ALK抑制剂

目的 探讨柴胡桂枝汤加减治疗程序性细胞死亡蛋白-1(PD-1)/程序性死亡配体-1(PD-L1)免疫抑制剂治疗肿瘤后腹泻的疗效。方法 方便选取2019年1月—2021年6月在菏泽市立医院肿瘤科就诊的92例癌症患者作为研究对象，根据是否使用柴胡桂枝汤加减治疗，将92例癌症患者分为两组，研究组46例、对照组46例。研究组采用柴胡桂枝汤加减联合免疫抑制剂PD-1/PD-L1的治疗方案；对照组只采用免疫抑制剂PD-1/PD-L1的治疗方案。记录并统计两组患者发生腹泻、恶心等情况，对影响PD-1/PPS-341纯度D-L1抑制剂治疗肿瘤后腹泻的因素进行分析。结果 研究组腹泻持续时间是（6.39±2.82）d短于对照组（8.65±2.63）d，差异有统计学意义(t=3.975,P<0.001)；研究组Immune infiltrate结肠炎持续时间是（4.94±2.32）d短于对照组的（7.46±2.37）d，差异有统计学意义(t=5.153,P<0.001)；研究组恶心持续时间是（4.90±2.88）d短于对照组（6.05±2.35）d，差异有统计学意义(t=2.098,P=0.039)。单因素与多因Z-IETD-FMK临床试验素回归分析表明，是否使用柴胡桂枝汤加减治疗是影响PD-1/PD-L1抑制剂治疗肿瘤后腹泻的独立影响因素，可以显著降低腹泻和结直肠炎的持续时间。结论 柴胡桂枝汤加减能够有效预防并缓解PD-1/PD-L1免疫抑制剂治疗肿瘤后的腹泻情况。

目的 探讨加减参芪地黄汤对糖尿病肾RNA Immunoprecipitation (RIP)病患者氧化应激指标及血清转化生长因子β1(Transforming growth factor beta 1,TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂1(Tissueinhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)水平的影响。方法 选取2019年12月—2020年12月期间商洛市第二人民医院收治的96例Ⅳ型糖尿病肾病患者为研究对象，按随机数字表法将其分为研究组和对照组，每组各48例。对照组给予基础治疗加胰岛素，研究组在对照组治疗基础上给予加减参芪地黄汤治疗。治疗6个月后，观察比较两组患者治疗前后对肾功能[血肌酐(Serum creatinine, SCr)、尿β2微球蛋白(Urinaryβ2-microgloblin,β2-MG)、尿蛋白定量(Urine protein, UTP)],氧化应激指标[丙二醛(Malondialdehyde, LBH589使用方法MDA)、超氧化物歧化物(Superoxide dismutase, SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidose, GSH-Px)],血清TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平，并观察治疗后临床疗效。结果 两组患者治疗后头晕耳鸣，多食易饥，倦怠乏力，盗汗自汗，五心烦热、口渴喜饮，心烦失眠、SCr、β2-MG、UTP、MDA、TGF-β1、TIMP-1水平均降低，SOD、GSH-Px、MMP-9水平较治疗前升高，差异有统计学意义(P<0.05);研究组头晕耳鸣，多食易饥，倦怠乏力，盗汗自汗，五心烦热、口渴喜饮，心烦失眠、SCr、β2-MG、UTP、MDA、TGF-β1、TIMP-1水平均较对照组明显降低，SOD、GSH-Px、MMP-9水平较对照组升高，总有效率高Metabolism抑制剂于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 加减参芪地黄汤能够有效改善糖尿病肾病患者临床症状，调节氧化应激指标及TGF-β1、MMP-9、TIMP-1水平，防止肾脏纤维化，值得临床推广使用。

