ALK抑制剂

目的：基于肿瘤蛋白53cancer precision medicine(tumor protein 53,p53)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member11,SLC7A11/xCT)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathioneperoxidase4,GPX4)通路探讨疏肝祛瘀解毒方（SGQYJDF）诱导铁死亡抑制裸鼠肝癌增殖。方法：通过将人肝癌细胞株SK-Hep-1注射Baricitinib作用于裸鼠右腋皮下，建立异种皮下移植瘤模型，成模后分为模型对照组、SGQYJDF低、中、高剂量组和SGQYJDF中剂量联合Sorafenib组，按分组连续灌胃14 d，期间观察裸鼠肿瘤体积；灌胃14 d后，测量肿瘤质量并计算生长抑制率，采用HE染色观察各组肿瘤组织病理学变化；比色法检测各组肿瘤组织内丙二醛（malonWnt-C59体内实验剂量dialdehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）和亚铁离子（ferrous ions,Fe2+）水平；免疫组织化学法（immunohistochemistry,IHC）检测各组肿瘤组织内增殖标志物（Kiel 67antigen,Ki-67）及GPX4表达；免疫荧光法（immunofluorescence,IF）检测肿瘤组织内p53和xCT的表达；Western blot法检测p53、xCT和GPX4的表达水平。结果：（1）在肿瘤增殖方面，通过观察裸鼠肿瘤体积及质量并计算生长抑制率，与模型对照组比较，SGQYJDF能够呈剂量相关性的降低肿瘤体积（P<0.01），抑制肿瘤质量增长（P<0.01），各组肿瘤组织均未见明显浸润，同时通过IHC观察计算肿瘤组织内Ki-67阳性细胞率可知，与模型对照组比较，SGQYJDF能够呈剂量相关性降低肿瘤组织Ki-67阳性细胞率（P<0.01），抑制其增殖能力；（2）在铁死亡生化指标方面，通过检测计算相对含量，与模型对照组比较，SGQYJDF能够呈剂量依赖性提高肿瘤组织内Fe2+含量和MDA含量，同时降低GSH的含量（P<0.01）;(3)在蛋白表达方面，通过IHC、IF与Western blot实验，与模型对照组比较，SGQYJDF能够呈剂量相关性地上调p53(P<0.05)的表达，同时抑制xCT(P<0.05)和GPX4(P<0.01)的表达。此外，在实验结果中，我们发现人体等效量的SGQYJDF与Sorafenib联用，其效应高于两倍人体等效量的SGQYJDF。结论：提示SGQYJDF可能通过上调裸鼠皮下移植瘤p53的表达、抑制xCT和GPX4的表达从而诱导其发生铁死亡，抑制其增殖。

蜡梅(Chimonanthus praecox(L.)Link)是中国特产的传统名贵观赏花木,花色丰富,有着悠久的栽培历史和花文化,具有极佳的观赏特性、文化价值和应用前景。以3个蜡梅品种(‘金颜帘卷’、‘美人醉’和‘笑靥’)的5个时期(蕾期、萌动期、初花期、盛花期和末花期)的中被片、内被片为研究对象,综合分析3个品种开花过程中花色表型数据、花瓣表皮细胞形态和生理生化特征的变化,及3个品种盛花期的差异,运用相关性分析与主成分分析,探究蜡梅品种花色变化的规律及花色变化与生理变化之间的关系,以期能为3个品种的花色改良、品种分类等提供参考依据。主要研究结果如下:(1)随着花色变化,3个品种的花色变化幅度不一致。‘金颜帘卷’的中被片、内被片相较于‘美人醉’、‘笑靥’花色变化幅度较小,且三者的内被片变化比中被片更加显著;‘金颜帘卷’的中被片、内被片由黄绿色转为黄色,除a*以外的色度值均减小;‘美人醉’的中被片、内被片由Ceralasertib体内带有红晕arbovirus infection的黄绿色转为黄色,内被片a*显著减小;‘笑靥’中被片由带有红晕的黄绿色转为黄色,b*不断减小;‘笑靥’内被片红色逐渐减淡,a*显著减小。