ALK抑制剂

目的 探讨高胰岛素血症与表皮生长因子受体(EGFR)基因突变阳性晚期非小细胞肺癌一线酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)治疗后耐药的相关性，为延缓EGFR阳性晚期非小细胞肺癌耐药提供新的思路和治疗策略。方法 回顾性收集2019年10月1日至2022年3月30日该院呼吸与危重症医学科住院进行诊治的37例EGFR阳性晚期非小细胞肺癌患者资料，收集患者TKIs治疗前空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素定量(FIQ)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)-3水平，并由公式确认细节计算得出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析以上指标与临床参数的相关性。同时，分析TKIs治疗前、治疗后达部分缓解(PR)或疾病稳定(SD)及耐药后FBG、FIQ、IGF-1、IGFBP-3和HOMA-IR变化值。结果 TKIs治疗前FIQ水平与性别、年龄、基因突变类型、临床分期、颅脑转移情况无相关性。37例患者经TKIs治疗后客观缓解率(ORR)为59%,疾病控制率(DCR)为100%。37例患者随访期内均发生疾病进展(PD),中位无进展生存期(PFS)为14.08个月。TKIs治疗前的FBG水平与TKIs治疗后达PR或SD及耐药后比较，差异无统计学意义(P>0.05);TKIs治疗后达PR或SD的FIQ和HOMA-IR水平与TKIs治疗前比较，差异无统计学意义(P>0.05);耐药programmed death 1后的FIQ和HOMA-IR水平明显高于TKIs治疗前及治疗后达PR或SD(P<0.05)。TKIs治疗后达PR或SD的IGF-1及IGFBP-3水平较TKIs治疗前明显降低，而耐药后较TKIs治疗后达PR或SD明显升高(P<0.05)。单因素COX回归分LY2157299体外析显示高FIQ(≥32.24μIU/mL,HR=2.528,95%CI:1.251～5.110)、高HOMA-IR(≥7.70,HR=2.241,95%CI:1.134～4.431)是肺癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。多因素COX回归分析显示高FIQ(≥32.24μIU/mL,HR=2.803,95%CI:1.063～7.393)是肺癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 一线EGFR-TKIs治疗晚期非小细胞肺癌，其耐药后的FIQ水平明显高于TKIs治疗前和治疗后达PR或SD。高胰岛素血症提示患者预后不良。