拟人参皂苷F11(Pseudo-ginsenoside F11,PF11)是西洋参中特有的奥克梯隆型皂苷farmed Murray cod类成分,现代药理学研究表明,PF11对心血管系统,神经系统,肾脏及肺部均具有保护作用。但其在西洋参中含量较低,很难实现工业化生产。为实现抗心绞痛1类新药PF11的开发及产业化,通过结构修饰关键技术,将丰富的达玛烷型人参皂苷转化奥克梯隆型人参皂苷PF11,达NSC 125973小鼠到了开发PF11的目的。因此,本论文针对工业化生产及创新药物开发中涉及到的PF11原料药及其制剂合成原料、合成工艺、质量研究及稳定性等科学问题,分别对合成PF11原料西洋参茎叶三醇组皂苷(Panax quinquefolium triolsaponins,PQTS)化学成分进行了分析、开展了PF11合成工艺的优化、对其质量标准及有关物质进行了系统研究、在此基础上建立了PF11原料药及其滴丸剂质量标准、进一步开展了PF11原料药及其滴丸剂稳定性等药学方面的研究,同时采用体外实验,初步研究了PF11对缺血心肌引起的心绞痛的保护作用。本文研究结果为PF11原料药及其滴丸制剂药品申报所需数据资料提供了科学依据。1、西洋参茎叶三醇组皂苷化学成分分析首次利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(Ultra performance liquid chromatography quadrupole-time of flight mass spectrometry,UPLC-Q/TOF-MS)技术结合UNIFI数据分析平台,对PF11合成原料PQTS化学成分进行了快速分析与鉴定。共鉴定出三萜皂苷类化合物31个,其中C-20位侧链发生变化的10个,未发生变化的21个。2、拟人参皂苷F11合成工艺的优化研究首次运用单因素考察结合Box-BehnLGX818生产商ken Design-响应面法对PQTS碱解制备人参皂苷Rg_2工艺进行优化,得最佳工艺参数为反应碱度7.6%、温度185℃、时间5 h。利用单因素考察试验,对达玛烷型人参皂苷Rg_2氧化环合制备奥克梯隆型人参皂苷PF11合成工艺进行了优化,得最优工艺参数为反应温度75℃、时间6min、氧化剂用量1.2 eq.。3、拟人参皂苷F11有关物质分离、鉴定利用大孔吸附树脂、正反相硅胶柱、重结晶等分离纯化方法,对PF11合成工艺过程中所产生的有关物质进行了分离鉴定,共分离得到6个人参皂苷类化合物。并通过理化性质分析、核磁共振谱(Nuclear magnetic resonance,NMR)及高分辨率质谱(High resolution mass spectrometry,HR-MS)等手段对其进行结构鉴定,鉴定出达玛烷型人参皂苷4个,奥克梯隆型人参皂苷2个。4、建立拟人参皂苷F11原料药及其滴丸制剂质量标准首次依照《化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》及《中国药典》2020年版的相关规定,对PF11原料药及其滴丸的性状、鉴别、检查与含量测定等方面进行了研究,在此基础上建立了PF11原料药及滴丸的质量标准(草案)。5、拟人参皂苷F11原料药及其滴丸制剂的稳定性研究首次依照《中国药典》2020年版四部9001原料药物与制剂稳定性试验指导原则,对PF11原料药及滴丸进行影响因素试验、加速试验与长期试验,考察其稳定性,为该药品有效期、贮藏条件的确认等提供依据并保障其用药安全性。6、拟人参皂苷F11对缺血心肌的保护作用研究首次研究PF11对心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)大鼠离体心脏血流动力学的影响,利用Langendorff离体心脏灌流系统制备大鼠离体心脏MIRI模型,BL-420VHD生物机能实验系统检测离体心脏血流动力学变化。实验结果发现,PF11可通过抑制LVDP的降低幅度,降低LVEDP,减轻MIRI对大鼠离体心脏的左心室收缩和舒张功能障碍,并能增强心脏搏出功能,其中高剂量给药组(50μg/m L)效果最为显著。综上所述,本研究为进一步开发抗心绞痛1类化学药品创新药拟人参皂苷F11原料药及其拟人参皂苷F11滴丸制剂,提供了部分药学及药效学的数据支持。