(2)3个品种的花瓣表皮细胞形态均成扁平状,与花色变化无明显相关,但是不同时期细胞的大小、表皮纹路有一定的差别;蕾期到末花期,花衰老且花瓣表皮细胞水分流失,导致中部凹陷,细胞与细胞之间的边界更清晰;3个品种的花瓣表皮细胞均有蜡质乳突和覆盖物。(3)3个品种的中被片、内被片均有类黄酮、类胡萝卜素和叶绿素,有红晕花被片的‘美人醉’和‘笑靥’品种含有花色苷,3个品种的花色素均以类黄酮居多。类黄酮、类胡萝卜素含量对黄色变化具有显著的影响,花色苷含量对红色变化具有显著的影响。(4)3个品种的可溶性蛋白对类黄酮、类胡萝卜素和花色苷的合成均有一定的促进作用,对花色苷合成促进有更加显著的效果;‘金颜帘卷’和‘笑靥’的中被片可溶性糖与类胡萝卜素、叶绿素呈显著正相关,对花色变化具有一定的影响,但对花色苷的合成并无明显促进作用;‘美人醉’和‘笑靥’的中被片、内被片SOD对其花的衰老具有一定的缓解作用,但对‘金颜帘卷’并无明显作用;‘美人醉’内被片和‘笑靥’的中被片、内被片蕾期花GSK2118436纯度色苷含量最高,其pH值最低,即低pH条件下花色苷稳定性更强,含量更高;‘金颜帘卷’花被片pH越高,黄色越明显。(5)3个品种的PAL、CHI活性均在开花前期的活性更高,色素合成代谢较活跃,因此蕾期和萌动期花色素含量较高。PAL、CHI活性与类黄酮、花色苷含量呈显著正相关,其活性越高越利于花色素的合成,且对花色苷的促进作用更加显著;PAL、CHI活性对3个品种的花色变化均有影响,但CHI活性与色度值之间的相关系数高于PAL,对花色变化的影响更加显著。(6)综合相关性分析和主成分分析说明,影响‘金颜帘卷’的中被片和内被片、‘美人醉’和‘笑靥’的中被片花色变化的主要花色素为类黄酮、类胡萝卜素和叶绿素;影响‘美人醉’和‘笑靥’的内被片花色变化的主要花色素为花色苷、类黄酮、类胡萝卜素和叶绿素,但花色苷含量的变化起着最直接的作用;可溶性蛋白、可溶性糖、植物pH、SOD、PAL和CHI等在花色变化的过程中也起到了重要的作用。关于蜡梅后续的花色改良和育种等方面,除了直接改变花色苷、类黄酮、类胡萝卜素和叶绿素的含量,也可以通过影响花被片细胞中蛋白和糖的含量、调节细胞液pH,或改变酶活性等方式,影响花被片中的花色素含量,达到花色改良的目的。

胆碱作为一种动物生长发育的必需营养素,在预防和治疗奶牛脂肪肝疾病中起重要作用,但其中的调节机制尚不清楚。本研究通过胆碱缺乏培养奶牛肝细胞,然后再补充胆碱,从蛋白质表达、脂质代谢和脂滴融合等方面研究胆碱调节奶牛肝细胞脂滴大小的机制,为阐明胆碱对奶牛脂肪肝的防治机制奠定基础。首先建立奶牛脂肪肝的细胞模型。在培养基中加入0、50、100、150、200、300、400mmol/L浓度的亚油酸处理24 h,通过CCK-8、油红O、尼罗红等方法检测,发现150mmol/L LA显著增加selected prebiotic library了牛肝细胞中TG的积累和脂滴的形成,后续试验选用150mmol/L LA处理牛肝细胞建立脂肪肝的细胞模型。随后通过胆碱缺乏培养基处理肝细胞,油红O染色细胞脂滴,荧光显微镜观察和计算脂滴大小、数量和比值。结果表明,与对照组相比,胆碱缺乏增加了脂滴的平均直径(1.59μm vs 2.10μm),其小脂滴(<2μm)的比例从74%下降到56.6%,大脂滴(>4μm)比例从5.3%增至15%。胆碱缺乏增加了肝细胞中TG含量(0.39μmol/mg vs 0.57μmol/mg)。蛋白分析发现固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、固醇调节元素结合蛋白裂解激活蛋白(SCAP)、脂肪酸合成酶(FASN)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)的表达显著上调。采用活细胞工作站观察脂滴融合,发现缺乏胆碱处理后提高了脂滴的融合速度。薄层色谱显示,胆碱缺乏处理后,细胞总磷脂酰胆碱(PC)含量降低。液相色谱-质谱分析表明,胆碱缺乏导致27种磷脂酰乙醇胺(PE)化合物的含量增加,16种PC化合物的含量减少。为了进一步探讨胆碱对脂滴大小影响的作用机制,试验在缺乏胆碱的培养基中添加不同浓度的胆碱,观察对脂滴的影响。