诃子为使君子科植物诃子(Terminalia chebula Retz.,T.Chebula)的干燥果实,在我国药用历史悠久,收存于多种古方典籍中,用于多种症候的改善。现代药理学研究揭示诃子在抗肿瘤、抗炎镇痛等方面具有显著活性。课题组前期对40种常见藏药的抗氧化活性进行了筛选评价,结果发现诃子表现出极强的抗氧化活性。由于阿尔兹海默症的发生与发展,同机体氧化应激稳态息息相关,因此课题组前期利用秀丽隐杆线虫模型开展了大量的诃子抗AD活性研究,结果显示诃子及含诃子的复方八味沉香丸可通过调控daf-16核转位,调控下游DAF-16和Hsp16.2表达,改善Aβ_(1-42)诱导的毒性,降低线虫中Aβ_(1-42)寡聚物水平,发挥其抗AD活性。AD转基因秀丽隐杆线虫模型通过将人源Aβ_(1-42)基因整合在线虫组织中,产生Aβ病理获悉更多。由于秀丽隐杆线虫中淀粉样前体蛋白APP的同源物APL-1不含Aβ序列,并且不具有Aβ剪切中关键酶β-剪切酶的活性,因此秀丽隐杆线虫模型更多的应用于筛选改善Aβ诱导毒性的药物中,难以深入研究药物对Aβ产生以及降解中的作用。因此,本课题在前期研究工作的基础上,开展了诃子对外源性Aβ诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤的改善,同时,深入地研究了APPswe转基因细胞中,诃子对Aβ产生过程中α/β/γ-剪切酶活性、以及对Aβ降解作用的影响,较为全面地阐明了诃子抗AD的活性及机制;同时也研究了诃子发挥抗AD活性的物质基础。工作的主要研究内容和研究结果如下:研究发现诃子对外源AβO诱导的人源神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y氧化损伤具有改善作用。本文首先建立了Aβ_(1-42)的寡聚物诱导的SH-SY5Y细胞氧化损伤模型。AβO作用24 h后,细胞质内Ca~(2+)异常升高(与空白组相比升高了62.8%),细胞ATP合成受阻(与空白组相比下降33.2%),细胞ROS水平上调,线粒体膜电位去极化,同时发生Cyt C/Caspase-3依赖的细胞凋亡。在40μg/m L诃子水提液(TWE)给药后,Ca~(2+)水平下调30.4%,ATP水平上调33.0%,ROS水平异常升高和MMP去极化现象被逆转,且Cyt C/Caspase-3依赖的细胞凋food as medicine亡水平降低8.23%,有效改善了由AβO诱导的Ca~(2+)异常代谢以及线粒体代谢紊乱。APPswe转基因细胞中的研究指出,10、40、80μg/m L诃子水提液作用后,细胞外Aβ_(1-40)和Aβ_(1-42)呈现出诃子水提液浓度和时间依赖的下降;其中,80μg/m L TWE作用转基因细胞24 h和48 h后,胞外Aβ_(1-40)的水平下降39.6%和42.8%,Aβ_(1-42)分别降低36.0%和50.7%;α-剪切酶(ADAM10)表达升高1.37倍,β-剪切酶(BACE1)表达降低2.1倍,γ-剪切酶(PS1)表达下调1.24倍,s APPα水平上升4.93倍,s APPβ水平降低1.21倍,表明诃子水提液抑制APP蛋白的淀粉样代谢途径、促进非淀粉样代谢途径。此外,TWE可上调转基因细胞自噬活性,自噬抑制剂CQ阻断自噬后,细胞外Aβ_(1-42)的水平上升1.27,ADAM10水平上升1.41倍,BACE1水平上升1.23倍,s APPα水平上升1.72倍,s APPβ水平上升1.17倍,表明TWE诱导的自噬抑制APP蛋白的淀粉样途径,抑制胞外Aβ_(1-42)积累。通过对水提液进行萃取并考察各萃取相的活性,结合UPLC-MS/Ceralasertib采购MS等分离,显示TWE中主要成分诃子酸(CN)可能是其发挥抗AD作用的重要物质基础。实验证实,在10μM CN处理APPswe转基因细胞后,细胞外Aβ_(1-40)水平下降14.8%,细胞外Aβ_(1-42)水平下降42.7%。该过程中,ADAM10表达升高1.23倍,BACE1表达降低2.3倍,PS1表达下调1.66倍,s APPα水平上升2.61倍,s APPβ水平降低4.35倍,同时,BACE1酶活性降低1.15倍,表明CN抑制BACE1活性,调控APP代谢途径向非淀粉样代谢途径转变而实现。同TWE一致,CN诱导转基因细胞自噬,CQ阻断自噬后,细胞外Aβ_(1-42)的水平上升1.52倍,ADAM10、BACE1、s APPβ水平无显著变化,s APPα水平上升1.48倍,表明TWE诱导的自噬加速APP蛋白的非淀粉样途径,下调胞外Aβ_(1-42)水平。此外,CN还能够改善外源性Aβ诱导的氧化损伤;结果指出,20μM CN处理SH-SY5Y细胞后,阻断AβO诱导的损伤,具体表现为细胞质Ca~(2+)水平下调32.8%,细胞ATP水平上调27.0%,线粒体ROS异常升高和MMP去极化现象逆转,Cyt C/Caspase-3依赖的细胞凋亡水平降低6.5%,表明CN可以改善AβO诱导的SH-SY5Y细胞中Ca~(2+)异常代谢,以及线粒体代谢紊乱。综上所述,本论文深入探讨了诃子的抗AD活性,并对其主要成分诃子酸的抗AD活性进行了研究。结果表明诃子和诃子酸能够有效改善外源AβO诱导的SH-SY5Y细胞中Ca~(2+)异常代谢和线粒体代谢紊乱,并通过调控SH-SY5Y/APPswe细胞中APP的剪切酶活性,增强其非淀粉样代谢途径,抑制Aβ生成;同时,诱导细胞自噬增强Aβ降解。上述结果可为抗AD药物开发和深入挖掘民族药的现代药用价值提供参考数据。

