ALK抑制剂

目的分析抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）阳性患者在自身免疫性疾病中的分布及特征，探讨ANCA与自身免疫性疾病的相关性，以期能为临床医生提供相应的理论依据，在诊疗中对病情做出更加精准判断，并制定出更合理的治疗方案。方法 选取2015年1月至2021年9月在成都医学院第一附属医院确诊为自身免疫性疾病且同时进行间接荧光法和蛋白质印迹技术检测ANCA为阳性住院患者信息，对患者的一般资料、临床特征及自身免疫性疾病类型进行分析。结果共分析ANCA阳性患者247例，其中核周型抗中性粒细胞胞浆抗体（pANCA）阳性106例，胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体（cANCA）阳性141例，60岁以上ANCA阳性率均有所增高（P<0.05）。ANCA相关性血管炎（AAV）占比最高，达143例（58%），除常见的呼吸系统（30.36%）及肾脏（21.86%）受累外，有15例患者（6.07%）出现神经系统受累表现，诊断为中枢神经系统（CNS）性血管炎Biomass organic matter；其他疾病以pANCA阳性为主，在系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、系统性硬化症（SSc)等疾病中均有分布。pANCA阳性SLE患者中81%ANA荧光结果表现为高滴度，多数伴有dsDNA抗体和ssa-A/Ro52自身抗体阳性。结论ANCA 阳性患者以中老年居多，ANCNVP-TNKS656体内实验剂量A是临床AAV患者诊断的重要参考指标，其出现CNS受累的表现时，对CNS血管炎的诊断有一定指导意义。AAV以外自身免疫性疾病中多出现pANCA阳性，pANCA阳性对于AY-22989配制SLE患者活动度及狼疮肾炎有一定参考价值。

青钱柳是珍贵的药食同源型植物，青钱柳多糖CP50是具有较强生物活性的果胶类酸性多糖。黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase，XO）是一种嘌呤分解代谢酶，与高尿酸血症和痛风形成有关。该研究采用正交法优化了从青钱柳干叶中制备青钱柳多糖CP50的最佳工艺为：提取温度100 ℃、料液比1:40、提取时间Regorafenib2 h，此条件下多糖得率为1.67%。以黄Continuous antibiotic prophylaxis (CAP)嘌呤氧化酶作为靶点，并结合分子模拟手段探究了青钱柳多糖CP50对XO的抑制机理。试验结果显示，青钱柳多糖CP50（0 ～ 1 mg/mL）对黄嘌呤氧化酶有一定抑制作用，且对XO的抑制活性呈浓度依赖性，IC_(50)为0.825 mg/mL。分子对接结果进一步表明，青钱柳多糖作用于XO时，CP50分子插入XO的疏水腔，占据催化中心，导致XO活性受到抑制而达到降低尿酸的效果。该研究旨在为青钱柳CP50作为一种有用的膳食多糖应用于高尿酸血症患者的日常饮Erastin分子式食提供方法借鉴和数据支持。

乳腺癌已成为女性发病率最高的恶性肿瘤， 严重危害immunological ageing女性的健康。从传统药物中筛选出高效低毒的先导化合物是开发乳腺癌治疗药物的有效途径之一。毛大丁草内酯J是本课题组前期从民族药毛大丁草中分离得到的一种新型香豆素类化合物， 具有显著的抗肿瘤活性， 但关于毛大丁草内酯J对乳腺癌细胞周期和凋亡的影响及作用机制尚不明确。本研究利用CCK-8法、克隆形成实验、PI染色法探讨毛大丁草内酯J对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖及周期的影响。通过DAPI、Annexin V/TO-PRO-3、Rhod-2 AM、TMRM、DCFDA染色法及蛋白免疫印迹https://www.selleck.cn/products/cb-839.html法考察毛大丁草内酯J对MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡及线粒体功能的影响。结果表明， 毛大丁草内酯J通过调控P21/CDC25C/CDK-1/cyclin B1通路， 将细胞周期阻滞于G2/M期， 显著抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖。此外， 毛大丁草内酯J能诱导MCF-7和MDA确认细节-MB-231细胞发生线粒体钙超载， 线粒体膜电位降低， 活性氧生成增加， 引发细胞凋亡， 其作用机制与激活线粒体凋亡通路有关。综上， 毛大丁草内酯J可通过调控P21/CDC25C/CDK-1/cyclin B1通路及激活线粒体凋亡通路诱导乳腺癌细胞周期阻滞及凋亡， 为乳腺癌新药研发提供新的候选化合物。