用0、30、60、90μmol/L氯化胆碱处理细胞后,发现随着胆碱的加入,脂滴的大小随着浓度的增加而减小,脂滴直径分别为2.37μm、1.54μm、1.43μm、1.39μm,细胞甘油三酯含量也KPT-330抑制剂逐渐下降,分别为0.65μmol/mg、0.45μmol/mg、0.36μmol/mg、0.37μmol/mg,同时细胞中PC的含量则逐渐增加。自噬蛋白检测结果表明,自噬标志物LC3蛋白的表达逐渐增加,而p62蛋白的表达则逐渐减少,表明PI3K抑制剂胆碱可能通过增加自噬水平来调控脂滴的大小。上述结果表明,胆碱缺乏增加了脂滴大小和脂滴融合,并影响了细胞磷脂组成和蛋白质表达。当加入胆碱时,细胞自噬活性逐渐增加,这导致脂滴的表型逆转。这一结果为阐明胆碱缓解围产期奶牛脂肪肝的应用机制提供数据支撑。

干旱是限制全球农业生产最主要的环境因素之一,干旱胁迫下植物会积累大量次生代谢物来抵抗逆境。东莨菪苷作为一种糖基化的香豆素,是植物中常见的次生代谢物,由UDP-葡萄糖基转移酶(UGT)催化合成。而东莨菪苷与植物耐旱性的关系尚不明晰。白花草木樨(Melilotus albus)是一种集饲用、绿肥、蜜源多用途的二倍体草本Medical drama series植物,是重要的轮作牧草,耐旱性强。然而,白花草木樨东莨菪苷生物合成基因及其是否通过调节东莨菪苷积累来提高植物耐旱性的分子机理尚且未知。本研究利用BSA(Bulked segregant analysis)、过表达以及RNAi(RNA interference)等方法开展参与白花草木樨东莨菪苷合成的UGT79基因鉴定、耐旱特性及MaMYB4和MabHLH11的转录调控研究,对阐明东莨菪苷的生物合成以及解析白花草木樨耐旱性强的分子机制具有重要意义。主要结果如下:1.全基因组水平鉴定了189个白花草木樨UGT基因家族成员。白花草木樨UGT基因家族成员不均匀地分布在8条染色体上。系统进化分析表明白花草木樨UGT可以分为13组,其中E组数量最多。共有76个MaUGT基因家族成员含有内含子序列,其中Inron-4(4号内含子)是高度保守的内含子。不同组织的转录组分析显示MaUGT在白花草木樨中具有组织表达特异性,16个MaUGT基因均在近等基因系JiMa46与JiMa49中差异表达,地上部和根中分别有73.55%和66.67%的MaUGT基因在非生物胁迫下差异表达,表明大多数MaUGT基因可能参与白花草木樨的发育、次生代谢产物的合成以及对非生物胁迫的响应。2.定位到东莨菪苷生物合成的关键基因MaUGT79。基于近等基因系BSA分析,将白花草木樨东莨菪苷生物合成基因定位到5号染色体67,539,223 bp至6Tezacaftor纯度7,540,565 bp区间内,该区间为一个编码UDP-葡萄糖基转移酶编码基因MaUGT79,该基因的编码区存在6个SNP和一个邻近的10 bp的Indel,这个Indel缺失能够引起移码突变导致蛋白翻译提前终止。MaUGT79在JiMa46和JiMa49的根中差异表达,且受干旱胁迫诱导表达。烟草亚细胞定位分析发现MaUGT79蛋白定位在细胞质和细胞核。证实体外重组蛋白MaUGT79能以UDP-葡萄糖为糖供体,以东莨菪内酯为底物,催化合成东莨菪苷。过表达MaUGT79显著增加了转基因毛状根中东莨菪苷含量,RNAi-MaUGT79则显著降低了转基因白花草木樨毛状根中东莨菪苷含量。在干旱胁迫处理下,过表达MaUGT79的转基因毛状根中丙二醛(MDA)、H_2O_2和O_2~-含量显著降低,东莨菪苷含量显著增加,干旱标记基因表达量显著上调,拥有转基因根系的白花草木樨嵌合体植株耐旱能力显著提高。初步证实MaUGT79介导白花草木樨东莨菪苷生物合成,通过干旱胁迫下清除活性氧从而提高植物耐旱能力。3.MaMYB4正调控MaUGT79表达调节东莨菪苷积累,从而提高植物耐旱性。MaUGT79启动子序列存在MYB类转录因子结合位点,生物信息学分析鉴定了一个候选转录因子MaMYB4。烟草亚细胞定位表明MaMYB4定位于细胞核。MaMYB4受干旱胁迫诱导表达。酵母单杂交(Yeast-one hybrid,Y1H)实验证明MaMYB4可以结合MaUGT79启动子的-1609至-1201 bp上游序列,进一步通过双荧光素酶报告(Dual-luciferase Reporter)实验证明,MaMYB4可以激活MaUGT79基因的表达。