ALK抑制剂

现代科技的快速发展为天然产物有效成分的提取和功能研究提供了新途径,有关的研究和实graft infection践不断深入。近年来,低毒性、环境友好、价廉、操作简便的提取溶剂成为天然产物化学领域的热点之一。离子液体、超临界流体、深共熔溶剂等提取溶剂引起研究工作者的广泛关注。由氢键受体和氢键供体制备而成的二组分或三组分深共熔溶剂,其熔点显著低于各个组分纯物质的熔点,在天然产物化学、电化学、有机合成、药物缓释等领域应用潜力巨大。本文选择了11种不同Regorafenib配制摩尔比的深共熔溶剂,对其制备工艺进行了研究,分析其密度和黏度;采用深共熔溶剂分别提取杨梅叶、瓜蒌皮中的黄酮类化合物,并采用大孔树脂对提取物进行分离纯化,并对杨梅素和芦丁含量测定,优化了提取工艺;最后对提取分离的芦丁、杨梅素进行了抗氧化活性的研究。主要进行了以下研究工作:(1)研究了深共熔溶剂制备及其物理性质。结果发现,制备的11种深共熔溶剂在氢键受体与氢键供体相同的条件下,随着氢键供体摩尔比的增大,制备深共熔溶剂消耗时间更少。随着温度的上升,深共熔溶剂的黏度在逐渐降低,深共熔溶剂的黏度与氢键供体的黏度有关。氢键供体为多元醇类制备的深共熔溶剂密度值更小,深共熔溶剂的密度由氢键供体决定。(2)研究了杨梅叶中黄酮类化合物提取、分离及抗氧化性。研究发现,使用11种含水率为30%的深共熔溶剂提取杨梅叶中杨梅素,与使用体积分数80%的乙醇比较,选择DES-5(氯化胆碱-草酸)的组合可获得较好的提取效果。响应面试验结果表明,获得最佳的提取条件为:含水率19%,液料比37:1 m L/g,提取温度72℃,提取时间45 min,在此条件下,杨梅素提取量为21.58 mg/g。最优组合的提取液经AB-8大孔吸附树脂吸附解吸,得到的最佳结果为吸附速率为1 BV/hr,使用无水乙醇解吸速率为1BV/hr,解吸体积为2 BV。DPPH法与·OH自由基法对杨梅素的抗氧化活性的研究中,在2μg/m L～16μg/m L的浓度下杨梅素的清除率要比Vc的更好。(3)研究了瓜蒌皮中黄酮类化合物提取、分离及抗氧化性。研究发现,使用体积分数为80%甲醇与制备的11中含水率为30%CP-690550细胞培养的深共熔溶剂提取瓜蒌皮中的芦丁,采用DES-3(氯化胆碱-乙二醇)可获得较好的提取效果。采用响应面法优化得到的最佳提取工艺条件为:含水率36%,液料比25:1 m L/g,提取温度57℃,提取时间34 min,在此条件下,芦丁提取量为28.77μg/g。使用AB-8型大孔树脂分离纯化瓜蒌皮中的芦丁,甲醇解吸,旋蒸。在瓜蒌皮中的芦丁浓度为20μg/m L～180μg/m L的范围内对DPPH具有良好的抗氧化作用;在Vc与瓜蒌皮中的芦丁浓度为20μg/m L～160μg/m L的范围内对·OH自由基的清除率逐渐增大,瓜蒌皮中的芦丁的抗氧化效果比Vc略差。

