ALK抑制剂

植物激素间的互作可以对作物的生长发育起到协同增效的作用。为探讨selleck抑制剂脱落酸功能类似物萘酮戊酸在水稻中的应用前景，本文研究了0.03%萘酮戊酸水剂(AS)稀释1000倍液浸种处理、水稻秧苗移栽前7 d喷施2%萘酮戊酸·吲哚丁酸可湿性粉剂(WP，有效成分质量比为0.2:1.8)稀释液，通过“浸种+直播”“浸种+移栽”“浸种+喷药+移栽”和“喷药+移栽”4种不同的处理模式对水稻生长发育和产量的影响，分别以0.03%S-诱抗素AS和2%S-诱抗素·吲哚丁酸WP (有效ATD autoimmune thyroid disease成分质量比为0.2:1.8)稀释液作药剂对照，以与清水作空白对照。通过调查分析种子发芽势、发芽率、分蘖数、穗数、结实率、千粒重及产量等指标，评估萘酮戊酸对水稻生长发育和产量的影响，确定最佳的增产处理模式。结果表明：用0.03%萘酮戊酸AS1000倍液浸种，可使水稻种子发芽率提高3.3%，比0.03%S-诱抗素AS处理提高1%。在水稻增产方面，各处理模式对增产效果影响明显。单从提高产量而言，以“喷药+移栽”处理模式增产效果最好，移栽前7 d喷施2%萘酮戊酸·吲哚丁酸WP 1000倍液，可实现水稻增产21.7%；而在同时提高水稻品质和产量方面，“浸种+移栽”处理模式效果最好，以0.03%萘酮戊酸AS稀释1000倍液浸种后育苗移栽为宜，既保证了水稻的质量，还可使产量提高9.7%。本研究明确了萘酮戊酸Tamoxifen使用方法用于提高水稻品质和产量的最佳处理模式，为萘酮戊酸在水稻生产上的推广应用提供了依据。

近年来,随着全球气候变暖,暴雨和洪涝灾害频发,涝渍胁迫已成为棉花生产的主要非生物胁迫之一,研究缓解棉花涝渍胁迫的机理和技术对减少涝灾损失十分重要。褪黑素(N-乙酰-5-甲氧基色胺)是一种多效分子,它具有广泛的生理作用,特别是能增强植物对逆境胁迫的抵抗或适应能力,在缓解植物涝渍胁迫、减少灾害损失方面具有重要的应用潜力。但迄今尚未见有关褪黑素缓解棉花淹水胁迫的研究。为此,我们深入研究了褪黑素在棉花淹水胁迫响应中的作用及其机理。供试棉花(Gossypium hirsutum L.)品种K836,于2021～2022年种植在山东省农科院经济作物研究所试验站(临清,115°42’E,36°61’N)的田间电动遮雨棚内,在盛蕾期或初花期对棉花进行10天的淹水胁迫,淹水期间喷施褪黑素或褪黑素抑制剂PCPA处理棉株,设置不淹水对照(CK,正常灌溉以维持土壤含水量为最大持水量的60～70%)、淹水(WL,淹水10 d)、不淹水喷施褪黑素(CKM)、不淹水喷施PCPA(CKP)、淹水喷施褪黑素(WLM)和淹水喷施PCPA(WLP)6个处理,比较研究了淹水和未淹水棉花对喷施外源褪黑素及其抑制剂的农艺学、生理学和分子生物学响应。主要结果和结论如下:1.褪黑素对淹水棉花生长发育和产量的影响盛蕾期淹水胁迫10 d,棉花的根、茎、叶、蕾花铃及单株干物重分别减少了21.8%、17.1%、10.3%、6.3%和13.2%,铃数、籽棉产量和皮棉产量分别减少了46.7%、49.6%和51.3%;与淹水未喷施褪黑素处理相比,喷施褪黑素的受淹棉株根、茎、叶、蕾花铃及单株干物质分别增加了4.7%、6.1%、8.5%、23.3%和8.7%,铃数、籽棉产量和皮棉产量分别增加了25.0%、16.3%和20.0%;但喷施PCPA的受淹棉株根、茎、叶、蕾花铃及单株的干物质分别比淹水棉花减少了18.6%、20.1%、20.0%、6.7%和18.5%,铃数、籽棉产量和皮棉产量分别减少了12.5%、6.3%和6.8%。说明喷施褪黑素显著减轻了淹水胁迫对棉花生长发育和产量形成的不利影响,减少了产量损失。2.