MaMYB4过表达转基因毛状根中,MaUGT79的相对表达量显著提高,东莨菪苷的含量显著高于对照。干旱胁迫下过表达MaMYB4转基因毛状根中MDA、H_2O_2和O_2~-含量显著降低,MaUGT79的表达则显著上调,拥有转基因根系的白花草木樨嵌合体植株耐旱能力显著提高;而RNAi转基因毛状根表现相反。由此,初步解析了转录因子MaMYB4结合MaUGT79启动子,上调该基因转录水平,进而正调控东莨菪苷生物合成和植物耐旱性的分子机制。4.MabHLH11转录因子可以和MaMYB4互作调控东莨菪苷积累。烟草亚细胞定位表明MabHLH11定位于细胞核。MabHLH11受干旱胁迫诱导表达。酵母双杂交(Yeast-two hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(Bimolecular Fluorescent Complimentary,BAdezmapimod分子式i FC)证明了MaMYB4能与MabHLH11互作。双荧光素酶报告实验、MaMYB4和MabHLH11共转化白花草木樨实验结果显示,MabHLH11和MaMYB4都可以激活MaUGT79的表达,并且MabHLH11和MaMYB4相互作用可以增加MaUGT79的表达,最终形成复合体促进东莨菪苷的积累。综上所述,本研究定位并鉴定了一个UDP-葡萄糖基转移酶基因MaUGT79,解析了该基因参与东莨菪苷生物合成和应答干旱胁迫的分子机制,发掘了上游调控因子MaMYB4,从而揭示干旱诱导MaMYB4调控MaUGT79表达及东莨菪苷积累的分子基础,进一步发现MabHLH11与MaMYB4互作并调控东莨菪苷的生物合成。本研究揭示了植物通过积累东莨菪苷适应干旱逆境的调控机制,为白花草木樨分子改良和种质创新提供重要的理论依据和基因资源。

目的：探讨再生障碍性贫血(AA)血清血小板生成素(TPO)、白细胞介素-17(IL-17)、γ-干扰素(IFN-γ)、促红细胞生成素(EPO)水平变化及意义。方法：回顾性分析2019年7月～2020年9月在天津市第一中心医院进行治疗的259例AA患者一般临床资料，将AA患者纳入试验组，选取同期健康体检者81例纳入对照组，比较两组一般临床资料，探讨血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO在AA中诊断价值。结果：试验组IFN-γ、IL-17、EPO、TPO均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。极重型患者血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO水平均显著高于非重型、重型患者，重型患者血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO水平高于非重型患者，差异均有统计学意义(P<0.05)。原发性、继发性两组血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后试验组患者血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO水平明显低于治疗前，差异有统计学意义(P<0.05)。血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO在预后评估中均具有一定价值GSK1120212作用(P<0Lorlatinib溶解度.05);Spearman相关性分析发现IFN-γ、IL-17、EPO、TPO均与RORγ1呈正相关(P<0.05)。结论：AA患者血清IFN-γ、IL-17、EPO、TPO水平均显著高于健康者，且指标间还arbovirus infection存在互相影响的情况，可为AA早期诊断及预后评估提供临床依据。