目的 探究难治性支原体肺炎(RMPP)患儿Toll寻找更多样受体2(TLR2)信号通路表达及其对疗效的诊断价值。方法 选取2019年5月—2021年5月济南市妇幼保健院收治的70例RMPP患儿为RMPP组,另选取医院同期收治的70例普通支原体肺炎(MPP)患儿为MPP组。收集两组患儿的临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测外周血单个Fer-1核细胞(PBMC)TLR2 mRNA、髓样分化蛋白88(MyD88)mRNA、核转录因子-κB(NF-κB)mRNA相对表达水平,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、干扰素-γ(IFN-γ)、半胱氨酰白三烯(CysLTs)水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA相对表达水平对RMPP的诊断价值。根据RMPP患儿治疗后疗效将患儿分为有效组和无效组,比较治疗后7 d时TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNhuman microbiomeA相对表达水平,并分析其表达与治疗效果的关系。结果 RMPP组的TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA、血清TNF-α、IL-6、IL-8、IFN-γ、CysLTs均高于MPP组(P<0.05);TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA用于RMPP诊断的曲线下面积(AUC)分别为0.775、0.725、0.824;RMPP患儿中有45例治疗有效,25例患儿治疗无效,有效组患儿治疗后7 d时TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA均低于无效组(P<0.05);TLR2 mRNA、MyD88 mRNA、NF-κB mRNA用于预测RMPP患儿疗效的AUC分别为0.817、0.815、0.827。结论 RMPP患儿TLR2/MyD88/NF-κB信号通路活化,TLR2、MyD88、NF-κB mRNA水平均有较高的RMPP诊断及疗效预测价值。

目的 探讨消化性溃疡幽门螺杆菌(Hp)感染患者血清胃泌素(GAS)、白细胞介素-33(IL-33)、miR-26a水平变化及与临床病理特征的关系。方法 选取MLN8237溶解度2018年10月—2020年10月收治的214例消化性溃疡作为研究对象，Hp感染情况：阳性136例、阴性78例。比较二者临床资料、GAS、IL-33、miR-26a水平，采用多因素Logistic回归分析消化性溃疡患者Hp感染的影响因素，分析GAS、IL-33、miR-26a水平与临床病理特征的相关性，比较不同分型Hp感染患者GAS、IL-33、miR-26a水平，采用受试者工作特征(ROC)曲线分析GAS、IL-33、miR-26a对Hp感染分型的鉴别诊断价值。结果 Hp感染阳性患者GAS、IL-33、miR-26a水平均高于阴性患者(P<0.01)。GAS、IL-33、miR-26a均为消化性溃疡患者Hp感染的影响因素(P<0.01)。GAS、IL-PLX3397浓度33、miR-26a水平与消化性溃疡Hp感染患者溃疡面直径有相关性(P<0.01)。Ⅰ型Hp感染患者GAS、IL-33、miR-26a水平高于Ⅱ型患者(P<0.01)。GAS、IL-33、miR-26a联合鉴别诊断Hp感染分型的ROC曲线下面积最大，为0.832。结medial frontal gyrus论 血清GAS、IL-33、miR-26a与消化性溃疡患者Hp感染有相关性，且为Hp感染的影响因素，三者联合在鉴别诊断Hp感染分型方面具有良好效能。

畜产品作为餐桌上必备的食物之一，与公众食品安全息息相关。一旦相关畜产品内部含有大量的药物残留成分，则会对人体健康造成严重威胁。一般情况下，国际上主要将兽药残留分为抗生素类、驱肠虫类、生长促进类、抗原虫药类、灭锥虫药类、镇静剂药类等。兽药残留又可称为药物残留，主要是指畜禽类selleckchem NSC 127716等动物服用一定剂量的药物后蓄积或贮存在动物体内细胞组织和器官内的残留，为了有效检测出畜禽动物体内实际的药物残留成分，国家相关部门应用先进的cell-mediated immune response检测技术实现了药SAG生产商残的低分子量检测，同时通过有效的药物监管方式促使市场降低药物使用量，进而减少了动物体内的药物残留。基于此，从不同角度分析了兽药残留的危害，有针对性地提出了控制畜产品兽药残留的解决办法，为满足食品安全管理工作创造了诸多有利条件。