褪黑素对淹水棉花生理功能的影响淹水胁迫10 d后,棉花主茎功能叶内源褪黑素含量提高了16.2%;厌氧代谢酶ADH和PDC的活性分别升高了10.6%和15.6%;抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性分别降低了20.7%、30.4%和33.2%;H_2O_2和丙二醛(MDA)含量分别增加了21.8%和11.5%;生长素(IAA)和赤霉素(GA)含量分别减少了11.0%和9.5%;脱落酸(ABA)和乙烯(ETH)含量分别增加了13.3%和8.4%;叶绿素(Chl)含量和净光合速率分别降低了25.5%和59.3%。与未喷施褪黑素的淹水处理棉株相比,喷施褪黑素的受淹棉株主茎功能叶的褪黑素含量提高了16.0%;厌氧代谢酶ADH和PDC的活性分别降低了9.0%和13.0%;抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性分别升高了9.0%、10.2%和16.8%;H_2O_2和MDA含量分别减少了16.8%和14.2%;IAA和GA含量分别增加了9.6%和4.5%;ABA和ETH含量分别减少了10.7%和13.0%;Chl含量和净光合速率分别提高了7.4%和27.6%。与之相反,喷施褪黑素抑制剂PCPA的受淹棉株主茎功能叶的褪黑素含量降低了25.7%;厌氧代谢酶ADH和PElectrophoresisDC的活性分别升高了4.0%和5.3%;抗氧化酶SOD、POD和CAT的活性分别降低了11.9%、9.7%和11.8%;H_2O_2和MDA含量分别升高了9.6%和5.6%;IAA和GPD-0332991浓度A含量分别减少了9.2%和6.7%;ETH含量增加了12.0%;ABA含量没有明显差异;Chl含量和净光合速率分别降低了12.6%和27.2%。以上结果表明,喷施褪黑素显著提高了淹水棉株内源褪黑素含量,抑制了厌氧代谢酶活性,提高了抗氧化酶活性,减轻了细胞膜脂过氧化程度,促进了相关激素代谢平衡,减轻了对棉株光合作用的影响;而喷施褪黑素抑制剂PCPA则降低了棉株体内褪黑素含量,进一步加重了淹水伤害。3.褪黑素对受淹棉花相关基因表达的影响淹水胁迫影响了棉花主茎功能叶相关基因表达。其中,棉花主茎功能叶中GA合成酶基因GA20JNJ-42756493说明书ox1的表达量较未淹水的对照降低了44.2%;褪黑素合成关键酶基因咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT)和5-羟色胺N-乙酰基转移酶(SNAT1)的表达量则分别升高了35.0%和51.9%;ABA合成基因NCED2,乙烯合成基因ACS、ACO,H_2O_2合成酶基因RBOHC和乙醇脱氢酶基因ADH1表达量则分别升高了1.0倍、2.0倍、2.4倍、1.0倍和3.9倍;褪黑素处理受淹棉花可以有效调控以上基因的表达。其中,主茎功能叶Gh SNAT1、Gh COMT和Gh GA20ox1表达量分别较未喷施的受淹棉株升高了1.0倍、3.3倍和2.2倍;Gh NCED2、Gh ACS、Gh ACO、Gh RBOHC及Gh ADH1的表达量分别降低了61.9%、35.5%、46.3%、65.0%和40.0%。与之相反,PCPA处理的棉花主茎功能叶Gh SNAT1、Gh COMT和Gh GA20ox1的表达量较未喷施的受淹棉株分别降低了48.7%、51.8%和38.8%;Gh NCED2、Gh RBOHC及Gh ADH1的表达量则分别升高了1.2倍、2.5倍和1.9倍;Gh ACS和Gh ACO的表达量则分别升高了59.4%和14.9%。以上结果表明,淹水胁迫降低了GA合成关键基因表达量,提高了ABA和ETH合成基因的表达量;而喷施外源褪黑素通过提升棉株内源褪黑素含量,调节了受淹棉株体内相关基因表达。4.