随着浓度的增加,涂层由50 μm增加到57 μm,致密性也在逐步提高。当浓度达到2 wt %时,电化学结果显示涂层具有最高的腐蚀电位(-1.345 V)和最低的腐蚀电流密度(2.162 μA/cm2)。(4)随着聚己内酯浓度的增高,涂层的陶瓷物相组成不变,但是20-25°的聚己内酯特征峰增强,涂层耐蚀性有所提高。载药处理后,通过线性回归方程测得聚己内酯载药涂层在模拟体液中的柚皮苷释放量与微弧氧化载药涂层相当,表明聚己内酯的添加不会影响柚皮苷在体内的释放。体外细胞实验结果显示,镁合金在后期释放Mg2+并造成一定的细胞毒性,微弧氧化载药涂层在后期具Hellenic Cooperative Oncology Group有最好的细胞活性。由于柚皮苷具有诱导成骨因子表达促成骨能力,免疫印迹同样显示微弧氧化载药涂层具有最好的促成骨性能。

目的肾细胞癌是常见的泌尿生殖系统恶性肿瘤,在我国每年的确诊人数呈逐年增长的趋势。近年来得一些研究发现,肾细胞癌的早期诊断以及准确分期对于优化后续治疗方法至关重要。本研究通过回顾性研究分析了肾细胞癌患者与正常患者的CD70表达的差异性,并且探究CD70在肾细胞癌上的诊断以及与临床病理特征的相关性。方法收集2019年1月至2022年12月于蚌埠医学院第一附属医院治疗的肾细胞癌患者临床资料和病理资料,临床资料包括性别、年龄和存活情况;病理资料包括病理分型、肿瘤大小、有无淋巴结转移、肿瘤分化程度、肾静脉浸润、肿瘤坏死、远处转移状态、VHL、PD-L1、细胞毒性T细胞、调节性T细胞、M2巨噬细胞和FAP+CAF表达情况。经纳入标准和排除标准进一步筛选后,共有113名患者入选肾细胞癌组,另外有30例正常肾组织设为对照组。对肾细胞癌患者表达CD70的临床特征及其相关危险因素分析,通过多因素Logistic回归分析法分析肾细胞癌患者表达CD70的独立危险因素。计数资料数据比较CD70表达与临床病理特征之间的相关性采用独立t检验和皮尔逊卡方(χ~2)检验。肿瘤CD70与肿瘤微环境中免疫相关细胞标记物的表达采用皮尔逊相关系数。结果113名肾细胞癌患者中,肾透明细胞癌、乳头状肾癌和嫌色癌CD70表达的阳性率分别为87.01%、43.75%和20.00%,透明细胞癌CD70表达高于乳头状癌、嫌色癌(p<0.05)。其中透明细胞癌中CD70在低分化肾癌转移中表达高于高分化的肾癌(p<0.05),在高分化、低分化和肾癌转移瘤中的阳性率分别为88.24%、86.05%和75.00%。低分化的肾透明细胞癌中,CD70的高表达率最高,达到55.81%,在肾癌转移灶中为50.00%,而高分化良好肾癌中高表达率最少为41.18%。CD70的表达与患者性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度、肾静脉浸润、肿瘤坏死和远处转移状态(p<0.05)密切相关。在生存预后较差的患者中,CD70的表达较高(p<0.05)。多因素回归分析发现性别(OR=3.568 95%C确认细节I:1.194-10.661)、肿瘤大小(OR=3.005Genetic studies 95%CI:1.136-7.950)、肿瘤坏死(OR=3.717 95%CI:1.153-11.978)和肿瘤远处转移(OR=10.805 95%CI:1.803-64.751)是肾细胞癌患者表达CD70的独立危险因素(p<0.05)。肿瘤微环境中CD70的表达与PD-L1的表达及细胞毒性T细胞、FAP+CAF的浸润呈正相关(p<0.05)。结论肾细胞癌组织CD70阳性表达率高,其中肾透明细胞癌CD70表达与患者性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度、肾静脉浸润、肿瘤坏死、远处转移以PLX3397体内实验剂量及患者的生存状态有关。CD70在肾透明细胞癌的高分化、低分化和转移性病变中的表达阳性率均较高,是潜在的预测肾透明细胞癌的指标。同时CD70与肿瘤微环境中的PD-L1的表达及细胞毒性T细胞、FAP+CAF的浸润呈正相关,可视化和监测CD70在RCC中的表达既有助于肾细胞癌的诊断,也有助于指导CD70的靶向治疗。