经皮冠状动脉介入术Diabetes genetics（PCI）治疗慢性心血管疾病具有安全、有效、创口小、恢复快等优点，是目前治疗冠心病的主要手段，但术后容易出现焦虑、抑郁等“双心”共病状态。本文基于“治未病”理论探讨PCI术后的“双心”共病防治，总结了PCI术后“双心”共病，即“胸痹”与“郁病”之间的病机联系，认为PCI术后合并焦虑抑郁状态的病因病机为血脉受损，神明难主；溯首痰瘀，身心共因；人身一气，不通则病。继而从未病先防、欲病防发、既病防变、瘥后防复4个方面探讨具体防控措施，强调未病先防，重视术前宣教，以及未出现症状之前的培护正气；欲病防发，通过中医心理疗法、针灸调神法、中医音乐疗更多法、传统导引术等预防发病；既病防变，治疗中灵活运用疏肝活血、祛痰化瘀、滋肾宁心等治法治则；瘥后防复，即防食复、劳复、情复。故将中医学“治未病”理论指导PCI术后焦虑、抑郁的防治，不仅能实现对该病的早发现早干预，亦能将PCI术后“双心”共病的防治过程规范化、程序化，有利于提高临床诊疗能力和治疗疾病的精点击此处准度。

为筛选出香蕉细菌性软腐病的有效防控药剂，通过室内抑菌、盆栽防效以及大田试验，系统开展香蕉细菌性软腐病防治药剂筛选，为生产上的防治提供参考和科学依据。采用含毒介质法中的最低抑制浓度法，测定包括抗生素类和非抗selleck KPT-330生素类等11种杀菌剂对香蕉细菌性软腐病菌的室内抑菌效果，筛选具有抑菌效果的10种药剂进行盆栽试验，并对4种盆栽试验防治效果较好的药剂开展田间防治试验。结果表明：（1）11种药剂中抗生素类药剂以四霉素抑菌效果较好，抑菌最低有效浓度为1.74μg/mL，其次为硫酸链霉素、春雷霉素、中生菌素，抑菌最低有效浓度分别为9.10、29.50、89.10μg/mL；非抗生素类药剂以铜制剂类抑菌效果较好，噻霉酮抑菌最低有效浓度为89.55μg/mL，其次为王铜、噻菌铜，抑菌最低有效浓度分别为445.00、595.00μg/mL。（2）春雷霉素的盆栽防治效果较好，防效达67.97%，其次为噻霉酮、中生菌素、噻菌铜，防效分别为64.58%、63.53%、61.83%。（3）春雷霉素防治效果达90MEM modified Eagle’s medium.1mTOR抑制剂9%，其次为噻霉酮、中生菌素、噻菌铜，防治效果分别为89.84%、84.60%、74.59%。4种药剂对香蕉细菌性软腐病的田间防治效果较好，可作为该病害的防治药剂在生产中交替喷淋应用。

目的：应用中药网络药理学数据库及小分子药物靶点预测平台和疾病基因组数据库，结合分子对接技术，预测巴戟天抗动脉粥样硬化(atherosclerosis， AS)的靶点及信号通路。方法：通过中药网络药理学数据库(TCMSP)及小分子药物靶点预测在线平台(Swiss Target PrediCL 318952ction)挖掘巴戟天有效成分及其所对应的靶点，利用GeneCards、OMIM、Disgenet、Uniport收集并筛选AS相关的疾病基因靶点，获取交集基因，将其导入STRING 11.5数据库中MCC950细胞培养，构建疾病-药物蛋白互作分析(String-PPI)网络图，利用Cytoscape 3.9.1软件对关键靶点网络进行可视化；此外，运用Metascape网络在线平台进行GO、KEGG富集挖掘出其抗AS的分子靶点，并通过KEGG数据库绘制通路图。最后，使用Autodock vina 1.1.2软件对核心化合物及核心靶点基因进行分子对接验证。结果：通过以上数据库共收集得到包括β-谷甾醇和蒽醌在内的17个有效药物化合物、73个核心靶点和1450个关键疾病基因；取交集后得到巴戟天治疗AS的35个核心基因；经String-PPI得到基因间有相互作用的SRC、PGTS2、TGFβ1、REN、ESR1、CASP3等32个基因；KEGG富集到75条信号通路，涉及脂质-动脉粥样硬化、晚期糖基化产物及受体、immunogenic cancer cell phenotypePI3K-Akt信号通路等相关通路；其中脂质-动脉粥样硬化通路主要涉及SRC、BCL2、BAX、CASP3、GSK3B、RXRA等6个靶基因。分子对接结果显示，巴戟天的主要化学成分与核心基因之间有较强的结合活性。结论：巴戟天可能通过β-谷甾醇、蒽醌等主要有效化学成分调控SRC、PGTS2、TGFβ1、REN、RXRA、ESR1、CASP3等32个主要靶基因表达，减轻血管内皮炎症反应，抑制细胞增殖、迁徙和凋亡，发挥抗AS的作用。