褪黑素合成相关基因突变体材料创制通过淹水处理后棉花的转录组数据分析,筛选并克隆了参与褪黑素合成的关键基因Gh SNAT1和Gh COMT。利用基因超量表达技术及CRISPR/Cas9基因组编辑技术创建了该基因过表达和敲除载体,然后通过农杆菌介导的棉花转化技术获得了基因过表达和敲除突变体植株。综上,淹水胁迫破坏了棉花的膜系统、光合系统和激素平衡,显著降低了光合生产与干物质积累,导致减产。喷施外源褪黑素提高了受淹棉株内褪黑素含量,有效减轻了受淹棉株细胞膜脂过氧化和厌氧呼吸,诱导激素合成代谢相关基因表达,维持了激素的相对平衡和光合生产能力,提高了棉花对淹水胁迫的适应能力,减少了产量损失。本研究明确了褪黑素对棉花淹水胁迫的缓解效应并揭示了其生理学机制,为褪黑素在棉花抗涝栽培中的的进一步应用提供了重要依据和参考。

目的 以矽肺模型小鼠为实验对象，探究不同浓度SiO_2的暴露对小Dibutyryl-cAMP NMR鼠转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达量和肺纤维化程度的影响，为职业环境中SiO_2粉尘的暴露量起预警作用和为矽肺的临床诊断与干预提供相关动物数据支持。方法 周龄为10～12周C57BL/6野生型雄性小鼠30只，随机分为3组，每组10只，以Gefitinib鼻饲法连续28天，每天50μL/只的剂量灌入生理盐水、10 mg/mL SiO_2生理盐水悬液、20 mg/mL SiO_2生理盐水悬液，分别构建生理盐水对照组、低剂量矽肺和高剂量矽肺模型组；鼻饲后称量小鼠体质量，90天后取小鼠肺组织，石蜡切片苏木素伊红（hematoxylin and eosin,HE）染色和Masson染色观察小鼠肺部病理改变；石蜡切片荧光染色和Western blot检测肺组织中促纤维化因子TGF-β1表达水平，免疫组化染色测小鼠纤维化标志相关蛋白α-SMA、collagenⅠ、Fibronectin和N-cadherin的表达量，用统计学方法整理分析实验结果，明确细胞因子TGF-β1表达量和肺纤维化程度与SiO_2暴露量的关系。结果 在SiO_2暴露期间对照组小鼠体质量走势基本正常，两组SiO_2组小鼠体质量在第20天开始明显下降；对照组小鼠肺组织各级结构清晰完整，低剂量SiO_2组和高剂量SiOlocal immunotherapy_2组的肺组织均出现肺泡结构坍塌、肺泡间隔增厚，肺结节增多且蓝色胶原沉积增多，肺结节面积和胶原面积在3组之间差异有统计学意义（P<0.05），分别为（0.732±0.1447）%和（10.170±1.301）%、（8.126±0.758）%和（11.690±0.919）%、（31.690±1.897）%和（43.230±2.290）%；促纤维化因子TGF-β1、肌纤维细胞活化标志物α-SMA、上皮间质转化关键蛋白N-cadherin及细胞外基质collage Ⅰ和Fibronectin等促纤维化蛋白的表达水平，在对照组、低剂量SiO_2组和高剂量SiO_2组的小鼠肺组织中差异有统计学意义（P<0.05），且表达量均与SiO_2暴露量呈正相关（P<0.05）。结论 促纤维化因子TGF-β1表达水平和肺组织纤维化程度均与SiO_2的暴露量呈正比关系。