为了解国内猪细小病毒（PPV）的流行、毒株变异情况，采用PPV特异性PCR方法检测2020—2021年从江苏、河南和北京3个省市采集的组织样品，将PPV阳性病料接种猪睾丸细胞（ST）进行Evolutionary biology病毒分离，利用间接免疫荧光方法（IFA）、实时荧光定量PCR(qPCR)和电镜观察对分离株进行鉴定，并测定分离株全基因组核苷酸序列，之后应用MEGA 6.0和MegAlign软件对分离株进行遗传变异分析。结果表明，成功分离到1株PPV，命名为BJ2株；全基因组核苷酸一致性分析结果显示，BJ2株与皮炎型强毒株Kresse株、Challenge株GNE-140核苷酸一致性为99.3%，与实验室2019年分离株HeN1202株核苷酸一致性为95.9%;VP2基因核苷酸一致性和遗传进化分Ipatasertib NMR析结果显示，BJ2株与德国27a株处于同一进化分支，其核苷酸一致性为99.3%,HeN1202株与弱毒株NADL-2株亲缘关系较近；BJ2株与德国27a株相比，VP2蛋白氨基酸序列存在2个位点差异。综上，PPV BJ2株与德国27a株亲缘关系较近。

目的 探讨车叶草苷调节核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/胱天蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)信号通路对脓毒症大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法 取50只SD大鼠腹腔内注射5 mg/kg脂多糖建立脓毒症肺损伤模型，随机数字表法分为模型（M）组、车叶草苷低剂量（AL）组（17.5 mg/kg）、车叶草苷中剂量（AM）组（35 mg/kg）、车叶草苷高剂量（AH）组（70 mg/kg）、车叶草苷高剂量（70 mg/kg）+尼日利亚霉素（NLRP3激活剂，1 mg/kg）组（AH+N组），每组10只；另取10只SD大鼠灌胃等剂量生理盐水作对照（C）组。分组干预后，检测各组大鼠肺功能指标[每分钟通气量（MV）、吸气阻力（Ri）]与动脉血氧分压[p(O_2)];HE染色检测各组大鼠肺组织病理形态；瑞氏-姬姆萨染色分类计数各组大鼠肺泡灌洗液（BALF）中性粒细胞、巨噬细胞和淋巴细胞数；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠血清炎性细胞因子白细胞介素（IL）-6、IL-8及IL-1β水平；免疫荧光染色检测各组大鼠肺组织细胞焦亡情况，比较NLRP3与GSDMD在肺组织中表达情况；Western blot检测各组大鼠肺组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路相关蛋白表达。结果 与C组比较，M组MV、p(O_2)降低，Ri及BALF中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞数升高，血清IL-6、IL-8及IL-1β水平升高，肺组织NLRP3、GSDMD相对荧光强度和NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达升高（P<0.05）；与M组比较，AL组、AM组、AH组MV、p(O_2)均升高，Ri及BALF中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞数下降，血清IL-6、IL-8及IL-1β水平下降，肺组织NLRP3、GSDMD相对荧光强度和NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达PacBio and ONT均降低（P<0.05）；与AH组比较，AH+N组MV、p(O_2)降低，Ri及BALF中性粒细胞Lapatinib核磁、巨噬细胞、淋巴细胞数升高，血清IL-6、IL-8及IL-1β水平升高，肺组织NLRP3、GSDMD相对荧光强度和NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达升高（P<0.05）。