为了获得驴源马疱疹病life-course immunization (LCI)毒8型ORF72基因编码的糖蛋白D(glycoprotein D,gD)和多克隆抗体，试验根据GenBank上公布的EHV-8 gD基因序列，设计了特异性引物，使用PCR方法扩增得到主要抗原区和跨膜区片段共960 bp,并构建pET-32a-gD960原核表达载体。将重组质粒pET-32a-gD960转化至E.coli BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导并优化表达，获得gD重组蛋白，利用SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定表达产物。使用包涵体蛋白纯化试剂盒纯化gD重组蛋白，并免疫小鼠，共免疫3次，每次间隔2周。三免2周后，通过Western-p38 MAPK抑制剂blot对鼠抗EHV-8 gD多克隆抗体进行鉴定，并使用间接ELISA测定其效价。结果表明：试验成功构建EHV-8 gD960基因表达载体并获得gD重组蛋白，gD重组蛋白分子质量约为65 ku,与预期大小相符Belumosudil体内实验剂量，且特异性良好。小鼠血清中鼠抗EHV-8 gD960多克隆抗体效价为1∶16 000,该多克隆抗体可以与EHV-8 gD960蛋白发生免疫反应。说明成功表达了EHV-8 gD960重组蛋白并制备了多克隆抗体，多克隆抗体的效价较高，免疫原性较好。

目的 筛选乳腺癌中关于糖脂代谢的基因并研究茯苓多糖对其基因表达的影响。方法 选取GEO数据库中包含乳腺Decitabine IC50癌患者及匹配癌旁组织的2个基因数据集，取差异基因交集。应用DAVID6.8数据库对交集差异表达基因进行基因本体功能分析，在生物学过程中选取糖脂代谢相关基因，构建蛋白相互作用网络。采用CCK8法筛Naporafenib选茯苓多糖对乳腺癌细胞MCF-7的最佳给药浓度。RT-qPCR检测对照组与经茯苓多糖处理组MCF-7细胞中糖脂代谢相关基因的表达。结果 利用GEO2R分析数据后共取到交集差异基因27个。GO功能分析显示，生物学功能主要涉及糖异生、糖代谢过程、脂质代谢过程、脂质储存、脂肪酸代谢过程，共选取到7个糖脂相关基因（PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB）。RT-qPCR结果显示7个基因在细胞内表达水平经茯苓多糖干预后较对照组均明显变化。结论 研究表明PCK1、RBP4、CD36、LEP、LPL、CAV1、ACACB这些基因是乳腺癌糖脂代谢的关键基因，茯苓多糖能干预其在乳腺癌Laboratory Refrigeration细胞中的表达。

目的 探讨补肾活血方对人胚肺成纤维细胞的作用机制。方法 首先，观察不同浓度的含药血清对人胚肺成纤维细胞的抑制情况及细胞内的胶原蛋白的含量，确定出实验用含药血清的最佳血药浓度；其次，应用TGF-β1诱导人胚肺成纤维细胞，将实验细胞分为空白对照组，TGF-β1EPZ-6438体外处理组，TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h组（含药血清组），TGF-β1处理+基因敲除阴性对照组（sh-NC组），TGF-β1处理+IL-7A基因敲减组（sh-IL-17A组），TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+过表达质粒阴性对照组（Vector组），PD-0332991TGF-β1处理+最佳浓度含药血清干预1 h+IL-17A过表达质粒组（IL-17AOE组），进行相应药物培养后，检测各组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A表达量的变化。结果 TGF-β1处理组中人胚肺成纤维细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较空白对照组明显增多（P<0.05）；含药血清组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较TGF-β1处理组明显较少，而自噬小体的数量较TGF-β1处理组明显增多；sh-IL-17A组细胞的增值率、胶原蛋白、IL-17A蛋白含量及IL-17A mRNA表达量较sh-NC组明显较少，而自噬小体的数量较sh-NC组明显增多；IL-17AOE组细胞的增值率、胶原蛋白及IL-17A mRNA等各项指标较Vector组明显增多，而自噬小体的数量较Vector组明显减少。结论 补肾活血方可以对MRC-5细胞中的胶原显著降解。这一作用与抑制IL-17Alifestyle medicine介导的通路，激活细胞自噬，进一步降解胶原蛋白有关。