环境雌激素是一类可以干扰内源性激素的化学物质,因其广泛使用,可通过多种途径不断被释放到环境水中,从而对人类健康构成威胁。在分析环境水体中的多种环境雌激素时,存在样品基质复杂,干扰物质众多,且目标化合物含量低等问题。为了解决以上问题,对样品进行前处理是极为必要的。基于此,本文制备了具有多种特异性识别位点的分子印迹固相微萃取纤维,构建了分子印迹纤维束,实现水体中多种环境雌激素的选择性富集与分析,具体研究如下:(1)制备了多位点分子印迹固相微萃取纤维,结合多模板分子印迹技术和固相微萃取技术的优势,将多种特异性识别位点引入固相微萃取纤维涂层中。运用多种表征手段对合成的多位点分子印迹纤维进行了表征。并在最佳萃取条件下,探究了其吸附性能及使用寿命。结果表明该印迹材料在100-4000μg/L浓度范围内对三种分析物的萃取量是商用聚丙烯酸酯纤维的182-1479倍,且经100次循环萃取后其萃取量没有明显下降。进一步建立了多位点分子印迹固相微萃取纤维萃取水体中多种跨类别的环境雌激素的分析方法。该方法显示出较低的检出限(0.003-0.02μg/L)、更宽的线性范围(0.01-200μg/L)和较高的富集倍数(118.56-224.33),可同时灵敏监测复杂环境水样中多种不同类别环境雌激素。(2)构www.selleck.cn/products/dorsomorphin-2hcl建了分子印迹纤维束,分别以对羟基苯甲酸甲酯及其四种主要代谢产物为模板分子合成了五种不同印迹纤维,将多根印迹纤维组装在一起,形成不同的分子印迹纤维束萃取装置。分子印迹纤维束相较于单根印迹纤维具有www.selleck.cn/products/Decitabine更优的萃取性能。该分子fluoride-containing bioactive glass印迹纤维束在低浓度下富集五种物质的峰面积是三种商用纤维束的4-1072倍,并且可重复使用达100次。建立了分子印迹纤维束萃取环境水样中对羟基苯甲酸甲酯及其主要代谢产物的分析方法。该方法检测限为0.033μg/L,回收率为86.78-113.96%,相对标准偏差为0.75-9.17%。其中苯甲酸的检出量为0.43μg/L。因此,所提出的分子印迹纤维束能显著降低基质干扰,提升富集效果,是灵敏监测环境水样品中多种环境雌激素残留的有效手段。

大黄酸(RH)是一种主要从中药大黄中提取出的一种蒽醌类化合物,具有良好的抗肿瘤活性,对结肠癌、鼻咽癌、胰腺癌均有良好的抑制作用。但由于其水溶性低,严重限制了其在临床上的开发利用。普朗尼克(Pluronic)所形成的胶束内核由于大量醚氧原子的存在使其形成胶束的内核仍处于一个相当亲水的环境,因此其临界胶束浓度(CMC)较高。通过化学键将RH缀合到Pluronic两端,然后制备成前药胶束。在RH蒽醌环的π-π堆积作用下,可以使形成的胶束CMC降低,增加胶束在体内的稳定性。因此本课题设计了一种含有二硫键的Pluronic-SS-RH聚合物前药,通过溶剂挥发法将含有二硫键的Pluronic-SS-RH聚合物前药制备成一种具有氧化还原敏感性的前药胶束。最后我们研究了前药胶束细胞药物动力学规律和体内药物动力学规律,为其开发利用提供参考。本课题所进行的研究内容如下:制备含有二硫键的Pluronic-SS-RH聚合物前药。通过羰基二咪唑(CDI)活化Pluronic两端的羟基,将含有二硫键的胱胺连接在Pluronic两端,最后通过酰胺反应将RH连接在改性以后Pluronic两端的氨基上制得Pluronic-SS-RH聚合物前药。通过核磁共振氢谱,红外光谱,紫外光谱等表征其结构,证明Pluronic-SS-RH聚合物前药的成功合成。利用溶剂挥发法制备PlurZ-VAD-FMK NMRonic-SS-RH前药胶束。所制备的前药胶束的平均粒径为182.4±4.7 nm,PDI为0.130±0.42,Zeta电位为-10.5 m V。前药胶束的含药量为5.7%。透射电镜显示前药胶束呈类圆球形,大小均一,且分散均匀,无团聚现象。前药胶束的CMC为46.49μg/ml,远低于单独的Pluronic形成胶束CMC。前药胶束保存15天,其粒径大小和PDI无明显变化,表明其储存稳定性良好。当前药胶束的稀释50倍后,前药胶束的粒径仍然保持在220 nm以内说明其稀释稳定性良好。