目的·探究microRNA-30b-5p (miR-30b-购买Naporafenib5p)在多囊卵巢综合征（polycystic Immunoassay Stabilizersovary syndEntinostat化学结构rome,PCOS）大鼠中的表达及miR-30b-5p过表达对卵巢颗粒细胞（granulosa cell,GC）自噬的影响。方法·采用脱氢表雄酮（dehydroepiandrosterone,DHEA）建立PCOS大鼠模型，实时荧光定量PCR (real-time fluorescent quantitative PCR,qRT-PCR)和Western blotting检测正常组和PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p和自噬相关蛋白5同源物（autophagy-associated protein 5 homologue,Atg5）的表达。分离并培养原代PCOS大鼠卵巢GC，分为对照组、miR-NC组、miR-30b-5p过表达组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-NC组、miR-30b-5p过表达+pcDNA3.1-Atg5组，另取正常组大鼠卵巢GC为空白组；将miR-30b-5p mimic和pcDNA3.1-Atg5及相应的阴性对照转染到细胞中，转染48 h后，q RT-PCR检测各组细胞中miR-30b-5p和Atg5 mRNA表达，验证转染效果。CCK-8及流式细胞仪分别检测细胞活力和凋亡率；免疫荧光染色检测各组细胞微管相关蛋白1轻链3 (microtubule-associated protein1 light chain 3,LC3)阳性表达；Western blotting检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1和LC3蛋白表达。结果·PCOS组大鼠卵巢组织中miR-30b-5p表达水平显著低于正常组，Atg5 mRNA和蛋白水平显著高于正常组（均P=0.000）。转染后，与空白组相比，对照组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著降低，Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著升高（均P=0.000）；与对照组相比，miR-30b-5p过表达组卵巢GC中miR-30b-5p水平、细胞凋亡率、p62蛋白水平显著升高，Atg5 mRNA和蛋白水平、细胞增殖活性、LC3阳性细胞百分比、Beclin-1蛋白水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著降低（均P=0.000）。上调Atg5可明显减弱miR-30b-5p过表达对卵巢GC增殖和自噬的抑制作用（均P=0.000）。结论·MiR-30b-5p在PCOS中呈低表达；过表达miR-30b-5p可抑制PCOS大鼠卵巢GC增殖和自噬，促进细胞凋亡，其作用机制可能与抑制Atg5表达有关。

植物内生真菌是指在植物部分或整个生命周期中,存在于植物健康组织内部的真菌,一般不会造成宿主植物明显的感染伤害。植物内生真菌与寄主植物之间长期协同进化,能够产生许多与寄主植物相同或相似的结构新颖且具有药用价值的次级代谢产物。动物来源的真菌作为天然产物研究中的一类新型真菌资源相比于其他类型真菌研究较少,但因其特殊的生存环境,具有丰富的生物多样性,并且能够产生特异性生物活性的新颖代谢产物,而具有非常广阔的研究前景。因此,对植物内生真菌和动物来源真菌的化学成分及生物活性研究是天然产物新药研究工作中至关重要的组成部分。为了扩大真菌筛选研究范围,发现更多特殊生境真菌产生的新颖天然产物,本文在三类植物样本及三类动物样本中共培养及纯化得到30株真菌。根据菌种鉴定结果结合化学成分分析和活性初筛,从中选取了 4株具有较大研究潜力的真菌以及1株前期有一定研究基础的地衣内生真菌作为后续研究的目标菌株。对五株不同来源的真菌Xylaria sp.、Phialocephala fortinii、Penicillium citrinum、Aliiruegeria sabulilitoris和Talaromyces sp.使用大米培养基放大发酵,乙酸乙酯提取得到粗浸膏。采用各种分离手段:硅胶柱色谱、ODS柱色谱、中低压柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等对大米发酵粗提物进行分离,共得到85个化合物,其中新化合物23个。在化合物结构鉴定过程中充分运用核磁共振波谱、质谱、紫外光谱、红外光谱、圆二色谱、X射线单晶衍射等方法确定了所得化合物的平面结构和立体构型。并测试了部分化合物的抗肿瘤、抗炎、抗真菌等生物活性。从柘木内生真菌Xylaria sp.(No.ZW-1)的次级代谢产物中分离得到35个化合物,包括5个2,5-二苯基环戊酮烯类化合物(1a、1b、1c、2a和2b)、7个α-吡喃酮类化合物(3-9)、1个γ-吡喃酮类化合物(10)、15个环二肽类化合物(11-25)、3个异香豆素类化合物(26-28)、3个其他类型生物碱类化合物(29-31)以及1个倍半萜类化合物(32)。其中化合物1a-1c、2a、2b、3-11为新化合物,共14个。对2,5-二苯基环戊酮烯类化合物1-2进行了生物合成途径推测。运用HPLC-MS分析手段确定了新化合物6-8为真菌产生的天然产物。此外,对新化合物1a-11进行了细胞毒活性和抗炎活性测试,结果显示化合物6对PC3肿瘤细胞株显示中等强度的抑制活性(IC50值为14.75μM),化合物1c和8对NO生成具有一定程度的抑制活性(IC50值分别为49.76和69.68 μM)。对前期有一定研究基础的地衣内生真菌Phialocephala fortinii(No.4537d)进行了二次放大发酵,在新苝醌类化合物分布集中的极性组分中分离得到8个化合物,包括7个苝醌类化合物(33-39)和1个螺二萘类化合物(40)。其中化合物33-37为新化合物,共5个。periprosthetic infection细胞毒活性研究显示化合物33、34、38和40选择性的对EC109肿瘤细胞株显示一定的细胞毒活性,其IC50值范围为24.5～33.3μM。从苔藓内生真菌Penicillium citrinum(No.7-3)次级代谢产物中分离得到14个化合物,包括2个异香豆素类化合物(41-42)、4个苯酚类化合物(43-46)、4个橘霉素单体类化合物(47-50)、1个橘霉素二聚体类化合物(51)、2个甾体类化合物(52-53)和1个二氢α-吡喃酮类化合物(54)。其中41为新化合物,并且该化合物在本身对白色念珠菌野生型菌株SC5314和耐药菌株YEM13不具有明显抗真菌活性的前提下可以有效增强YEM13对氟康唑(FLC)的敏感性,在41为16μg/mL时可以将FLC的MIC80值降低为8μg/mL。从蚯蚓来源真菌Aliiruegeria sabulilitoris(No.SQ6-1)selleck次级代谢产物中分离得到18个化合物,包括2个结构类型新颖的聚酮类化合物(55-56)、7个苯醚类化合物(57-63)、4个其他类型聚酮类化合物(64-67)、2个萘类化合物(68-69)和3个简单芳香类化合物(70-72)。其中55-57为新化合物,并对化合物55和56进行了生物合成途径推测。从东亚钳蝎来源真菌Talaromyces sp.(No.XZ-2)次级代谢产物中分离得到10个已知化合物,包括1个苯醚类化合物(73)、1个蒽醌类化合物(74)、1个异香豆素类化合物(75)、1个环己烯酮类化合物(76)和6个其他类型芳香类化合物(77-82)。其中化合物79为首次分离到的天然产物。对所得化合物生物活性研究显示77-79能够同时增强白色念珠菌耐药菌株YEM13和YEM15对FLC的敏感性(FICI 值<0.5)。本文通过对五株不同来源真菌次级代谢产物的化学成分及生物活性进行研究,selleck激酶抑制剂分离得到大量天然产物,其中部分为新结构化合物,且不乏部分生物活性显著的化合物。以上研究成果丰富了植物内生真菌及动物来源真菌代谢产物的研究,说明二者是新颖活性天然产物的重要来源,有待于进一步深入研究及挖掘。