结论 高剂量车叶草苷可通过下调NL点击此处RP3/Caspase-1/GSDMD通路活性，抑制脓毒症大鼠肺组织炎症，减弱肺组织炎性损伤及肺组织细胞焦亡，修复肺功能。

目的:制备一种生物安全性良好的多功能纳米诊疗平台Mn O_2/Ag_3Sb S_3NPs,该纳米诊疗平台可以通过EPR效应在肿瘤富集并与肿瘤微环境响应性降解释放Mn~(2+)以及Ag_3Sb S_3NPs,实现NIR-Ⅱ区光声成像(PAI)和核磁共振成像(MRI)引导下的光动力/光热/化学动力学(PDT/PTT/CDT)氧自供联合治疗。方法:1.纳米诊疗平台的构建及表征通过典型的溶剂热法合成Ag NPs以及Ag_3Sb S_3NPs,用DSPE-PEG-NH_2对Ag_3Sb S_3NPs进行修饰,最后对Ag_3Sb S_3-PEG NPs进行高锰酸钾氧化形成可降解的Mn O_2/Ag_3Sb S_3NPs(MA NPs)。采用透射电镜(TEM)、扫描电镜(SEM)、动态光散射粒度仪(DLS)、紫外吸收光谱(UV-vis)、EDX能谱分析、傅里叶红外光谱(FT-IR)、粉末X射线衍射(XRD)对纳米颗粒的理化性质进行研究;通过TEM、UV-vis、电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)监测MA NPs在p H 7.4、6.5、6.5/GSH条件下的形貌变化和离子释放,评估降解性能;使用DTNB探针监测MA NPs对GSH的消耗;利用核磁共振成像及光声成像设备评估MA NPs的体外成像性能;使用溶氧仪监测MA NPs催化H_2O_2产生O_2的能力;通过探针MB、DPBF分别检测MA NPs产生·OH以及~1O_2的能力,并且通过电子顺磁共振(ESR)进行双重验证;利用热成像仪评估MA NPs的光热性能并计算光热转化效率。2.纳米诊疗平台的体外性能评价通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测MA NPs的潜在细胞毒性;使用共聚焦显微镜以及流式细胞仪检测4T1细胞对MA NPs的摄取能力;以DCFH-DA作为探针评估MA NPs在细胞层面ROS的产生;采用[Ru(dpp)_3]Cl_2(RDPP)评价MA NPs在细胞水平产生O_2的能力;采用AM/PI双染法及流式细胞仪检测MA NPs在不同条件下对细胞的诱导凋亡作用;通过线粒体膜电位探针检测MA NPs在不同条件下线粒体膜的变化。3.纳米诊疗平台的体内性能评价建立小鼠4T1皮下乳腺癌模型,为了评估体内成像性能,分别在给药前后对小鼠肿瘤部位进行核磁共振成像以及光声成像扫描;将4T1荷瘤小鼠分为不同的治疗组,观察小鼠打药后14天内的体重、肿瘤体积变化,并于14天后将小鼠安乐死,将其解剖并对肿瘤进hepatobiliary cancer行拍照、H&E染色以及TUNEL染色以评估治疗效果;收集小鼠血液进行血生化分析,收集治疗后小鼠主要脏器做H&E切片染色,综合评估该纳米颗粒的生物安全性。结果:1.从TEM、SEM以及DLS结果可以看出MA NPs分散均匀,粒径约为150nm呈蜂窝球形结构,EDX能谱分析表明,MA NPs的元素组成为Sb、S、Ag、Mn和O,FT-IR、UV-vis、XRD均证明MA NPs的成功制备;MA NPs可以被肿瘤微环境中的H~+和GSH活化降解释放Mn~(2+),而在中性环境下可以保持稳定。