Pluronic-SS-RH前药胶束在p H=5.5 GSH为20m M的条件下药物的累积释Obesity surgical site infections放率达73%,明显高于p H=5.5 GSH为2μM的条件下的累积释放率,说明Pluronic-SS-RH前药胶束具氧化还原敏感性。Pluronic-SS-RH前药胶束在GSH的存在下孵育24 h,粒径由195 nm增加到了450 nm。PDI由孵育前的0.186增加到了0.420。这进一步证明了Pluronic-SS-RH前药胶束具氧化还原敏感性。空白材料Pluronic在1 mg/ml以内的溶血率均小于5%;空白材料Pluronic与人正常肝细胞细L-02和人结肠癌细胞SW-480孵育48h后其细胞存活率均大于80%。空白材料细胞毒性实验和溶血性实验结果表明该材料的生物相容性良好。体外抗肿瘤实验选用人结肠癌细胞HCT-116、SW-480、SW-620作为模型细胞,通过MTT法考察游离RH与Pluronic-SS-RH前药胶束对三种结肠癌细胞毒性。结果显示游离RH与Pluronic-SS-RH前药胶束在药物浓度为10～125μM的范围内,细胞存活率不断下降,呈现出明显的浓度依赖性。随着给药时间Roxadustat体内实验剂量的延长,游离RH与Pluronic-SS-RH前药胶束组的细胞存活率均有明显下降的趋势,游离RH与前药胶束对三种结肠癌细胞的细胞毒性有明显的时间依赖性。并且Pluronic-SS-RH前药胶束的对肿瘤细胞的抑制作用明显强与游离的RH。细胞毒性实验结果表明RH制备成氧化还原敏感性的胶束以后,可以显著增加药物对肿瘤细胞的毒性。通过制备负载香豆素-6的Pluronic-SS-RH前药胶束在荧光倒置显微镜下观察前药胶束的细胞摄取情况,结果显示开始时负载香豆素-6的前药胶束细胞摄取量明显低于香豆素-6,但在6 h以后前药胶束可以与游离的香豆素-6达到相同的摄取量,证明将RH制备成前药胶束后不会影响肿瘤细胞对RH的摄取量。本文建立了高效液相色谱法测定细胞液中RH含量的方法,并对该分析方法进行了方法学验证。结果表明:所建立的测定细胞液中RH含量测定方法专属性良好,并具有较好的精密度和准确性。通过所建立的含量测定方法,测定药物摄取阶段与药物消除阶段细胞内RH的含量,进行细胞药物动力学研究。结果显示前药胶束组与游离RH相比,药物半衰期(t_(1/2))和药时曲线下面积(AUC),滞留时间(MRT)均有所增加。RH在细胞内的滞留时间延长有利于增加RH对细胞的毒性。本文建立了高效液相色谱法测定大鼠血浆中RH的含量的方法,并对该分析方法进行了方法学验证。结果表明:所建立的测定大鼠血浆中RH含量测定方法专属性良好,并具有较好的精密度和准确性。通过所建立的含量测定方法,测定24 h内不同时间点大鼠血浆中RH的含量,进行体内药物动力学研究。结果显示前药胶束组与游离RH组相比,药物半衰期(t_(1/2))和药时曲线下面积(AUC),体内滞留时间(MRT)均有所增加。药物在体内的半衰期、滞留时间延长,有利于增强RH对肿瘤的治疗效果。综上所述,本课题所制备的Pluronic-SS-RH前药胶束具有明显的氧化还原敏感性,且稳定性和生物安全性良好。体外细胞毒性实验、细胞药物动力学研究、体内药物动力学研究证实该前药胶束可以提高对肿瘤治疗效果,在肿瘤治疗方面有很大的潜力。