目的 探讨复发性流产(RZD1839小鼠SA)患者抗核抗体(ANA)、抗β_2-糖蛋白Ⅰ抗体(A-β_2-GPⅠ)、D-二聚体(D-D)对疾病转归的影响。方法 选取舞钢市人民医院2019年3月至2021年3月收治的224例RSA患者作为观察组，另选取于产科门诊就诊的60例正常经产妇作为对照组health care associated infections。比较两组ANA、A-β_2-GPⅠ阳性率及D-D水平，分析ANA、A-β_2-GPⅠ、D-D与流产次数、RSA患者疾病转归的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析ANA、A-β_2-GPⅠ、D-D表达对RSA患者疾病转归的预测价值。结果 观察组ANA、A-β_2-GPⅠ阳性率及D-D水平均高于对照组(P<0.0Erastin分子式5),流产≤3次的患者D-D水平低于流产>3次的患者(P<0.05)。相关性分析可知，RSA患者ANA、A-β_2-GPⅠ表达与流产次数无关，D-D水平与流产次数呈正相关(P<0.05)。既往流产次数、吸烟、饮酒、受教育程度、生殖道感染、ANA、A-β_2-GPⅠ阳性均为RSA患者疾病转归的影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示，ANA、A-β_2-GPⅠ、D-D表达三者联合预测RSA患者疾病转归的AUC最大，且>0.9,预测效能较高。结论 ANA、A-β_2-GPⅠ、D-D与RSA患者预后密切相关，可有效预测疾病转归。

目的：探讨SCR7对三阴性乳腺癌顺铂化疗的增敏作用。方法：选用三阴乳腺癌MDA-MB-231细胞分为空白对照组、10μmol/L顺铂对照组和联合组（10μmol/L顺铂+10、20和40μmol/L SCR7），采用CCK-8法检测细胞活性并计算细胞增殖抑制率；取对数期TNBC MDA-MB-231细胞构建三阴性乳腺癌移植瘤小鼠模型，建模成功后荷瘤裸鼠随机分为对照组、SCR7组，顺铂组、SCR7+顺铂组；饲养24 d后，观察比较各组荷瘤鼠肿瘤质量、瘤体体iatrogenic immunosuppression积的变化，计算肿瘤抑制率；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin,HE）染色观察瘤体组织细胞形态学变化；原位末端标记法（in situ end labeling,TUNEL）检测乳腺癌肿瘤组织的凋亡；采用Western blot检测X射线修复交叉互补蛋白1(X-ray repair cross complementing 1,XRCC1)、多聚（ADP核糖）聚合酶1[poselleck Gefitinib-based PROTAC 3ly(adp ribose) polymerase 1,PARP1]蛋GDC-0973 NMR白表达。结果：联合组细胞增殖抑制率均高于对照组（P<0.05），且随SCR7质量浓度增大呈逐渐升高趋势（P<0.05）。体内动物实验发现：相较于对照组，SCR7组、顺铂组、SCR7+顺铂组中的乳腺癌肿瘤体积、瘤重减小（P<0.05），其肿瘤抑制率分别是32%、40%、81%;SCR7+顺铂组较顺铂组减少更明显（P<0.05），且小鼠体质量与SCR7组、顺铂组相比无明显差异（P>0.05）;HE染色观察干预组肿瘤组织均呈现明显形态学改变，其中SCR7+顺铂组肿瘤细胞退变变化最明显；TUNEL染色显示SCR7+顺铂组肿瘤细胞凋亡最为严重，可见大量红色细胞凋亡；Western blot检测发现，SCR7+顺铂组XRCC1、PARP1蛋白表达均明显低于其他组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：SCR7在体内外对三阴乳腺癌顺铂化疗均有增敏作用。