降解释放的Mn~(2+)以及Ag_3Sb S_3NPs分别具有T1核磁成像以及NIR-Ⅱ区的光声成像能力,用于肿瘤的双模态成像;降解释放的Mn~(2+)还可以催化H_2O_2产生·OH发挥CDT效能;降解释放的Ag_3Sb S_3NPs在1064 nm激光的照射下可以产生~1O_2,而且MA NPs中的Mn O_2可以在肿瘤微环境中H~+作用下催化H_2O_2产生O_2,改善肿瘤的缺氧环境,为PDT提供O_2,提高PDT效率;在1064 nm激光的照射下,MA NPs溶液升温性能呈浓度依赖正相关,光热selleck NMR转化效率可达到23.15%,具有良好的NIR-Ⅱ区光热治疗潜力。2.通过CCK-8法表明当MA NPs的浓度达到200μg m L~(-1)时,细胞存活率仍大于80%,表明纳米颗粒具有良好的生物相容性;MA NPs的细胞摄取在5 h达到饱和;MA NPs在4T1细胞水平可以产生ROS,分别是在1064 nm,1 W cm~(-2)激光照射产生~1O_2发挥PDT的作用以及在模拟肿瘤微环(TME)的条件下可发生类芬顿反应产生·OH,两者联合可产生丰富的ROS来杀死肿瘤细胞;MA NPs可以与TME发生作用诱导H_2O_2产生O_2,并具有浓度依赖性;通过AM/PI双染法及流式细胞术检测的结果表明,MA/GSH/HCO_3~-/H_2O_2/Laser/p H 5.5组中PDT/PTT/CDT三者联合治疗,优势互补,治疗效果最好。JC-1染色结果与活/死细胞实验以及流式细胞凋亡实验结果一致,表明MA NPs可通过线粒体功能损伤诱导细胞凋亡。3.通过监测MA NPs在荷瘤小鼠肿瘤部位MR以及PA的信号强度,结果表明Mwww.selleck.cn/products/gw4869A NPs可以通过EPR效应逐渐在肿瘤部位富集,并且在第8 h富集达到顶峰后信号下降,由此确定给予激光治疗的最佳时间点为第8 h;通过对不同治疗组小鼠肿瘤体积的监测,MA+L组中PDT/PTT/CDT三者联合治疗,肿瘤几乎被完全清除,具有优异的治疗效果;而且从各组中小鼠血生化以及主要脏器的H&E染色分析可得MA NPs对小鼠无明显毒性。结论:综上所述,此课题成功合成了一种具有显著生物相容性和生物降解性的智能响应型纳米诊疗平台Mn O_2/Ag_3Sb S_3NPs。在弱酸性肿瘤微环境的条件下,MA NPs通过类芬顿反应降解生成剧毒的羟基自由基。此外,MA NPs可以通过催化内源性H_2O_2生成O_2和消耗过表达GSH来调节TME,分别减轻了肿瘤缺氧和削弱肿瘤的抗氧化能力,从而提高了PDT和CDT效率。分散在MA NPs上的Ag_3Sb S_3NPs可作为光敏剂进行NIR-II区光动力治疗和光热治疗发挥抗肿瘤作用,实现了1064 nm单激光触发的NIR-II PTT/PDT效应,取得了显著的肿瘤协同治疗效果。不仅如此,MA NPs在肿瘤PAI和MRI方面也显示出了很大的潜力,大大提高早期恶性肿瘤的检出率。总之,MA NPs为双模态MR/PA成像精确诊断肿瘤提供了一条良好的途径,并为1064 nm激光照射下的氧自供CDT/PTT/PDT联合治疗提供了一个良好的一体化TME响应纳米诊疗平台。

过量磷肥施用会改变土壤理化生性质,影响土壤水分及养分的迁移转化规律,并可能直接影响相关氮转化微生物,进而调控整个氮转化过程。目前针对施肥条件下土壤氮素转化的研究多集中于有机肥与氮肥,关于磷肥对其的影响报道较少。本研究以大田不同磷肥施用类型及施用量的长期定位试验土壤和实验室加磷土壤为研究对象,通过分子生物学方法测定其硝化与反硝化功能微生物丰度及群落结构,基于微宇宙培养试验测定其土壤硝化、反硝化过程及其N2O排放速率,基于15N同位素标记试验测定其土壤氮素转化关键过程速率,并通过水分一维垂直入渗试验测定其土壤水分运移规律,阐明了磷肥施用类型及不同施磷量对土壤氮素转化及水分运移的长期及短期影响机制,以期为氮磷减施、温室气体减排提供理论依据。