目的 观察子午流注腹部按摩联合穴位贴敷对气虚型冠心病便秘患者的干预效果。方法 随机抽取68例气虚型冠心病便秘患者行非同期随机对照试验，共分4组，A组17例，B组18例，C组17例，D组16例。A组行常规护理; 确认细节B组在常规护理的基础上行子午流注腹部按摩; C组在常规护理的基础上行穴位贴敷; D组行子午流注腹部按摩的同时行穴位贴敷。观察4组干预前及干预1周、2周后的中医证候评分、便秘生活质量量表(PACselleck PF-07321332-QOL)评分、疗效评定。结果 4组不同时间中医证候评分、便秘生活质量及评分疗效评价比较，时间效应，组间效应差异均有统计学意义(P <0.05)，其中D组效果最优，A效果最差。结论 子午流注腹部按摩和穴位贴敷，不论是单独还是联合使用均Technical Aspects of Cell Biology能有效改善气虚型冠心病患者的便秘症状，其中联合护理效果最佳。

研究不同苦荞多肽的抗氧化活性，开发相关产品，提高苦荞的附加值。通过碱提酸沉酶辅助的方法提取苦荞蛋白质，再CX-5461研究购买经由胰蛋selleck抑制剂白酶与碱性蛋白酶复合酶水解苦荞蛋白，利用响应面优化得到两种酶复合的最佳酶解条件为蛋白浓度5mg/mL，酶添加量0.1%，双酶比例（胰蛋白酶：碱性蛋白酶）3:1，酶解pH7.5，酶解温度55 ℃，酶解时间3 h。对双酶解多肽产物进行抗氧化活性测定，结果表明，川荞1号和云苦3号的超氧阴离子自由基清除率较高，分别为97.23%、96.45%；而川荞1号和米荞对ABTS~(+)和DPPH自由基均表现出较高的清除能力。对ABTS~(+)清除能力分别为51.54%和54.41%；对DPPH的清除能力分别为87.35%和84.91%。迪苦2号和川荞1号对羟基自由基清除率较高，分别为90.47%、91.32%。不同苦荞蛋白双酶解多肽的抗氧化活性存在一定的差异。胰蛋白酶与碱性蛋白酶双酶水解的苦荞蛋白可以获得高抗氧化活性presumed consent的苦荞多肽，为苦荞多肽相关产品的开发提供参考。