MC3 molecular weight心力衰竭是指由多种原因引起心脏结构异常和/或功能障碍使心脏泵血功能不足以满足机体代谢需要,从而引起的一组复杂临床综合征。尽管近年来心力衰竭的治疗取得了较大的进展,但是心力衰竭高发病率和死亡率的情况并未完全改变。因此,如何有效延缓心力衰竭疾病进展,降低心力衰竭的发病率和死亡率,已成为全球亟待解决的重大公共健康问题。中药在治疗心力衰竭方面具有独特的优势,防己黄芪汤是由防己、黄芪、白术和甘草配伍而成的经典方,在治疗慢性心力衰竭方面有较好的临床疗效。但是,防己黄芪汤治疗心力衰竭的药效物质和作用机制不明确。因此,本论文以防己黄芪汤为研究对象,针对其存在的问题,探究防己黄芪汤抗心力衰竭的药效物质及作用机制。本论文主要研究成果如下:一.运用液质联用技术和质谱分子网络技术对防己黄芪汤化学成分进行辨析,并应用网络药理学技术对防己黄芪汤治疗心力衰竭的作用靶点和作用途径进行初步探究。构建防己黄芪汤化学成分质谱分子网络并辅助辨析防己黄芪汤中165种化学成分。运用网络药理学技术发现肿瘤坏死因子、血管紧张素转化酶可能是防己黄芪汤抗心力衰竭作用潜在的关键靶点;炎症反应、肾素-血管紧张素-醛固酮系统可能是防己黄芪汤抗心力衰竭潜在的作用途径。二.基于特异性检测血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)的荧光探针对防己黄芪汤及其药材、成分进行ACE抑制活性评价,并构建ACE抑制活性分子网络。结果表明,防己黄芪汤有较好的ACE抑制活性,IC_(50)值为202.16±90.61μg/m L。黄芪和甘草材能够呈剂量依赖性的抑制ACE活性;防己总生物碱、白术内酯、黄芪总黄酮和甘草总黄酮也有较好的ACE抑制作用,且呈剂量依赖性。筛选出防己黄芪汤中甘草查尔酮A、甘草查尔酮B等11个具有ACE抑制活性的化学成分,其中4个为首次发现。运用表面等离子共振技术,进一步确证了甘草查尔酮A和甘草查尔酮B能与ACE特异性结合,从而发挥抑制活性。建立防己黄芪汤ACE抑制活性分子网络,初步阐明了防己黄芪汤中发挥ACE抑制活性的主要成分类型,提供了一种中药活性物质发现的新策略。三.建立维拉帕米诱导的斑马鱼心力衰竭模型和斑马鱼胚胎的心功能评价体系,并应用于防己黄芪汤及其组分、成分的抗心力衰竭活性评价和机制研究。结果表明,构建的斑马鱼胚胎心功能评价体系可以准确反映维拉帕米造成的各项心功能下降。运用该方法发现防己黄芪汤可以剂量依赖性的缓解维拉帕米造成的心功能下降,防己、黄芪和甘草以及防己总生物碱、黄芪总黄酮、甘草总黄酮等组分也有较好的抗心力衰竭活性。筛选出防己黄芪汤中甘草查尔酮A、甘草酸、毛蕊异黄酮等抗心力衰竭活性成分,进一步结合活性氧探针发现活性成分均medium- to long-term follow-up可以显著降低斑马鱼体内活性氧生成。运用荧光定量PCR技术检测相关基因的转录水平,发现防己黄芪汤、甘草查尔酮A和甘草酸可以显著降低斑马鱼心力衰竭标志物nppa、促炎因子il1β、il6和tnfa以及caspase 1和caspase 3的转录水平,揭示了防己黄芪汤及其活性成分selleck化学可能是通过调节氧化应激、炎症反应和细胞凋亡相关通路改善维拉帕米诱导的斑马鱼心功能下降。