目的 探讨麦角新碱与卡孕栓结合治疗产后大出血的临床疗效。方法 采用随机数字表随机分组，将2020年1～2022年1月的产后出血患者80名产妇分为治疗组和对照组。对照组应用卡前列甲酯栓贴附于阴道进行治疗，治疗组在此基础上加用臀部肌肉注射马来酸麦角新碱注射液进行治疗。在持续用药1天后，对两组患者进行疗效观察。比较两组患者产后2h和24h的出血量，红细胞(RBC)和血红蛋白(Hb)下降值及临床症状(宫缩持续、止血和恶露持续时间的长短)，治疗前后凝血功能[纤维蛋白原、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间]和炎症因子(C反应蛋白、白细胞介素-8和肿瘤坏死因子-www.selleck.cn/products/BafilomycinA1α)的含量。对两组患者的不良反应进行了分析。结果 治疗组的总有效率为[97.5%(39/40)]，对照组为[82.5%(33/40)](P<0.05)，产后的出血量、RBC和Hb下降值、止血时间和恶露持续均明显降低(P<0.05)，但宫缩持续Pathologic staging时间延长(P<0.05)。治疗后，两组患者的凝血功能和炎症因子均有明显的改善(P<0.05)；且治疗组的改善更加显著(P<0.05)。结论 麦角新碱联合卡孕D-Lin-MC3-DMA溶解度栓对产后出血患者具有确切显著的临床观察疗效，是有效减轻患者临床症状、促进病情缓解及改善生活质量的最佳有效途径，并能进一步稳定患者机体及凝血功能状态稳态、减轻体内炎性损伤，且安全可靠。

在工业制造、水下原位组装和生物组织修复等应用场景中,均要求胶粘剂在润湿/水下环境中与基材产生快速、可靠的粘接。在上述环境中,GW4869使用方法被粘接基材表面的“界面水层”(Interfacial Water)能够阻碍聚合物基胶粘剂小分子对其进行浸润接触,极大降低胶粘剂与基材之间的分子间作用强度,且胶粘剂在固化后难以与基材表面形成稳定“胶钉”结构,导致胶接失效。目前高分子链段通过“扩散-接触”机制能够穿过界面水层与基材形成牢固粘接;通过“干燥凝胶快速水合作用”或“疏水排斥作用”能够除去界面水层从而实现胶粘剂与基材的快速浸润粘接;然而上述机制存在生效时间长、基材种类局限性大、高毒性、不可逆和对环境条件要求苛刻等缺陷,难以满足实际应用需求。本文以N,N’-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)与二氨基二环已基甲烷(HDDM)分别作为亲水/疏水单体,设计制备了具有超支化(Hyperbranched)结构的聚合物体系(简称PM-H)。PM-H聚合物AZD1152-HQPA研究购买内部富含疏水基团、氢键和亲水基团,其中疏水链段能够聚集并形成物理交联点,进而形成水凝胶结构,亲水基团通过水合溶胀作用快速消除界面水层,实现胶粘剂在湿面/水下环境中与基材的快速接触浸润;PM-H的超支化结构赋予亲水/疏水链段在受限区间内自由运动的能力,能够在避免宏观相分离的同时,实现材料表面极性随外界环境的快速自适应,增加与基材之间的分子间作用强度,进而赋予材料与多种类基材广谱性粘接的能力。本文通过控制亲/疏水单体比例,设计制备了具有不同分子量、支化度的PM-H聚合物,对其热机械、流变性能、溶胀溶解等性能进行了研究,表征了其在水下与陶瓷、木材、铝、聚乙烯、玻璃等基材的粘接强度,探究了温度、盐度对材料粘接性能的影响关系,并对其在生物医用领域进行了初步的应用尝试,对猪皮组织的粘接强度、体外细胞毒性、抗菌能力以及体外血液毒性进行了评估。本论文的主要研究结果如下:1.通过改变MBA与HDDM单体比例,能够对PM-H的分子量与支化度进行控制。本文中PM-H分子量可实现2.7381×10~6-9.5833×10~7可控,对应支化度变化范围为0.4-0.5。系列化PM-H聚合物玻璃化转变温度为20-71℃,室温储能模量为4-8 MPa。2.PM-H水凝胶能够快速与外界环境发生自适应演变。系列化PM-H水凝胶室温环境下,水接触角从72.2°增加到78.3°,差异不十分显著;在纯水中浸泡五分钟后,表面接触角降低,从28.9°增加到51.7°;而在液体石蜡中浸泡五分钟后,接触角变大,从98°增加到110.8°,并且上述过程具有可重复性,当浸泡完石蜡后再次浸泡水接触角又恢复至泡水时的接触角。