目的 探究成纤维细胞生长因子受体4(fibroblast grselleck NMRowth factor receptor 4,FGFR4)在结直肠癌组织中的表达情况及其对SW620细胞生物学功能的影响。方法 利用癌症基因图谱(the cancer genome atlas, TCGA)数据库中结直肠癌的数据分析FGFR4 mRNA在结直肠癌组织中的表达。使用基因集富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)进行生物信息学分析寻找FGFR4影响的相关信号通路。构建pcDNA3.1-FGFR4过表达载体，分为实验组与对照组。分别采用细胞计数试剂盒8(cebioactive nanofibresll counting kit-8,CCK-8)实验、E7080 IC50流式细胞凋亡检测、细胞划痕实验和Transwell实验检测过表达FGFR4对SW620细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。结果 TCGA数据库数据分析结果显示FGFR4 mRNA在结直肠癌中的表达高于癌旁组织(P<0.05),GSEA结果显示FGFR4高表达在碱基切除修复、谷胱甘肽代谢、磷酸戊糖途径、核糖核酸聚合酶、硒氨酸代谢等通路富集(P<0.05)。CCK-8实验、细胞划痕实验和Transwell实验结果表明，与对照组相比，实验组中SW620细胞的增殖、迁移、侵袭能力均明显得到促进(P<0.05)。流式细胞凋亡检测结果显示，过表达的FGFR4可以抑制结直肠癌SW620细胞凋亡(P<0.05)。结论 FGFR4在结直肠癌组织中存在高表达，且与预后相关。过表达FGFR4促进结直肠癌SW620细胞的增殖、迁移及侵袭等特性并抑制SW620细胞的凋亡。FGFR4有可能成为结直肠癌诊断和治疗的潜在靶点。

目的：观察UPF1在乳腺癌中的表达，对人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、迁移和侵袭的影响，及其可能的作用机制。方法：使用生物信息学方法分析UPF1在乳腺癌组织中的表达及作用，构建UPF1小干扰RNA(siRNA)并转染乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞株，构建外源性的UPF1低表达的重组细胞，通过实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测重组细胞中UPF1的表达水平；CCK-8法检测细胞的增殖；划痕愈合实验及Transwell小室法分别检测细胞横向和纵向迁移以及侵袭能力；实时荧光定量PCR法检测基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase, MMP9)以及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)标志物E-钙黏着蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)mRNA表达量的变化；蛋白质印迹法检测MMP2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达量的变化。结果：生物信息学分析表明UPF1在乳腺癌肿瘤组织中高表达，与免疫细胞浸润相关，并与抑癌基因表达呈正相关，mRNA水平进一步验证UHbeAg-positive chronic infectionPF1在乳腺癌E-616452细胞中高表达，敲低UPF1后，乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中UPF1的mRNA和蛋白质表达水平均显著下降(P<0.05,P<0.05),MDA-MB-231和MCF-7细胞的体外增殖能力显著增强(P<0.0001,P<0.05),迁移(P<0.05,P<0.001)与侵袭能力(P<0.01,P<0.01)也显著提升，实时荧光定量PCR、Western blot结果显示UPF1可抑制EMT相关通路。结论：UPF1在乳腺癌中高表达，但是UPF1在乳腺癌中可能起抑癌作用，UPF1可能通过抑制EMT通路抑制乳腺癌MDA-MBMK-1775 IC50-231和MCF-7细胞的增殖、迁移与侵袭。

免疫相关性脑炎是一类由机体自身免疫机制介导的脑炎，肿瘤和感染是较明确的诱发因素。免疫检查点抑制剂(ICI)引起的免疫相关性脑炎鲜有报道。本文报道本院收治的1例免疫相关性脑炎病例，患者为60岁男性，因胸膜间皮瘤应用纳武利尤单抗联合伊匹木单抗治疗，用药后第5周出现精神行为异常、意识障碍，但脑脊液自身免疫性脑炎相关抗体、副肿瘤综合征相关抗体及寡克隆区带均为阴性，经停止免疫治疗、糖皮质激素大剂量冲击及足量的丙种球蛋白等综合治chemically programmable immunity疗后，患者精神行为及意识GSKJ4抑制剂恢复正常，症状好转出院。此外，本文还就免疫相关性脑炎的发病机制、临床表现和诊断治疗等方面进行了相关文献分析讨论selleck PS-341，以期能提高临床医师对免疫相关性脑炎的认识和治疗水平。