目的：建立稳定的实验室多克隆抗体制备流程，选择Smarcad1作为目的基因进行重组蛋白表达纯化与多克隆抗体制备，并对其进行特异性验证。方法：以本实验室的pcDNA3.1-Flag-Smarcad1质粒作为模板，构建pEPF-07321332化学结构T-16b-Smarcad1-F1原核表达质粒。表达Smarcad1-F1蛋白，并纯化。利用蛋白质免疫印迹，蛋白质免疫共沉淀和免疫荧光实验检测抗体特异性。interface hepatitis结果：PCR鉴定结果显示，成功构建pET-16b-Smarcad1-F1表达质粒。蛋白表达纯化Torin 1分子式实验中，考马斯亮蓝染色检测，相较于诱导前，加入IPTG后Smarcad1蛋白成功诱导表达，且纯化出分子量为27 kD的目的蛋白。Western印迹证明，制备的抗体能够特异性识别内源性Smarcad1蛋白。蛋白质免疫共沉淀实验显示，相较于对照组，制备的抗体能够与Smarcad1蛋白结合。免疫荧光实验检测所制备抗体的特异性，结果显示制备的抗体可以特异性识别内源性Smarcad1蛋白。结论：成功构建了Smarcad1原核表达质粒，利用原核蛋白表达纯化出Smarcad1蛋白，利用该蛋白制备的抗体可以特异性识别内源性Smarcad1蛋白，为后续原核表达蛋白及多克隆抗体制备提供思路。

目的 观察瑞巴派特联合奥美拉唑DNA-based medicine治疗慢性胃炎的临床效果。方法 选取2019年12月—2020年11月中山亚太医院收治的慢性胃炎患者62例，根据数字随机表法分为观察组和对照组，每组31例。对照组Colforsin MW行奥美拉唑治疗，观察组行瑞巴派特联合奥美拉唑治疗，2组患者均治疗2个月。比较2组患者临床疗效、临床症状消退时间，治疗前后胃肠道激素水平、症状积分及不良反应。结果 观察组患者总有效率为90.32%,高于对照组的64.52%(χ~2=5.905,P=0.015);观察组患者胃部烧灼点击此处、反酸及上腹疼痛症状消退时间均短于对照组(P<0.01);治疗2个月后，2组患者胃泌素(GAS)、胃动素(MOT)及生长激素(GH)水平均高于治疗前，且观察组高于对照组(P<0.01);2组患者上腹疼痛、腹胀、嗳气及乏力积分均低于治疗前，且观察组低于对照组(P<0.01);2组患者不良反应总发生率比较差异无统计学意义(χ~2=1.040,P=0.308)。结论 瑞巴派特联合奥美拉唑治疗慢性胃炎的效果较好，可改善患者临床症状，还可纠正患者胃肠道激素分泌异常情况，改善预后，可推广应用。

目的 探讨山奈酚（kaempferol, Kae）对脑缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）损伤的治疗作用。方法 用大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）1 h/再灌注法建立大鼠脑I/R模型。大鼠分为假手术（Sham）组，MCAO组和MCAO+Kae组。再灌注后，MCAO+Kae组大鼠每天通过灌胃给予100 mg/kgKae，持续7 d;Sham组和MCAO组给予等体积生理盐水。评估各组大鼠的神经功能，TTC染色和核磁共振成像观察Baf-A1抑制剂脑梗死情况；微正电子发射断层扫描成像观察脑血流；TUNEL与NeuN免疫荧光双标染色观察脑组织中神经元凋亡情况；试剂盒法检测脑组织中丙二醛（malondialdehyde, MDA）和3-硝基酪氨酸ABT-199分子式（3-nitrotyrosine, 3-NT）水平；Western blot检测脑组织中Cleaved Caspase-3、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)和白介素1β(interleukin-1β, IL-1β)蛋白表达水平。结果 Kae能明显改善MCAO大鼠的神经功能，减少脑梗死体积，增加脑血流，降低神经Clinically amenable bioink元凋亡，降低脑组织中MDA和3-NT水平，并抑制脑组织中Cleaved Caspase-3、TNF-α和IL-1β表达。结论 Kae对脑I/R大鼠具有神经保护作用，抗炎、抗氧化和抗凋亡作用可能是Kae发挥神经保护的机制。