目的:基于葡聚糖凝胶微球(Dextran microspheres,DMs)构建一种具备体内栓塞可视化的~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs。通过建立兔VX2肝移植瘤动物模型,使用DMs、~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs对实验用兔进行介入栓塞治疗,探讨DMs介入栓塞以及关于~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs的经动脉放射栓塞(Transcatheter arterial radioembolization,TARE)对兔VX2肝移植瘤的治疗效果评估。方法:光镜下观察DMs的表观形态,测定钢筛筛选的20-70μm的DMs的粒径分布。通过酯化反应在DMs的羟基端引入酪氨酸连接的成纤维蛋白结合肽类似物(Tyr-FAP-2286),得Tyr-FAP-2286-DMs,并通过高效液相色谱法(High performance liquid chromatography,HPLC)测定载药率。DMs和Tyr-FAP-2286-DMs通过Iodogen法进行碘-125(Iodine-125,~(125)I)标记,并对核素累计释放量进行研究。DMs和Tyr-FAP-2286-DMs通过Iodogen法进行碘-131(Iodine-131,~(131)I)标记得~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs。准备36只成年新西兰大白兔,将兔间变表皮鳞癌(VX2)瘤块移植于肝脏,构建兔VX2肝移植瘤模型,依据氟[~(18)F]脱氧葡萄糖(~(18)Fluorine-fluorodeoxyglucose,~(18)F-FDG)正电子发射计算机断层扫描(Positron emission computed tomography/computed tomography,PET/CT)显像挑选入组模型。兔VX2肝移植瘤模型随机分组,每组2只分别进行DMs介入栓塞以及~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs的TARE治疗。通过0、10、24 h的单光子发射断层显像/X线计算机体层成像(Single photon emission computed tomography/computed tomography,SPECT/CT)显像评估~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs栓塞情况以及体内核素~(131)I分布情况。通过~(18)F-FDG PET/CT显像观察各组实验用兔体内~(18)F-FDG摄取情况,以评估肿瘤代谢活跃程度、治疗效果。术后15天取肝脏肿瘤及肿瘤周围组织进行病理研究。结果:DMs表面光整,呈圆形,粒径范围为20-70μm,平均粒径为32.41±9.08μm,适合用于TARE治疗。成功以酯化合成法制备得Tyr-FAP-2286-DMs,Tyr-FAP-2286的包封率可达55.52±7.60%,载药率为0.0278%。通过Iodogen法进行~(131)I标记制得~(131)I-DMs和~(131)I-Ferrostatin-1 IC50Tyr-FAP-2286-DMs。成功构建兔VX2肝移植瘤模型并通过~(18)F-FDG PET/CT显像验证兔VX2肝移植瘤模型。SPECT/CT显示~(131)I-DMs和~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs栓塞在体内稳定性良好,肝内肿瘤部位始终保持高放射性浓聚。术前与术后5天的~(18)F-FDG PET/CT显像结果显示~(131)I-Tyr-FAP-228selleckchem CL 3189526-DMs治疗后最大标准摄取(Maximum standard uptake value,SUV_(max))值变化率最大,为53.62±10.29%。病理结果显示~(131)I-Tyr-FAPpolyester-based biocomposites-2286-DMs治疗后肿瘤细胞出现大面积坏死、纤维化。