本研究主要结论如下:(1)长期磷肥配施对硝化过程、硝化及反硝化过程N2O排放以及相关微生物功能基因丰度的影响存在显著差异。单施磷肥(P)较不施肥(CK)显著促进了硝化过程,其在好氧培养下的N2O累积量增大了 45.10%,厌氧培养下N2O累积量减小了 40.58%,氨氧化古菌(AOA)amoA和反硝化细菌nosZ功能基因丰度分别降低了35.71%和34.32%,其余功能基因丰度无显著差异;磷肥有机肥配施(MP)较单施有机肥(M)显著促进了硝化过程和反硝化过程,其在好氧条件下N2O累积量增大了 46.50%,厌氧条件下减小了29.25%,氨氧化细菌AOB-amoA和反硝化细菌nirK、nirS、nosZ等功能基因丰度分别提高了 191.77%、97.72%、64.96%、36.30%;氮磷配施(NP)较单施氮肥(N)显著抑制了硝化过程,其在好氧条件下N2O累积量降低了 15.13%,厌氧条件下减小了9.18%,除AOB-amoA无显著差异外,AOA-nirK、nirS、nosZ等功能基因丰度分别提高了76.25%、109.07%、56.01%、82.03%;氮磷有机肥配施(NMP)较氮肥有机肥配施(NM)在好氧条件下N2O累积量提高了 10.75%～15.53%,厌氧条件下无显著差异,AOA-amoA、AOB-amoA、nirK、nirS、nosZ功能基因丰度降低了 29.16%、53.21%、41.05%、49.40%、50.90%.(2)长期施用不同梯度磷肥显著提高了土壤有机氮的矿化及微生物同化能力,促进N2O排放,改变氨氧化、反硝化微生物功能活性及群落结构。较CK处理而言,P2处理(100 kg P2O5/ha)的矿化速率(0～24h)提高了 5.73%,P1 处理(50 kg P2O5/ha购买MC3)的NO3·同化速率(24～48 h)提高了 19.4%,其余时间段处理间无显著差异:N2O累积量(0～48 h)随施磷量的增加呈现先增加后减小的趋势,其中P3处理(1 50kgP2O5/ha)N2O累积量最大,培养结束时P3处理的N2O累积量较CK提高了15.18%:P2处理的功能基因丰度最高,AOA-amoA、narG、nirK、nosZ 功能基因丰度较 CK 处理提高了 27.03%、37.79%、40.72%、26.76%,AOB-amoA、nirS功能基因丰度差异不显著:氨氧化、反硝化微生物群落多样性随施磷量不同呈现显著差异,基于氨氧化、反硝化微生物α多样性表明,施磷能够显著提高AOB和nirK、nirS型反硝化菌的菌种丰富度;除nirK型反硝化菌的群落多样性增强外,施磷措施均降低了氨氧化、反硝化微生物的群落多样性。(3)从不同梯度磷素添加对土壤水氮运移转化的影响来看,随水施磷在入渗过程中对土壤入渗特性无显著影响;土壤加磷培养90 d后,其水分入渗能力显著增强(P<0.05),相较于对照CK而言,处理P1、P2、P3、P4的累积入渗量分别增加了 7.82%、8.85%、9.82%、11.21%,所对应的入渗时间分别减少了 7.77%、14.56%、22.33%、27.18%;累积入渗量与湿润锋运移速度均随磷梯度增大而增大,拟合的Kostiakov、Philip公式和湿润锋运移距离-时间公式中的入渗参数与磷浓度呈现出很好的线性关系(R2均大于GDC-00680.99);推测土壤经加磷培养后改变了自身团聚体组成从而影响了水分入渗过程,P3、P4处理中0.25～2 mm粒级团聚体数量占比与未加磷素的对照CK相比,分别提高了 35.9%、51.28%。与CK处理相比,短期的磷素添加促进了土壤矿化、硝化、NO3-同化作用。综上,长期施磷能够提高硝化、反硝化微生物菌种丰富度以及相关氮转化功能基因丰度,促进硝化、反硝化过程进行,但在不同磷肥配施中呈现较大差异。选择合适的磷肥配施方式以及磷肥用量均可有效减少N2O排放。推测在合适的施磷量范围内施用磷肥可促讲土壤大团聚体的形成,促进土壤保水保肥,为作物提供良好的土壤环Biofertilizer-like organism境。