目的 了解南宁市江南区9种呼吸道感染病原体的IgM抗体检测结果CB-839 MW及流行情况。方法 采用间接免疫荧光法，检测2020年6月至2021年5月就诊于该院及其分院的5 632例患者的9种呼吸道病原体IgM抗体，并从年龄、性别和季节等方面分析其抗体的检出情况。结果 5 632例标本的9种呼吸medullary rim sign道感染病原体IgM抗体总阳性率为18.04%(1 016/5 632),单一病原体IgM抗体阳性率为15.48%(872/5 632),混合病原体IgM抗体阳性率为2.56%(144/5 632);其中肺炎支原体(MP)为IgM抗体阳性率最高的病原体，其次为副流感病毒(PIV)。从年龄分组来看，0～12岁组呼吸道感染病原体IgM抗体阳性率最高，其次为>12～59岁组，最低为>59岁组，三组间差异有统计学意义(χ~2=167.23,P<0.05);从性别来看，女性呼吸道感染病原体IgM抗体阳性率高于男性(χ~2=63.58,P<0.05);各季节之间呼吸道病原体IgM抗体阳性率比较差异均无统计学意义(χ~2=4.72,P=0.19)。结论 MP及PIV是南宁市江南区呼吸道感染患者的主要病原体，女性及低龄儿童是呼吸道感染的易感人群；建议相关部门做购买Mirdametinib好重点人群的防范工作，预防相应病原体的流行和传播。

目的 研究Hsp90抑制剂CH5138303在抗轮状病毒感染中的作用。方法 使用人肠上皮细胞Caco-2感染轮状病毒Wa株模型评价CH5138303对轮状病毒感染的作用，流式细胞术评价CH5138303抑制轮状病毒Wa株感染肠上皮细胞Caco-2感染效率；同时通过检测新生病毒的滴度评价高、低浓度（10μmol/L、1μmol/L）CH寻找更多5138303抑制活性轮状病毒的生成效果；进一步，使用乳鼠体内实验，评价口服CH5138303抑制轮状病毒感染导致腹泻发生程度及重症致死性轮状病毒感染的死亡率。结果1)CH5138303显著抑制轮状病毒感染建立；2)CH5138303强烈抑制活性轮状病毒的生成；3)不同浓度（10μmol/L、1μmol/L）CH5138303抑制效Lateral medullary syndrome率分别为90%及80%;4)CH5138303显著缓解轮状病毒乳鼠腹泻症状；5)CH5138303显著降低重症致死性轮状病毒感染模型中小鼠死亡率；6)CH5138303细胞毒性较常见的Hsp90抑制剂格尔德霉素、17-AAG显著较低。结论 Hsp90抑制剂CH5138303能显著抑制轮状病毒复制，延缓轮状病毒腹泻的发生，特别是有效的降低重症致死性轮状病毒腹泻的发生，从而有助于高效特Etoposide体内实验剂量异性抗轮状病毒药物的开发。

目的 利用Cardiac histopathology网络药理学、分子对接技术并进行体外实验验证，探讨丰城鸡血藤有效成分对应靶基因治疗三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC)的作用机制。方法 基于文献研究并结合数据库筛选得到丰城鸡血藤主要活性成分以及TNBC相关靶标寻找交集基因构建蛋白相互作用(PPI)网络图，根据相互关系大小筛选核心靶标。构建“中药-成分-靶点-疾病”核心靶标相互作用网络模型。将交集靶点进行基因GO功能分析和KEGG通路富集分析。最后将筛选出的成分与靶标进行分子对接以及体外实验验证。结果 收集到丰城鸡血藤38个活性成分，相关潜在靶点388个，TNBC靶点3 919个，丰城鸡血藤治疗TNBC靶点277个。主要作用于PIK3R1、PIK3CA、MAPK1、AKT1、SPD-0332991浓度RC等多个靶标，在体外实验中可知，丰城鸡血藤三氯甲烷部位萃取物以及单体化合物木犀草素、白桦脂酸对细胞点击此处增殖均有一定的抑制作用。在给药浓度范围内各组均能抑制VEGFA、AKT、PIK3CA、CDK1、CDK4的表达。结论 基于网络药理学和分子对接方法，对丰城鸡血藤治疗TNBC可能的靶标和信号通路进行探讨，并进行体外验证实验，进一步验证了网络药理学的预测。