目的探讨Bolus厚度和使用次数对乳腺癌根治术后调强放疗皮肤剂量影响。方法选取20例乳腺癌根治术后患者固定野调强放疗计划进行回顾性分析,单独使用0.5 cm或1 cm厚Bolus次数为5 F、10 F、15 F、20 F、25 F和混合使用0.5 cm和1 cm厚Bolus来研究放疗计划靶区均匀性指数(homogeneity index,HHedgehog/Smoothened抑制剂I)、适形度指数(conformity index,CI)及皮肤剂量D_(max)、D_(mean)、D_(min);拟合出皮肤剂量与Bolus使用次数的关系式。结果随着Bolus使用次数增加,皮肤剂量增加,靶区热点减小、低剂量体积降低。不同Bolus使用次数1 cm厚Bolus比0.5 cm厚Bolus靶区均匀性均更好(P <0.05),且随着Bolus使用次数增加,HI逐渐降低。0.5 dysbiotic microbiotacm和1 cm厚Bolus靶区CI随着Bolus使用次数增加先增大后减小,Belnacasan研究购买在15 F附近最大,仅在20 F和25 F 2种厚度Bolus的CI结果具有统计学意义(P <0.05)。0.5 cm厚Bolus皮肤D_(max)和Dmean高于1 cm厚Bolus(P <0.05)。皮肤剂量D与Bolus使用次数F成D=A×F+B×F2+C的关系式。使用0.5 cm厚Bolus 6次外加使用1 cm次8次(0.5 cm 6 F+1 cm 8 F)皮肤D_(max)、HI结果介于0.5 cm 15 F和1 cm 15 F次之间(P <0.05)。结论在乳腺癌根治术后固定野调强放疗中,可以根据Bolus使用次数计算皮肤剂量。提供了一种可以混合使用Bolus的可能性,比单独使用0.5 cm或1 cm Bolus更合适。

本研究目的为表达非洲猪瘟病毒CD2v蛋白作为抗原，制备鼠源性CD2v单克隆抗体。以ASFV-SY18分离株为模板合成EP402R基因，构duck hepatitis A virus建pcDNA3.1-His真核表达载体，通过Expi-CHO表达系统获得重组CD2v蛋白，应用细胞融合技术制备杂交瘤细胞并筛选出单克隆抗体细胞株。实验结果显示，截短EP402R基因成功克隆至表MS-275分子式达载体，构建出pcDNA3.1-CD2v-His质粒，转染至CHO细胞后收获重组蛋白，使用镍亲和层析法纯化带有His标签的CD2v蛋白。经SDS-PAGE及Western Blot确认，CD2v蛋白大小为55 kDa且与免疫小鼠血清反应良Compound C体内实验剂量好。共筛选出3株杂交瘤细胞株分别命名为2D6，4B2及4G12。间接ELISA鉴定三株杂交瘤细胞所制备的腹水效价均高达1:12800，Western blot及间接免疫荧光实验证明三株单抗均可特异性识别重组CD2v蛋白。本研究成功制备了CD2v重组蛋白及其特异性单抗，为开发竞争性ELISA诊断方法及ASFV野毒鉴定奠定了基础。

目的：分析冠心Lorlatinib配制病患者拔牙术中“心率收缩压乘积”(Rate-Pressure-Product, RPP)指标变化规律及其临床意义。方法：记录1802例冠心病患者拔牙术中各阶段收缩压(SBP)、心率(HR)数据，计算RPP值并进行对比分析。结果：拔牙术中各阶段RPP值变化有显著性差异(P<0.01)，表现为一定规律波动；26%的患者麻醉中、43%的患者拔牙手术过程中RPP值> 12000;183例(10.2%)患者拔牙术中出现心脏相关不适，其中168例患者RPP值> 12000，占92%；心脏支架术后、搭桥术后及规范药物治疗的冠心病患者拔牙过程中RPP值的变化无统计学差异。结论：心率收缩压乘积(RPP)是反映心肌耗氧量的常用临床指标，冠心病患者拔牙术中监测RPP变PD0325901采购化，及时采取相应措施，有助于减少术中bio-based oil proof paper发生心血管意外的风险；经过系统治疗、病情稳定的冠心病患者可以安全完成牙拔除术。