结论:DMs的粒径大小符合TARE的要求。通过Iodogen法构建的~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs有良好的体内稳定性且通过SPECT/CT显像可以实现微球可视化,获得体内微球分布以评估栓塞效果、预测治疗效果。~(18)F-FDG PET/CT显像和病理检测结果显示,~(131)I-Tyr-FAP-2286-DMs对兔VX2肝移植瘤的治疗效果优于~(131)I-DMs和DMs,有效降低肿瘤活性,对肿瘤细胞有较强的杀伤作用。本研究优化了DMs的载药方式,为功能化TARE提供了可行性选择。

目的 探讨谷胱甘肽硫转移酶P1基因(GSTP1)和切除修复交叉互补基因1(ERCC1)基因多态性与食管癌患者放疗敏感性及预后的关系。方法 选取接受多西他赛单药化疗和同期放疗的更多食管癌患者200例，放疗1个疗程后根据完全缓解、部分缓解、稳定、进展情况将患者分为放疗敏感组(完全缓解、部分缓解)、放疗不敏感组(稳定、进展),进行3 a随访，记录患者生存情况。采集患者外周静treatment medical脉血，提取基因组DNA并进行PCR扩增，分析GSTP1基因G28152A位点和ERCC1基因C118T位点的单核苷酸多态性(SNP)。取适量的患者食管癌组织，组织匀浆后应用酶联免疫吸附法测定髓磷脂碱性蛋白1(MBP-1)、磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、磷脂酶Cwww.selleck.cn/products/VX-765ε1(PLCE1)基因蛋白浓度。结果 GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于野生型GG的患者，稳定、进展的比例明显低于野生型GG的患者(P<0.01)。ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后完全缓解、部分缓解的比例明显高于携带杂合型CT和突变型TT的患者(P<0.01)。GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者放疗后生存率升高(P<0.05);ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗后生存率明显升高(P<0.05)。放疗不敏感组凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达水平明显降低，增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1表达水平明显升高(P<0.05)。GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高，Cyclin D1、PLCE1表达水平明显降低(P<0.01)。ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者MBP-1、PTEN表达水平明显升高，Cyclin D1、PLCE1表达水平明显降低(P<0.05)。结论 GSTP1基因携带杂合型GA和突变型AA、ERCC1基因携带野生型CC的食管癌患者放疗预后较好，可能与上调凋亡相关基因MBP-1、PTEN表达，下调增殖相关基因Cyclin D1、PLCE1表达有关。

肝细胞癌（HCC）是最常见的原发性肝癌，是全球范围内最常见和高致死率的癌症之一。目前，根治性肝切除术依然是早期和部分中晚期HCC最有效的治疗手段之一。肝切除围手术期并发症是影响HCC患者长短期预后的关键影响因素，其中肝切除术后肝功能衰竭（PHLF）是肝切除术后常见的并发症之一biosilicate cement。PHLF是肝切除患者围手术期死亡的主要病因，术前及时发现高危PHLF患者是亟待解决的临床实际问题和研究热点。传统肝功能评估方法应用Barasertib体内广泛，能够区分出PHLF高危患者，但其预测准确性相对不高。近些年以来，随着人工智能技术的发展，越来越多的高级算法纳入更全面危险因素的模型被应用于PHLF预测领域。国内外学者通过各类统计学方法构建了新式PHLF相关预测模型，并Nirogacestat价格证实了模型的准确性得到明显提升。经过前期大量文献检索，笔者通过归纳总结PHLF风险预测模型的相关文献，对其研究进展进行综述，以方便临床医生和研究者更全面地了解各类型的PHLF预测模型。