前庭神经鞘瘤（vestibular schwannolow- and medium-energy ion scatteringma, VS）是中枢神经系统最常见的良性肿瘤之一。目前主要采用手术治疗、立体定向放射治疗及随访观察等，缺少可用于VS的药物治疗。虽然手术技术相对LY2157299体内实验剂量成熟，但并发症无寻找更多法完全避免；且不同病例生长速度迥异，对放射治疗的敏感性也存在较大差异。随着分子生物学研究的不断深入，VS的生长机制研究大多聚焦于神经纤维蛋白2基因（neurofibromin 2, NF2）和merlin蛋白的相关上下游和受体蛋白酪氨酸激酶（receptor protein tyrosine kinase, RTK）、血管内皮生长因子受体（vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR）、雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1, mTORC1)、血小板衍生生长因子受体（platelet derived growth factor receptor, PDGFR）等相应靶点。已报道的研究提示有相当多的药物对VS细胞的增殖都有抑制作用。虽然大部分研究都还在体外细胞实验和/或动物实验阶段，少部分进入临床Ⅰ～Ⅱ期研究，尚不能导向临床治疗；但据此可以全面了解VS药物治疗的现状和前景，有助于后续研究的开展。

目的 了解台州市2021年各辖区上送食源性疾病病例沙门菌血清型分布以及耐药情况，为沙门菌疾病的合理用药和疫情防控提供科学依据。方法 依据GB 4789.4—20Trichostatin A使用方法16对台州市县市区上送的沙门菌进行血清型鉴定，并且采用微量肉汤稀释法对沙门菌进行抗生素敏感试验。结果 176株沙门菌共鉴定出34种血清型，其中鼠伤寒沙门菌83株，占47.16%;肠炎沙门菌21株，占11.93%;伦敦沙门菌15株，占8.52%。药敏试验结果表明，共有145株(82.39%)沙门菌对1种及以上抗生素耐药，其中多重耐药菌株有109株(61.93%)。氨苄西林(68.18%)的耐药率最高，其次对四环素(61.93%)、氨苄西林/舒巴坦(53.41%)、氯霉素(34.66%)、复方新诺明segmental arterial mediolysis(32.95%)的耐药率也较高；对头孢西丁(96.59%)、亚胺培南(JNJ-42756493研究购买94.32%)、阿奇霉素(93.75%)、头孢他啶(87.50%)、庆大霉素(84.66%)等药物较为敏感。结论 台州市食源性疾病病例沙门菌血清型分布多样性，且沙门菌耐药及多重耐药情况较为严峻。

目的 探究皮质抑素通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对急性心肌梗死后心力衰竭(HF-AMI)大鼠氧化应激及心肌细胞凋亡的影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、皮获悉更多质抑素高剂量组(CST-H组)和皮质抑素低剂量组(CST-L组),每组10只。通过手术结扎冠状动脉左前降支建立HF-AMI大鼠模型。CST-relative biological effectivenessH组和CST-L组腹膜内注射皮质抑素[175.0 mg/(kg·d)和87.5 mg/(kg·d)],其余组腹膜内注射生理盐水。超声心动图检测大鼠心功能；苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠心肌病理学变化；酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒检测大鼠超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dselleck产品UTP缺口末端标记(TUNEL)染色检测大鼠心肌细胞凋亡；蛋白质印迹法(Western Blot)检测大鼠B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)抗体、Bcl-2相关X蛋白(Bax)抗体、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶-6(p-MKK6)抗体、丝裂原活化蛋白激酶激酶-6(MKK6)、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)和p38 MAPK蛋白表达。结果 与假手术组相比，模型组大鼠心功能下降，血流动力学障碍，心肌排列紊乱，且伴有炎性细胞浸润，MDA和ROS含量、心肌细胞凋亡率、p-MKK6/MKK6和p-p38 MAPK/p38 MAPK表达明显升高(P<0.05),SOD含量明显降低(P<0.05);与模型组相比，皮质抑素呈剂量依赖性改善HF-AMI大鼠心功能、血流动力学和心肌病理学变化，降低MDA和ROS含量、心肌细胞凋亡率、p-MKK6/MKK6和p-p38 MAPK/p38 MAPK表达(P<0.05),升高SOD含量(P<0.05)。结论 皮质抑素通过抑制p38 MAPK信号通路，抑制氧化应激和心肌细胞凋亡，改善HF-AMI大鼠心功能。