XPS表征结果表明,当浸泡水后表面N元素含量增加,远高于未浸泡和浸泡极性溶剂的特征吸收峰。3.PM-H水凝胶能够在水下环境中与多基材实现广谱性快速粘接。系列化PM-H水凝胶在水下与木材、玻璃、铝、聚乙烯、聚丙烯、陶瓷表面接触1分钟后,最高拉剪强度分别为3.5 MPa,218 k Pa,282 k Pa,205 k Pa,195 k Pa和230 k Pa,并且结果显示温度与盐度对PM-H水凝胶的水下粘接能力不产生显著影响。4.PM-H水凝胶具有优秀的生物粘接能力,系列化猪皮组织的粘接强度为45-73 k Pa;体外细胞毒性显示PM-H水凝胶的浸出物对小鼠上皮样成纤维细胞(L929细胞)的存活率没有产生显著性影响;另外,超支化结构大量的端氨基赋予PM-H水凝胶广谱性抗菌能力,但也导致其对于血液红细胞具有一定毒性,会造成红细胞的破裂,因此还需进一步改性才能应用于体Modeling HIV infection and reservoir内。

目的:顺铂,作为一种广泛应用的化疗药物,可治疗多种恶性肿瘤。顺铂导致的副作用发生率高且反应程度重,其中耳毒性明确涉及到内耳器官的广泛不可逆损伤,包括耳蜗毒性和前庭毒性。目前基本没有FDA批准的用于治疗顺铂引起的听力损失的药物。因此寻找有效的抗顺铂的耳保护药物非常重要。目前有研究认为顺铂所致的听力损失可能与其诱导耳蜗毛细胞内氧化应激反应,导致细胞内氧化应激产物(ROS)蓄积相关。5,7-二羟基-4-甲基香豆素(D4M)能够清除自由基,在人体血液系统当中,在抗氧化、抗凝血方面有着广泛的应用。这项工作基于其抗氧化作用,旨在探究D4M对顺铂所导致的耳毒性的影响以及其保护机制。方法:首先,此实验分组设计,分为对照组(CON)、顺铂组(CIS)、药物保护组(D4M+CIS)。1、用CCK-8试剂盒法测定细胞活力。分别确定顺铂(CIS)的损伤模型;并且在这个损伤模型的基础下,确定化合物5,7-二羟基-4-甲基香豆素(D4M)对HEI-OC1细胞的保护作用以及最佳保护浓度。2、Annexin V-FITC和PI用于细胞凋亡检测。细胞活性氧水平通过MitoSOX Red和Cell ROX Green探针检测测定。用TMRM染色分析线粒体膜电位。基底膜毛细胞中活性氧水平通过MitoSOX Red探针检测测定。3、免疫荧光用于毛细胞和螺旋神经节神经元的检测。通过cleCardiac Oncologyaved caspase-3和TUNEL染色来评估基底膜毛细胞的细胞凋亡相关蛋白。4、通过蛋白免疫印迹实验检测JNK、p-JNK、FoxO1、p-FoxO1的表达,通过免疫组化确定FoxO1的细胞内定位。结果:1、D4M能够保护毛细胞免受顺确认细节铂诱导的损伤,提高了House Ear Institute Organ of Corti1(HEI-OC1)细胞和新生小鼠耳蜗外植体的细胞活力。2、在新生小鼠的耳蜗中证实,D4M对顺铂导致的耳毒性有保护作用。3、D4M显著抑制HEI-OC1细胞以及耳蜗中顺铂诱导的ROS。4、蛋白免疫印迹结果表示:D4M显著下调p-JNK,并提高p-FoxO1/FoxO1的表达比例,从而减少DNA/RNA Synthesis抑制剂顺铂诱导的胱天蛋白酶依赖性细胞凋亡。同时,CCK-8结果显示茴香霉素诱导的JNK信号传导显著减弱了D4M对HEI-OC1细胞的保护作用。结论:顺铂处理HEI-OC1细胞以及耳蜗组织会导致细胞凋亡增加,激活氧化应激反应,导致细胞内ROS堆积。在预处理运用5,7-二羟基-4-甲基香豆素(D4M)后,细胞凋亡和氧化应激反应明显降低,HEI-OC1细胞以及耳蜗中的毛细胞、神经元细胞存活增多,且形态对比损伤组(CIS)更加完整,D4M通过调节JNK/FoxO1信号通路来抑制顺铂导致的耳毒性损伤,同时,这项研究还支持了D4M可以被用作一种新化合物,来预防顺铂相关听力损失的作用。