目的：探讨补脾强力复方对亚甲减并实验性自身免疫性重症肌无力（ExperimentalAutoimmuneMyastheniaGravis，EAMG）大鼠下丘脑-垂体-甲状腺-胸腺（Hypothalamic-pituitary-thyroid-thymus，HPTT）轴功能的修复作用，为补脾强力复方从神经-内分泌-免疫角度治疗重症肌无力及其共病寻找理论依据。MLN4924小鼠方法：动物实验通过甲巯咪唑灌胃45天及含鼠源性AchR- sα亚基 97-116 肽段序列（R97-116）免疫乳剂皮下注射建立合并亚甲减的EAMG大鼠模型，随机分为模型组寻找更多（Model group，M组）、泼尼松组（Prednisone group，P组）、补脾强力复方低剂量组（Low dose of Bupiqiangli decoction group，LBD组）、补脾强力复方中剂量组（Middle dose of Bupiqiangli decoction group，MBD组）、补脾强力复方高剂量组（High dose of Bupiqiangli decoction group，HBD组），加上正常大鼠作为对照组（Control group，C组）各8只。各组大鼠给予相应药物28天同时进行行为学观察后分别处死，取血通过ELISA法检测大鼠血清AchR-Ab、TSH、TRH、T3、T4含量及TNF-α、TGF-β、IL-4、IL-17相关细胞因子含量。结果：建模后各组大鼠体质量相对C组明显下降（P＜0.01），给药后取材前，M组大鼠较各治疗组体质量明显降低（P＜0.01）；与LBD组相比，HBD组、P组大鼠体质量升高具有明显统计学意义（P＜0.01）。治疗后M组大鼠Lennon评分趋势进一步升高，LBD组、MBD组较给药前症状变化不明显，HBD组与P组Lennon评分降低。与M组相比，LBD组、MBD组、HBD组、P组大鼠血清AchR-Ab、TSH、TRH、TNF-α、IL-4、IL-17均下降，TGF-β均升高（P＜0.05），其中均以HBD组、P组变化更为明显（P＜0.01）。然而T3、T4、fT4变germline epigenetic defects化不明显。结论：补脾强力复方各组能一定程度上改善合并亚甲减的EAMG大鼠行为学异常，包括体质量和Lennon等级，其中高剂量组能够明显改善大鼠临床症状。同时补脾强力复方能够修复损伤的HPTT轴，调节该轴各个靶器官释放的激素水平，使其向正常机体的分泌水平靠近。

分别从青稞麸皮和胚乳中制备2种常见的谷物多糖青稞阿拉伯木聚糖（highland barley arabinoxylan,HBAX）和青稞β-葡聚糖（highlanstandard cleaning and disinfectiond barley β-glucan,HBBG），通过酶促动力学和荧光猝灭分析研究了2种青稞多糖对胰α-淀粉酶的抑制作用、抑制方式、抑制类型更多及其与酶的相互作用关系。结果表明，HBAX和HBBG对胰α-淀粉酶均有一定的抑制作用，但HBAX的抑制作用显著强于HBBG；二者对胰α-淀粉酶的抑制方式均为可逆性抑制，但其抑制类型更多不同，HBAX为竞争性和非竞争性的混合型抑制，表明其不仅能与酶活性位点结合，还能形成酶-淀粉-抑制剂复合物阻碍酶促反应，而HBBG为反竞争性和非竞争性的混合型抑制，说明HBBG只能与酶的非活性位点结合形成酶-淀粉-抑制剂复合物。荧光猝灭结果证实HBAX和HBBG均能与胰α-淀粉酶发生相互作用，并通过静态猝灭其内源荧光，但HBAX与酶的亲和力显著高于HBBG，且HBAX能影响胰α-淀粉酶的内部疏水环境极性，从而影响其微观结构。综上，HBAX和HBBG对胰α-淀粉酶的抑制作用差异可能与其抑制类型和相互作用亲和力不同有关。本研究将为青稞多糖在淀粉消化调控和低血糖生成指数食物中的应用提供一定的理论依据。