猫细小病毒病是由猫细小病毒(FPV)引起的一种急性高度接触性传染病,可感染猫科、鼬科、浣熊科动物,死亡率较高,对相关经济动物、野生动物及宠物造成严重威胁。疫苗免疫是控制该病的主要手段,但近年来免疫失败现象时JNJ-42756493使用方法有发生,有研究表明FPV的一些关键氨基酸位点发生改变可改变其抗原识别位点,导致免疫逃避现象。有必要深入了解猫细小病毒主要抗原基因的遗传进化特征,探索开发新型检测试剂及疫苗。本研究通过对沈阳某动物医院疑似FPV患猫进行临床调查,收集病例样本进行PCR检测,对阳性样本的VP2基因进行T克隆、测序及遗传进化分析,选择有代表性的毒株,将其VP2基因亚克隆到p ET32a原核表达载体中,构建p ET32a-VP2重组质粒,转化BL21(DE3)感受态细胞诱导表达VP2蛋白,利用初步纯化的VP2蛋白免疫小鼠,制备多克隆抗体。VP2基因扩增结果:共获得了7份阳性毒株,基因全长均为1755bp,7份FPV VP2基因与50株国内外参考毒株VP2基因核苷酸同源性在98.8%～99.9%之间,与疫苗株EU498680核苷酸同源性在98.9%～CX-5461价格99.5%之间;7份FPV VP2基因与参考毒株氨基酸同源性为97.9%～100%;以标准株M38246为参考毒株,其中6份VP2基因编码的氨基酸第91位点由A变为了S,2份VP2基因的第295位点由P变为了R。遗传进化分析显示:FPV VP2基因分为3个基因群,7份FPV VP2基因与疫苗株和标准株均不在一个基因群,与国内近年来流行的毒株亲缘关系较近,其中SNHF-V1位于G3群,其他6份毒株均位于G1群。选取与国内近年来流行毒株亲缘关系较近的SNHF-V3 VP2基因进一systemic immune-inflammation index步构建了p ET32a-VP2重组表达载体,表达的重组蛋白经SDS-PAGE及Western-blot分析,获得了大小约为84k Da的Trx A-His-VP2标签融合蛋白,该融合蛋白可与小鼠抗6X His单克隆抗体发生特异性结合,表明其具有较好的免疫原性。将目的蛋白纯化后免疫SPF级6周龄20g昆明小鼠,制备小鼠抗FPV VP2多克隆抗体,经Western-blot检测,具备较好的免疫反应原性。

目的 探讨联合磷酸肌酸钠和曲美他嗪对酒精性心肌病大鼠的超声心动图及心脏血清学相关指标的影响。方法 通过慢性酒精灌胃法建立酒精性心肌病大鼠模型，将成功建模后的大鼠随机分为：磷酸肌酸钠组(CPS组)、曲美他嗪组(TMZ组)、磷酸肌酸钠+曲美他嗪组(CPS+TMZ组)、生理盐水组(NS组)、酒精组(AL组),实验共为期8周。运用超声心动图测量大鼠左室舒张末期内径(LVEDd)、室间隔舒张末期厚度(IVSDd)、左室后壁舒张末期厚度(LVPWDd)、左心室射血分数(EF),并检测LGX818供应商血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、高敏肌钙蛋白I(Hs-AZD2281TnI)、乳酸脱氢酶(LDH)以及氨基末端脑钠尿肽(Nsingle cell biologyt-proBNP)。结果 (1)较AL组及NS组，CPS组与TMZ组的LVEDd降低，EF升高，CK-MB、Hs-TnI及LDH均降低；(2)较CPS组与TMZ组，CPS+TMZ组的LVEDd降低，EF升高，CK-MB、Hs-TnI、LDH及Nt-proBNP均降低；(3)CPS组与TMZ组间的各指标均无统计学差异。结论 磷酸肌酸钠与曲美他嗪均对酒精性心肌病具有一定的治疗效果，且二者联合应用的效果优于二者单用。